牛羊蠕蟲病流行病學調查及驅蟲實驗研究

馮顯鈐，黃莉，韋振飛，黃麗*

（1.廣西農業(yè)職業(yè)技術大學，廣西 南寧 530007；2.來賓市畜牧養(yǎng)殖服務中心，廣西 來賓 546100；）

近年來，牛羊養(yǎng)殖產業(yè)發(fā)展迅速，隨之而來的各種傳染性疾病已成為牛羊養(yǎng)殖產業(yè)可持續(xù)發(fā)展的主要威脅因素，其中蠕蟲病是對牛羊危害較大的一種體內寄生蟲病。在蠕蟲病防治過程中，養(yǎng)殖戶用藥不科學，導致蠕蟲耐藥性持續(xù)增強，藥物治療效果不好，蠕蟲病防控難度日趨加大。基于此，本文對轄區(qū)范圍內牛羊蠕蟲病的流行病學深入調查，篩選科學有效的防治藥物。

1 材料及方法

1.1 材料選取

以轄區(qū)內50家牛羊養(yǎng)殖專業(yè)戶為研究對象，通過走訪調查，明確了牛羊養(yǎng)殖場內蠕蟲病發(fā)病特點。

1.2 調查方法

采取實地調查方法，結合獸醫(yī)門診病例情況進行調查。

1.3 蠕蟲蟲卵實驗室檢測方法

1.3.1 糞便采集

結合養(yǎng)牛（羊）場規(guī)模，隨機抽取5%～10%的犢牛（羔羊）、育成牛（育成羊）、成年母牛（成年母羊）進行糞便檢查。對每頭牛（羊）采集50～100 g新鮮糞便，置于樣品袋內逐一編號并標記好后，迅速在實驗室內進行檢查，若無法及時送檢，需將所采集的樣品置于冷藏箱內保存。

1.3.2 直接涂片法

在潔凈的載玻片上滴入一滴生理鹽水，采用牙簽或者棉簽棍挑取綠豆大小的糞便并置于生理鹽水內涂抹均勻；需嚴格把控涂片厚度，以透過涂片后仍可辨認書上字跡較為適宜。通常于低倍顯微鏡下觀察，若采取高倍顯微鏡觀察，需要加蓋玻片。需對蟲卵及糞便內異物做好鑒別工作。可連續(xù)涂片3～5次，以提升檢出效率。

1.3.3 集蟲法

(1)漂浮法。漂浮法主要用于檢查比重較小的蟲卵，即選擇比重超過蟲卵的糖類或者鹽類作為漂浮液，這樣糞便內蟲卵將在液體表面浮集，便于提升檢出率。漂浮法適宜對絕大多數線蟲卵及絳蟲卵進行檢查。

(2)飽和鹽水試管漂浮法。在燒杯內放入2 g左右糞便以及10～20倍漂浮液，充分攪拌后，利用篩網或者紗布將糞液過濾至另一燒杯內，將濾液轉移至青霉素瓶內或者平口試管內，加入飽和鹽水直至液面略高于瓶口但不溢出，在管口蓋上蓋玻片，確保蓋玻片與液面緊密接觸，避免其中有氣泡，15～30 min后，將載玻片輕輕取下，使液膜向下并置于載玻片上進行鏡檢。

(3)沉淀法。沉淀法適用于檢測棘頭蟲卵、吸蟲卵等比重較大的蟲卵。其檢測原理為：在用清水反復洗滌糞便時，比重超過水的蟲卵將沉積于容器底部，可通過沉渣收集并檢查蟲卵。如循環(huán)沉淀法：取5 g左右糞便置于燒杯內，加入20倍清水攪拌均勻，攪拌均勻后采用濾糞網過濾至另一個燒杯內，加滿水后靜置30 min，將上層液體傾去后，僅留下沉淀，接著加滿水，靜置30 min后再次傾去上層液體，重復上述操作直至上層液體清澈，再次傾去上層液體，將沉渣取出后涂抹于載玻片上，然后在顯微鏡下觀察。

1.3.4 線蟲幼蟲檢查法

(1)貝爾曼法。貝爾曼法主要用于對牛（羊）肺線蟲病的診斷。直接從牛（羊）直腸內采集供檢糞便，將15～20 g糞便置于直徑為10 cm的銅篩內，然后取直徑為15 cm的玻璃漏斗，在其下端連接長度為10 cm的膠皮管，再將漏斗置于漏斗架上，并將40℃溫水倒入漏斗內，將銅篩浸入水內，淹沒糞便，于室溫下靜置1～2 h，此時新孵化的線蟲幼蟲將在膠皮管底部沉積，將上清液傾去后，在載玻片上滴入沉渣并在顯微鏡下觀察，可看到活動幼蟲[1]。

