人參二醇皂苷通過調節上皮間質轉化抑制喉癌細胞的增殖和遷移

石耿隆，趙昀霞，顏如玉，孟 艷，孫宇新*，辛偉紅*

(1.吉林大學中日聯誼醫院 耳鼻咽喉頭頸外科，吉林 長春130033；2.吉林大學基礎醫學院 病理生理學系，吉林 長春130021)

喉鱗狀細胞癌占全身惡性腫瘤的5.7%～7.6%[1]，40%的患者在確診時已進展至Ⅲ期或Ⅳ期，復發和轉移是5年內喉癌患者死亡的主要原因[2]。上皮間質轉化(EMT)可增強細胞遷移和侵襲能力[3]。RAS/RAF/MEK/ERK，Wnt/β- catenin等多種信號傳導途徑參與EMT的激活和調控[3]。喉癌的轉移與EMT過程有關，調節EMT信號傳導途徑是減少喉癌轉移性的潛在治療策略[4]。人參二醇皂苷(PDS)是從人參莖葉中提取的屬于四環三萜類的原人參二醇型提取物。PDS及其代謝產物Rb2、Rd、F2、Rh2、Rg3、CK和PPD可有效抑制腫瘤細胞的侵襲和轉移[5]。PDS具有甾環結構，具有地塞米松樣抗炎、抗休克作用。本研究旨在觀察PDS對人喉癌Hep2細胞遷移的影響，報道如下。

1 材料和方法

1.1 細胞、主要試劑盒、儀器

人喉癌細胞系Hep2細胞(吉林大學基礎醫學院前列腺疾病預防和治療研究中心)，PDS(吉林大學自然醫學研究實驗室的專利產品，專利號為ZL98100070.3)，RPMI-1640培養基(美國Gibco公司)，胎牛血清(美國Clark Bioscience公司)，地塞米松(山東新華制藥有限公司)，Trizol(美國Invitrogen公司)，二甲基亞砜、蛋白酶抑制劑(美國Sigma公司)，逆轉錄試劑盒、SYBR實時熒光定量PCR試劑盒(北京寶泰克公司)，BCA蛋白質測定試劑盒(上海碧云天生物有限公司)。β-actin、MMP2、MMP9、E-cadherin抗體(美國Proteintech公司)，N-cadherin、vimentin、β-catenin抗體(北京博奧森公司)。酶標儀(德國Biotek公司)，CFX96實時熒光定量 PCR 儀、蛋白電泳儀和轉膜儀(美國 Bio-Rad 公司)。

1.2 細胞培養

Hep2細胞含有10%胎牛血清和1%青霉素-鏈霉素的RPMI-1640培養基中，于37 ℃，5%CO2培養箱中常規培養。……