老年慢性腎小球腎炎病人血清Ficolin-3水平與腎功能損害程度及預后的關系

周梅 湯義兵 曹雷 邵云俠

慢性腎小球腎炎(chronic glomerulonephritis，CGN)是一種由病原微生物感染引起自身異常免疫應答，造成腎小球局部性/彌漫性炎性改變的腎小球疾病，其起病隱匿，病情易反復、遷延，對病人身心健康構成極大威脅[1-2]。目前，研究認為CGN病變過程與免疫調節異常、氧化應激、炎癥反應、補體激活等有關[3-4]。明確CGN發病機制，對改善腎損傷有重要價值。研究顯示，纖維膠凝蛋白-3(Ficolin-3)是由FCN3基因編碼的一種蛋白，介導補體凝集素途徑，影響免疫炎癥反應，其在肺炎支原體感染中水平升高，可作為評估疾病嚴重程度的有效指標[5]。但Ficolin-3在CGN病人中的水平及其與腎功能損害程度、預后的關系鮮有報道。基于此，本研究通過檢測老年CGN病人血清Ficolin-3水平，分析其與腎功能損害及預后的關系，并初步探討Ficolin-3對老年CGN病人預后的評估價值，以期為臨床診療CGN提供依據。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2017年9月至2019年9月本院診治的老年CGN病人140例(CGN組)，其中男89例，女51例，年齡60～76歲，平均(67.38±6.81)歲。入院后，控制CGN病人飲食，囑病人避免劇烈運動，并預防感染、給予對癥支持等。選取同期健康體檢者140例為對照組，其中男85例，女55例；年齡60～78歲，平均(67.90±6.72)歲。納入標準：(1)CGN組病人符合《慢性腎小球腎炎診療指南》[6]中CGN有關診斷；(2)具備完整檢查資料。排除標準：(1)合并急性心肌梗死、心力衰竭或其他心腦血管病變；(2)合并結核、嚴重肝功能障礙、腫瘤；(3)高血壓/糖尿病腎病類繼發性腎臟病變；(4)合并呼吸道感染、泌尿系統感染等感染；(5)近1個月內服用降壓藥、腎毒性藥物。受試對象及親屬簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 樣本收集：收集CGN組治療前、對照組體檢當日空腹外周血約5 mL，分離血清(4000 r/min離心6 min)，分裝，于-80 ℃冰箱保存備用。

1.2.2 檢測指標：溶解適量血清，利用人Ficolin-3 ELISA試劑盒(ZN2180-ZHQ，北京百奧萊博科技有限公司)及酶標儀(SuPerMax 3000FA，上海閃譜生物科技有限公司)按ELISA法檢測血清Ficolin-3水平。此外，收集所有研究對象的TC、白蛋白、UA、BUN、血肌肝(SCr)等生化指標檢測結果。

1.2.3 腎功能評估[7]：參照慢性腎臟病流行病合作工作組(chronic kidney disease epidemiology collaboration, CKD-EPI)公式，并基于胱抑素C計算估算腎小球濾過率(estimated glomerular filtration rate，eGFR)，并根據eGFR水平將140例CGN病人分為3組，即正常-輕度下降組[eGFR>60 mL/(min·1.73 m2)，43例]、中度下降組[30 mL/(min·1.73 m2)≤ eGFR≤60 mL/(min·1.73 m2)，57例]、重度下降組[eGFR<30 mL/(min·1.73 m2)，40例]。

1.2.4 隨訪：對140例CGN病人隨訪2年，其中10例發展成慢性腎功能衰竭(chronic renal failure，CRF)(CRF組)，130例病情緩解/無進展(非CRF組)。

2 結果

2.1 對照組與CGN組一般資料和相關生化指標比較 與對照組相比，CGN組UA、BUN、SCr及血清Ficolin-3水平明顯升高，差異有統計學意義(P<0.01)。見表1。

表1 2組一般資料和相關生化指標比較

2.2 不同腎功能病人血清Ficolin-3水平及腎功能指標比較 UA、BUN、SCr及血清Ficolin-3水平在重度下降組、中度下降組和正常-輕度下降組呈逐漸下降趨勢，組間比較差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同腎功能病人血清Ficolin-3水平及腎功能指標比較

2.3 CGN病人血清Ficolin-3水平與腎功能指標的相關性 Pearson相關分析顯示，CGN病人血清Ficolin-3水平與UA、BUN、SCr均呈正相關(r=0.559、0.394、0.427，P<0.05)。

2.4 不同預后CGN病人血清Ficolin-3水平及腎功能指標比較 與非CRF組相比，CRF組病人UA、BUN、SCr及血清Ficolin-3水平明顯升高(P<0.05或P<0.01)。見表3。

表3 不同預后CGN病人血清Ficolin-3水平及腎功能指標比較

2.5 血清Ficolin-3及腎功能指標對CGN病人發生CRF的評估價值 血清Ficolin-3聯合腎功能指標評估CGN病人發生CRF的AUC為0.944，明顯高于血清Ficolin-3(Z=2.121，P=0.034)、UA(Z=2.516，P=0.012)、BUN(Z=2.081，P=0.037)、SCr(Z=1.974，P=0.048)單獨檢測。見表4。

