2018—2020年平頂山地區非結核分枝桿菌菌種鑒定及耐藥性分析

韋旭

平頂山市傳染病醫院，河南 平頂山 467000

非結核分枝桿菌(nontuberculousmycobacteria，NTM)是指除麻風分枝桿菌、結核分枝桿菌復合群以外的分枝桿菌，為一種條件致病菌。其種類繁多，目前已發現約190種，大多對人體沒有危害[1-2]。NTM感染后可侵犯皮膚、肺、淋巴結組織，臨床上最常見的是NTM肺病。目前，NTM感染居高不下，且對許多常用抗生素耐藥，已成為臨床研究熱點[3]。不同地區之間NTM的菌種分布及發病率差異較大，分離率差異也較大，我國東南沿海地區分離率較高，而北方內陸地區分離率較低[4]。鑒于NTM不同菌種對不同抗結核藥物的敏感性不同，臨床上須通過菌種鑒定及藥敏試驗結果合理選擇藥物[5]。本研究采用DNA微陣列芯片對河南省平頂山地區的NTM菌種進行鑒定，并通過藥敏試驗分析其耐藥性，以期為治療NTM感染相關疾病提供參考數據。

1 材料與方法

1.1 樣本來源

選擇2018年1月—2020年12月河南省平頂山市傳染病醫院收集的分枝桿菌陽性標本3 801份，其中檢出326株NTM，分離自不同患者的標本(包括痰、尿液、支氣管肺泡灌洗液等)，其中女性125例，男性201例。同一患者重復送檢樣本不重復計算，將首次樣本送檢結果納入分析。

1.2 儀器與試劑

DNA微陣列芯片和LuxScan 10K微陣列芯片掃描儀購自北京博奧生物集團有限公司，K960 PCR儀購自力新儀器(上海)有限公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 NTM菌種鑒定采用DNA微陣列芯片鑒定NTM菌種。在核酸提取管中添加80 μL核酸提取液，吸取10 μL菌懸液(≥1麥氏單位濁度)至核酸提取管，振蕩15 min，95 ℃加熱15 min，12 000 g離心1 min，將提取的核酸于-20 ℃保存。取出聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction，PCR)試劑并融化，加至200 μL EP管，再加入2 μL DNA模板，同時設置陽性對照和陰性對照。……