淺析食品、藥品、化妝品微生物檢驗的異同

曹魯娜 魏紅煥 趙蕊蕊 宋紅衛

摘 要：通過對食品、藥品、化妝品三個品類微生物檢驗在檢驗依據、樣品采集及檢驗用量、培養基、實驗室環境、方法適用性、具體操作差異（以菌落總數為例）等方面進行對比分析，淺析三個品類在微生物檢驗中的異同，發現三品類微生物檢驗可以優勢互補，互相借鑒。建議相關從業人員在工作中總結經驗、融會貫通，持續增強實驗的嚴謹性和科學性，更好地保障人民群眾的飲食、用藥、用妝安全。

關鍵詞：食品，藥品，化妝品，微生物檢驗

DOI編碼：10.3969/j.issn.1002-5944.2023.20.032

0 引 言

近年來，隨著國務院就市場監管系統機構改革提出的指導意見，各級市場監督管理機構陸續完成了改革，其下屬的檢驗機構隨之整合，涉及產品領域涵蓋了食品、藥品和化妝品（以下簡稱三品類）等品類的檢驗。目前，各相關檢驗機構的檢驗部門組織結構一般分為理化、微生物、毒理病理、動物實驗等科室，其中微生物室承擔著三品類的微生物檢驗。微生物檢驗控制是保障三品類質量安全的重要措施，與人民群眾飲食、用藥、用妝安全息息相關。三品類在微生物檢驗中既有相同點，又有不同點，檢驗工作中有值得相互借鑒之處，對微生物從業人員提出了更高要求，把握三品類的各自特點，才能保證出具可靠的檢驗數據、準確的檢驗結果。本文通過分析比較三品類微生物檢驗的異同點，為相關從業機構和同行提高檢驗檢測水平提供參考依據。

1 三品類微生物檢驗的重要性

食品微生物檢測是國家食品風險監控項目的組成部分[1]，《國家食品安全監督抽檢實施細則（2022版）》中共涉及33個食品大類，其中設置微生物檢驗項目的有30個食品大類[2]。這足以證明食品微生物檢驗的重要性。

藥品是用于調節人的生理機能的物質。微生物污染直接影響藥品有效性，還有可能危及用藥患者的生命安全[3]。

化妝品是施用于皮膚、毛發、指甲、口唇等人體表面的日用化學工業產品[4]。劉佩等[5]研究發現化妝品不合格項目中菌落數超限的不合格樣品最多，而化妝品污染微生物后可能會導致人體發生皮膚過敏、感染、眼部疾患等損傷，危害使用者的健康[5-6]。

2 三品類微生物檢驗的異同

2.1 三品類微生物檢驗的共同處

三品類微生物檢驗均是以微生物分析為基礎，是微生物分析應用的不同分支。其共同點在于：一是檢驗對象一致，都是微生物，有著相同的檢驗原理；二是檢驗目的一致，都是為了檢驗樣品污染微生物的程度，保證人民群眾的使用安全有效；三是開展檢驗依據的法典、標準或規范等都是國家頒布的。

2.2 三品類微生物檢驗的不同處

三品類微生物檢驗在標準依據、檢驗對象（微生物種類）、培養基、環境及設備、方法適用性等方面均有差異。就檢驗依據而言，三品類微生物檢驗依據的標準名稱、現行有效版本及標準更新情況均不同，微生物限度標準也有所不同。檢驗依據：食品為《中華人民共和國國家標準》、行業標準等；藥品為《中華人民共和國藥典》（以下簡稱《中國藥典》）；化妝品為《化妝品安全技術規范》。現行有效版本：食品為GB 4789《食品安全國家標準 食品微生物檢驗系列標準》；藥品為《中國藥典》2020年版四部；化妝品為《化妝品安全技術規范》2021年修訂版。食品標準不定期更新，需要及時查新；藥品標準自1985年版以來，更新周期為5年，2020年版為第十一版；化妝品標準不定期更新，2002年發布第一版 ，分別于2007、2015、2021年更新。

3 檢驗實踐中的借鑒

3.1 樣品采集

樣品采集是微生物檢驗的前置環節，也是關鍵影響要素，樣品是否具有代表性，直接關系到能否真實反映出樣品污染微生物的情況，影響檢驗結果。在抽樣方法和抽樣數量方面：食品隨機抽樣，根據檢驗目的等制定二級或三級采樣方案，抽取不少于5份樣品；藥品隨機抽樣，不得抽取外包裝有明顯破損的樣品，抽取不少于2個最小包裝；化妝品要求樣品具有代表性，不少于2個包裝單位。在檢驗量方面：食品一般是25 g（mL）；藥品制劑一般是10 g（mL），大蜜丸、貼膏劑等特殊劑型另有規定，貴重藥品等檢驗量可酌減；化妝品一般是10g（mL）。

對比而言，本文認為食品抽樣方法更加復雜細致，更具隨機性和代表性，且檢驗量較大，能更好地反映出樣品的微生物真實污染水平。這與三品類的自身特點有關，相對于藥品和化妝品，食品抽樣包裝規格更大、使用量更大、使用人群范圍更廣、受輿論關注程度更高。

3.2 培養基的質量控制

培養基是微生物生長的物質基礎，在微生物檢驗實驗物料中屬于關鍵要素，其質量狀況直接影響檢驗結果。三品類質控要求依據的區別：食品為GB 4789.28 《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 培養基和試劑的質量要求》；藥品為《中國藥典》四部通則（以下簡稱通則）9203藥品微生物實驗室質量管理指導原則；化妝品未作要求。質控試驗區別：食品為pH值、顏色、澄清度、生長率（PR值、G值、濁度值）、選擇性及特異性測試等；藥品為pH值、適用性檢查（回收率、促生長能力、抑制能力和指標特性）、靈敏度檢查、穩定性試驗；化妝品未作要求。