表4 血清Ficolin-3及腎功能指標對CGN病人發生CRF的評估價值

2.6 多因素Cox回歸分析CGN病人發生CRF的影響因素 將CGN病人是否發生CRF(不發生=0，發生=1)為因變量，將UA、BUN、SCr、Ficolin-3以ROC曲線截斷值為界，轉換為二分類變量，即<截斷值賦值為0，≥截斷值賦值為1。多因素Cox回歸分析結果顯示BUN≥9.07 mmol/L、SCr≥88.64μmol/L、Ficolin-3≥45.02 mg/L為CGN病人發生CRF的危險因素(P<0.05)。見表5。

表5 影響CGN病人發生CRF的多因素Cox回歸分析

3 討論

CGN是一種原發性腎小球病變，以水腫、血尿、蛋白尿、腎功能減退、高血壓為主要表現，可引發腎纖維化，造成腎功能損害，危及病人健康[8-9]。UA、BUN、SCr等可一定程度反映機體腎功能狀態，腎功能損害嚴重的病人常常無逆轉治療的機會，容易出現CRF而不利于預后[10]。老年人由于組織、器官功能衰退，機體免疫力降低，病情若不能及時控制，更容易進展為腎功能衰竭，危害大。因此，尋找與老年CGN發病及CRF發生相關，且可有效評估老年CGN病人CRF的指標，并及早干預，對提高老年CGN病人生活質量有積極意義。

Ficolin是一類補體凝集素途徑的重要起始物，Ficolin-3作為Ficolin家族的一員，可介導細胞凋亡、識別糖類、調理吞噬、激活凝集素途徑，在局部/系統的免疫反應中起重要調節作用[11]。研究發現，Ficolin-3可通過激活補體凝集素途徑促進炎癥反應，其在蛛網膜下腔出血病人中水平升高，可能在疾病病理發展中發揮促炎作用[12]；另外，Ficolin-3作為一種模式識別分子，其在艾滋病病人中呈高水平，與CD4+T細胞數呈正相關，可能在艾滋病發生發展中發揮免疫調節作用[13]。本研究中CGN病人血清Ficolin-3水平明顯高于對照組，與謝樂靜等[14]研究相似，分析原因，高水平Ficolin-3可能通過介導凝集素途徑，促進補體激活及細胞凋亡，引發免疫炎性損傷，影響CGN病變進程，但其機制有待進一步探究證實。

Selistre等[7]研究報道，CKD-EPI公式更適用于65歲以上的CKD病人；另有研究顯示，聯合胱抑素C的CKD-EPI公式計算得出的eGFR用于評估老年慢性腎臟病病人預后最有優勢[15]。因此，本研究根據聯合胱抑素C的CKD-EPI公式計算的eGFR水平將CGN病人分為3組，結果顯示重度下降組病人血清Ficolin-3水平最高，其次為中度下降組，正常-輕度下降組病人血清Ficolin-3水平最低，提示腎功能損害越嚴重，血清Ficolin-3水平越高，Ficolin-3可作為反映老年CGN病人腎功能損害程度的指標之一。Pearson相關分析顯示，CGN病人血清Ficolin-3水平與UA、BUN、SCr均呈正相關，進一步提示Ficolin-3可能通過激活補體系統，促進炎癥反應，損傷腎功能，影響老年CGN病理發展，但其機制有待進一步研究證實。預后情況：CRF組病人UA、BUN、SCr及血清Ficolin-3水平均明顯高于非CRF組，提示血清Ficolin-3水平可能通過影響腎功能指標(UA、BUN、SCr)在老年CGN病人CRF發生中發揮作用。ROC曲線分析結果顯示，Ficolin-3、UA、BUN、SCr均可作為評估老年CGN病人發生CRF的重要指標。同時發現血清Ficolin-3聯合UA、BUN、SCr評估老年CGN病人發生CRF的AUC最大，且敏感度高達95.10%，提示聯合檢測Ficolin-3、UA、BUN、SCr，可能更有利于早期評估老年CGN病人預后。此外，多因素Cox回歸分析結果顯示，BUN≥9.07 mmol/L、SCr≥88.64μmol/L、Ficolin-3≥45.02 mg/L為影響老年CGN病人CRF發生的危險因素，提示臨床應及時監控上述指標，有利于及早防治老年CRF。

綜上所述，老年CGN病人血清Ficolin-3呈高水平，血清Ficolin-3水平變化與CGN病人腎功能損害程度及CRF發生有一定關系，Ficolin-3水平可作為評估老年CGN病人CRF發生風險的血清指標，且聯合腎功能指標(UA、BUN、SCr)具有更大的臨床價值。但本研究未對Ficolin-3在CGN中的作用機制進行深入探究，后期將結合基礎實驗進一步研究。