孔令環(huán),王雪野,邢明雨,呂作福,艾英莉,邵萬艷,魏灼如
(吉林省人民醫(yī)院,吉林 長春130021)
再生障礙性貧血(aplastic anemia,AA)是由于原因不明因素引起骨髓造血干細胞和(或)微環(huán)境損害,骨髓增生低下,外周血全血細胞減少的一組臨床綜合征,本質上是由免疫異常介導的造血功能障礙疾病。以往認為Th1細胞、Th2細胞介導的異常免疫應答是AA發(fā)病機制中的主要環(huán)節(jié),另有研究[1]表明Th17分泌的IL-17A在AA的免疫發(fā)病機制中占有重要地位。本研究通過IFN-γ、IL-2、IL-6、IL-10、IL-17A等細胞因子水平變化,判斷Th1、Th2、Th17平衡狀態(tài),了解機體免疫功能,進一步探討AA的發(fā)病機制,有助于臨床探索新的AA治療方案。
2020年1月至2022年9月吉林省人民醫(yī)院血液科收治再生障礙性貧血初治病人54例,其中重型(SAA)25例,非重型(NSAA)29例。SAA組,男11例,女14例,年齡27-87歲,中位年齡58歲;NSAA組,男9例,女20例,年齡18-84歲,中位年齡58歲。免疫抑制劑治療有效組(貧血出血癥狀明顯好轉,不輸血,1個月內血紅蛋白增長30 g/L以上)16例,其中男6例,女10例,年齡21-64歲,中位年齡50歲。按照張之南主編的《血液病診斷及療效標準》(第3版)[2],符合再生障礙性貧血的診斷標準。同時,選擇本院健康志愿者30例為對照組,男7例,女23例,年齡29-54歲,中位年齡44歲,均知情同意。
采用流式細胞術檢測細胞因子。受試者清晨空腹靜脈采血2 ml,EDTA抗凝,離心,血漿凍存在-80℃冰箱。試劑選購BDTMCytometric Bead Array(CBA) Human Th1/Th2/Th17 CBA Kit;儀器為BD FACSCanto II流式細胞儀。同時常規(guī)進行血常規(guī)及T淋巴細胞亞群檢測并記錄結果。
1.3.1制備人Th1/Th2/Th17細胞因子標準品人Th1/Th2/Th17細胞因子標準品是凍干粉,因此實驗前需要重懸并進行梯度稀釋。……