食品和藥品培養基質控具體要求有所不同。比如通則9203藥品控制菌檢查培養基適用性試驗中僅對菌落生長狀況、大小和形態特征一致性作出要求；GB 4789.28食品培養基質控則提出PR值、G值、濁度值等量化要求，實操性更強。再如，GB 4789.28要求培養基制備后標記有效期，而通則9203中給出了保存參考期限（1周且須經過驗證）。由此可見，食品和藥品培養基質控各有優劣，可相互借鑒，以保證培養基質量，提高微生物檢驗結果的準確性。化妝品微生物檢驗對培養基沒有提出質控要求，其菌落總數用卵磷脂吐溫80營養瓊脂，配方中的卵磷脂和吐溫80中和防腐劑的效果較差，可能造成檢驗結果不準確[7]。建議參考食品、藥品用培養基的質控要求，適當進行控制。

3.3 實驗室環境要求

微生物檢驗對試驗環境要求較高，如果潔凈級別不達標，可能造成樣品的二次污染，出現假陽性結果。按行業共識，樣品的檢測環境不能低于生產環境，否則檢驗結果的可信度下降。三品類在環境要求方面：食品和化妝品均要求潔凈區域內單方向工作流程；藥品要求不低于D級背景下的生物安全柜或B級潔凈區。在微生物監測方面：食品對溫度、相對濕度、噪聲等物理參數有要求，藥品除溫度、相對濕度、噪聲等物理參數外，對懸浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面微生物（含手套及操作服）等有明確要求；化妝品則未作要求，與藥品和化妝品相比較，食品標準對微生物的要求一般限值稍高，而且食品檢驗過程中，一般菌落生長比較多，對藥品和化妝品檢驗容易造成交叉污染，導致出現假陽性結果。本文建議食品和化妝品實驗室可以參考通則9205的藥品潔凈實驗室微生物監測和控制指導原則開展潔凈監測活動。微生物實驗室三品類潔凈區獨立設置可降低交叉污染的風險，如果實驗室受條件限制沒有各自獨立區域，應制定相應的控制措施，避免出現假陽性和假陰性結果，保證檢驗結果的準確性。

3.4 方法適用性

藥品微生物計數方法和控制菌檢查應進行方法適用性試驗，以確認所采用的方法適合于本產品的微生物計數或控制菌檢查[8]。《中國藥典》2010年版以前，對方法適用性試驗未作要求，試驗中經常遇到低稀釋級樣品沒有菌落生長，但高稀釋級樣品卻有菌落生長的現象。其原因在于可能是藥品中含有抑菌活性成分，方法適用性試驗可以去除樣品的抑菌活性。

在生產和加工食品的過程中使用化學防腐劑，能夠有效抑制微生物產生，延長保存期限。某些食品中有國家標準允許添加的防腐劑[9]，化妝品中加入防腐劑是為了控制化妝品衛生質量，但是防腐劑的存在會影響微生物的檢測結果[7]。食品和化妝品微生物檢驗未提出方法適用性的要求，但本文認為，為了增強試驗的科學性和嚴謹性，保證檢驗結果的準確性、真實性和可靠性，建議參考藥品微生物限度檢查的理念，開展方法適用性試驗考察及評估。目前，已有多個研究借鑒藥品微生物限度檢查方法適用性試驗對化妝品微生物檢驗開展方法適用性研究，用于判斷檢驗方法是否適用于相應產品[10-12]。

3.5 實驗操作中的差異（以菌落總數為例）

三品類微生物檢驗在培養基配制、滅菌、儀器設備等方面要求相似，以菌落總數為例，比較三品類在稀釋液、培養基、培養溫度和時間等方面的差異。稀釋液：食品用pH7.2 磷酸鹽緩沖液或0.85%生理鹽水；藥品用pH7. 0 無菌氯化鈉－蛋白胨緩沖液，或 pH7.2 磷酸鹽緩沖液，或胰酪大豆胨液體培養基；化妝品用0.85%生理鹽水。培養基：食品用PCA培養基；藥品用胰酪大豆胨瓊脂培養基；化妝品用卵磷脂吐溫 80 營養瓊脂培養基。培養溫度和時間：食品（36±1）℃培養（48±2） h，水產品（30±1）℃培養（72±3） h；藥品30～35℃培養3～5天；化妝品（36±1）℃培養（48±2） h。

4 微生物的鑒定

微生物鑒定是借助現有的分類系統，通過對未知微生物的特征測定，對其進行細菌、酵母菌和霉菌大類的區分或屬、種及菌株水平確定的過程[8]。藥品在微生物鑒定中可自行選擇適宜的驗證方法，呈現出開放性和靈活性[3]。食品中的致病菌、化妝品中的控制菌檢查在出現可疑菌落后，必須嚴格按照相應的法定方法進行，不得自行變更。

5 結 語

通過對三品類微生物檢驗在檢驗依據、樣品采集及檢驗用量、培養基、實驗室環境、方法適用性、具體操作差異（以菌落總數為例）等方面進行對比分析，發現三品類微生物檢驗相似之處較多，兼具各自的特點，可以優勢互補。食品微生物檢驗中檢驗程序更加詳細和明確，利于實際操作應用；化妝品微生物檢驗由于開展時間較短，規范化程度尚待提高；而藥品微生物限度檢查標準體系實現了與國際標準的接軌，可以對食品和化妝品的微生物鑒定提供借鑒。建議相關從業人員在工作中總結經驗、融會貫通，關注實驗細節，持續增強實驗的嚴謹性和科學性，提高微生物檢驗的質量控制水平，更好地保障人民群眾的飲食、用藥、用妝安全。