(2)平皿幼蟲分離法。在表面皿或者平皿內置入3～4個糞球，加入適量40℃的溫水，5～10 min后將糞球去除，在低倍顯微鏡下觀察平皿內液體，以明確有無活動幼蟲。

(3)幼蟲培養(yǎng)檢查法。幼蟲培養(yǎng)法主要用于診斷圓形線蟲病。采集新鮮糞便置于平皿內堆成丘狀，糞便高度需略高于平皿邊緣，于25℃～28℃下培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中需每日加入少量清水以維持正常的濕度。7日后糞便內蟲卵孵化為幼蟲，幼蟲主要在糞堆頂部周邊平皿蓋上蒸餾水內聚集，采用滴管將蒸餾水洗除后滴在載玻片上，在顯微鏡下觀察有無活動幼蟲。

1.4 調查結果

共調查1000只羊，調查結果見表1。從表1中可以看出，羊只蠕蟲感染率為34.4%，其中線蟲感染率為57.2%、吸蟲感染率為33.1%、絳蟲感染率為12.9%。本次共調查出12種蠕蟲幼蟲或者蠕蟲卵，其中線蟲主要為捻轉血矛線蟲、絲狀網尾線蟲幼蟲、食道口線蟲、毛圓線蟲、羊毛首線蟲、羊仰口線蟲6種；絳蟲為蓋氏曲子宮絳蟲、中點無卵黃腺絳蟲、莫尼茨絳蟲3種；吸蟲為肝片形吸蟲、東畢吸蟲、矛形雙腔吸蟲3種。其中優(yōu)勢蟲種為捻轉血矛線蟲及羊仰口線蟲，其感染率分別為34.8%、33.7%。

表1 羊只消化道寄生性蠕蟲感染率

共調查1000只牛，調查結果見表2。牛只蠕蟲感染率為34.8%，其中線蟲感染率為41.4%、吸蟲感染率為36.1%、絳蟲感染率為26.8%。此次共檢查出11種蠕蟲幼蟲或者蠕蟲卵。其中線蟲有唇乳突絲狀線蟲、類圓線蟲、輻射食道口線蟲、牛仰口線蟲、毛圓線蟲、犢牛首蛔蟲6種；絳蟲僅牛帶絳蟲1種；吸蟲有東畢吸蟲、肝片吸蟲、前后盤吸蟲、土耳其斯坦東畢吸蟲4種。

表2 牛只消化道寄生性蠕蟲感染率

2 牛羊蠕蟲驅蟲試驗

2.1 調查對象

在自然感染多種寄生蟲的牛羊中，分別隨機選擇40頭體重相當、年齡一致的患病牛羊。

2.2 試驗方法

在試驗前，采用麥克馬斯特法對牛羊糞便內EPG值計數，也就是計算每克糞便內蟲卵的數量。操作過程為：取2 g糞便置于小燒杯內，加入10 mL清水后攪勻，接著加入50 mL飽和鹽水，充分混合后采用篩網過濾，將濾液注入至麥克馬斯特板計數室內，靜置2 min后在顯微鏡下計算，將蟲卵數量乘以200即EPG值。采用蟲卵檢查結果為陽性的牛羊作為試驗對象。

結合病牛、病羊的年齡、臨床癥狀、蟲卵檢測結果等因素將其分為4組，A組口服15 mg/kg芬苯達唑，B組皮下注射0.2 mg/kg伊維菌素，C組口服20 mg/kg 吡喹酮，CK組不采取任何藥物治療。在用藥后，對牛羊臨床改善情況仔細觀察， 詳細記錄牛羊采食以及排便情況，計算驅蟲后EPG值。按照下式計算蟲卵減少率。

蟲卵減少率（%）＝（驅蟲前EPG值－驅蟲后EPG值）/驅蟲前EPG值×100%

2.3 驅蟲效果

對牛羊進行藥物驅蟲后，發(fā)現(xiàn)不同驅蟲藥物驅蟲效果差異較大，其結果見表3及表4。可以看到，伊維菌素的驅蟲效果最好，其次依次為吡喹酮、芬苯達唑。上述三種藥物蟲卵減少率均超過了86%。在后期牛羊養(yǎng)殖中，主要采取伊維菌素驅蟲，同時注意對多種驅蟲藥物輪換使用，以提升驅蟲效果，防止耐藥性的產生。

表3 羊驅蟲試驗效果

表4 牛驅蟲試驗效果

3 結語

通過調查發(fā)現(xiàn)，羊只蠕蟲感染率為34.4%，其中線蟲感染率為57.2%、吸蟲感染率為33.1%、絳蟲感染率為12.9%。牛只蠕蟲感染率為34.8%，其中線蟲感染率為41.4%、吸蟲感染率為36.1%、絳蟲感染率為26.8%。在流行病學調查基礎之上，選擇3種藥物進行治療，其蟲卵減少率均超過了86%，其中伊維菌素的驅蟲效果為最佳，值得大范圍推廣及應用。