RPS14在結直腸癌組織中的表達及意義

岳斯琦，魏麗萍，何成彥

(吉林大學中日聯誼醫院 檢驗科，吉林 長春130033)

結直腸癌作為癌癥相關死亡的第四大原因，也是全球第三大最常診斷的惡性腫瘤。在東歐和亞洲地區，結直腸癌的發病率和死亡率上升迅速，預計到2030年，全球結直腸癌患者將新增220萬確診病例以及110萬的死亡病例[1]。在最近的研究報告中指出進行結直腸癌早期癌癥篩查診斷能顯著降低結直腸癌死亡率[2]，本實驗初步通過二維色譜質譜聯用技術及免疫印跡實驗來分析RPS14蛋白在結直腸癌組織與癌旁組織的差異，為結直腸癌的篩查和診斷提供幫助。

1 材料與方法

1.1 一般資料

吉林大學中日聯誼醫院組織標本庫中2018年到2020年術前未經治療的結直腸癌患者組織，所有標本均經病理學診斷為腺癌，共計16例。在患者術中留取結直腸癌組織和距離癌組織邊緣7 cm處的癌旁組織，完成采集迅速冷卻后用PBS徹底沖洗，液氮速凍，儲存在溫度為-80℃的冰箱中待用。研究經本院醫學倫理委員會批準。

1.2 儀器與試劑

高效液相色譜儀(美國安捷倫公司)，LTQXL 離子阱質譜儀(美國賽默飛公司)，電泳儀(柏奧易杰北京科技有限公司)，RPS14單抗(美國Affinity公司)，β-actin多抗(美國abcam公司)。BCA蛋白質定量試劑盒(美國伯樂公司)，碘代乙酰胺，DNA酶，RNA酶，TPCK修飾的測序級胰酶(美國西格瑪公司)。

1.3 方法

1.3.1蛋白提取及樣品制備 取出儲存于-80℃冰箱的樣本將其在液氮條件下研磨至粉末狀，在粉末中加入適量的蛋白裂解液并充分振蕩混勻30 min。后續在樣本中加入DNA酶和RNA酶來去除樣本殘留的物質，在4℃條件下1 200 rpm離心10 min。……