T細(xì)胞亞群中Ki-67的表達(dá)及與自閉癥兒童腸道菌群結(jié)構(gòu)、核心癥狀的關(guān)聯(lián)及價(jià)值研究

楊錦容,蘇雅丹,朱競繁,巫清鵬

(1.惠州市中心人民醫(yī)院 兒科,廣東 惠州516000；2.惠州市第六人民醫(yī)院 兒科,廣東 惠州516211；3.惠州市第六人民醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科,廣東 惠州516200；4.廣東省河源市婦幼保健院 發(fā)育行為?？?廣東 河源517300)

自閉癥(ASD)為神經(jīng)行為發(fā)育障礙，臨床主要表現(xiàn)為社交障礙、興趣狹窄、刻板行為[1]，可能與早期腸道菌群失調(diào)、免疫狀態(tài)異常相關(guān)，自閉癥發(fā)生后，患兒可出現(xiàn)胃腸脹氣、腹瀉、便秘等腸胃功能紊亂[2]。研究顯示[3]，腸道菌群的改變可促進(jìn)自閉癥的發(fā)展，且自閉癥可導(dǎo)致患兒免疫系統(tǒng)失調(diào)，T淋巴細(xì)胞發(fā)生改變。Ki-67高表達(dá)于增殖細(xì)胞，在多種癌癥的診斷中具有重要意義[4]?；诖?，本文分析T細(xì)胞亞群中Ki-67的表達(dá)及與自閉癥兒童腸道菌群結(jié)構(gòu)、核心癥狀的關(guān)聯(lián)及價(jià)值研究。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2020年4月-2021年4月惠州市中心人民醫(yī)院收治的50例自閉癥兒童為研究對(duì)象，作為研究組，另外選取來院體檢的50例典型發(fā)育兒童作為對(duì)照組，兩組一般資料具有可比性(P>0.05)。本研究經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：患兒均符合《孤獨(dú)癥譜系障礙兒童早期識(shí)別篩查和早期干預(yù)專家共識(shí)》[5]中對(duì)于自閉癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：存在嚴(yán)重軀體障礙，神經(jīng)發(fā)育出現(xiàn)障礙，存在其他慢性、急性疾病，患兒存在腦損傷，患有感染性疾病。

1.2 方法

1.2.1Ki-67表達(dá)水平檢測 采集兩組兒童空腹靜脈血5 ml，以離心半徑15 cm，轉(zhuǎn)速3 000 r/min離心處理10 min，提取上層清液，于-80℃保存，待檢。使用抗CD3，抗CD4，抗CD8，抗CXCR4，抗CXCR7，抗CD45R，抗HLA-DR，抗Ki-67，抗GATA3，抗Helios和抗FOXP3抗體染色。固定細(xì)胞并通透，使用FC 500流式細(xì)胞儀Beckman Coulter使用CXP軟件采集和分析數(shù)據(jù)。使……