于淼,王敬開,林愷鋮,劉風翔,唐玉國,宋一之
1. 中國科學技術大學生物醫學工程學院(蘇州)生命科學與醫學部,江蘇 蘇州 215163; 2. 中國科學院蘇州生物醫學工程技術研究所,江蘇 蘇州 215163
目前,隨著抗生素的廣泛和大量使用,耐藥菌不斷出現,人類面臨著可選擇的抗生素種類越來越少而治療成本和難度日益增加的困局。因此,快速準確的病原體檢測和診斷至關重要,既能降低耐藥菌感染的死亡率,也能有效抑制耐藥菌的傳播。
常規的臨床病原微生物實驗室檢測主要通過生物化學反應或飛行時間質譜對分離純化后的純培養病原菌進行鑒定,采用抗菌藥物敏感性試驗(antimicrobial susceptibility test,AST)在鑒定的基礎上觀察藥物作用后病原菌的生長變化[1]。但培養、純化和飛行時間質譜鑒定通常需2 d以上,AST通常需1~3 d, “ 從樣本到報告” 往往需3~7 d,極大地降低了檢測效率[2]。同時,還存在無法區分生物化學反應相似的病原菌、數據庫中的已知病原菌種類有限以及難培養微生物難以鑒定等局限,為克服以上問題,近年來多種免培養的微生物快速檢測技術得到了發展。
目前,免培養的微生物檢測方法主要為分子遺傳學鑒定法,如聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)、基因測序、核酸質譜法、生物芯片等,主要針對核酸等遺傳物質。雖然這些方法各有優勢,但存在易受外界條件干擾、檢測步驟復雜等弊端,操作過程中還需操作技能嫻熟、工作經驗豐富且理論知識扎實的操作人員以及昂貴且精密的儀器[3]。以PCR為……