野生羊肚菌資源收集與菌株篩選技術研究*

郝 哲，張彥飛，高升成，梁海燕，李惠霞，李 紅，思瑞琳

（1.榆林市農墾服務中心，陜西 榆林 719000；2.榆林市馬合農場，陜西 榆林 719000；3.榆林市農產品質量安全中心，陜西 榆林 719000；4.榆林學院，陜西 榆林 719000）

羊肚菌位居世界四大野生名菌之首，是目前價格最為昂貴的野生食用菌之一，兼具食用和重要的藥用價值[1]。羊肚菌（Morchellaspp.）屬子囊菌亞門（Ascomycota）盤菌綱（Discomycetes）盤菌目（Pezizales）羊肚菌科（Morchellaceae）羊肚菌屬（Morchella），其因菌蓋呈羊肚狀而得名，俗稱羊肚子、包谷菌、陽雀菌、羊肚菌蛾子、麻子菌或蜂窩蛾子[2-3]。羊肚菌富含蛋白質、核酸、多糖、多種微量元素以及維生素等，其蛋白質含量與牛奶、蛋類相當；內含的19種氨基酸包括8種人體必需氨基酸和α-氨基異丁酸、L-3-氨基L-脯氨酸、2，4-二氨異丁酸等幾種稀有氨基酸；具有抗疲勞、增強免疫功能、抗衰老、降血脂、誘變、抗腫瘤、抗炎、抗菌、免疫調節等功效，引起了眾多國內外科研工作者的研究興趣[4-8]。

鑒于羊肚菌兼具食用價值和重要的藥用價值[1]，具有極好的經濟效益，因此對不同地方的野生羊肚菌資源進行收集鑒定、菌種分離純化、培養基篩選、大田試種與推廣試驗研究，以期明確羊肚菌栽培資源類型，篩選最佳的純化分離方法及合適的培養基，探索適合當地及其他部分省市推廣的優質菌株。通過典型示范與全面推廣栽培，為羊肚菌人工栽培提供經驗與方法，為地區鄉村振興引入發展潛力較大的產業。

1 材料與方法

1.1 菌株收集與鑒定試驗

通過查閱資料及多方咨詢，確定全國羊肚菌采集地點。多年來累計從陜北地區、四川省、云南省、東北地區等地采集到野生羊肚菌菌株共26株，并進行了形態特征描述和種類的鑒定。

將采集的野生羊肚菌菌株制作為斜面菌種，送至中國科學院微生物研究所進行測序。所得序列在GenBank核酸序列數據庫中進行同源序列比較與BLASTN搜索，用Clustal X 1.83軟件進行序列比對，用Mega 7.0軟件進行系統學分析，構建系統發育樹。

1.2 羊肚菌菌種分離試驗

1.2.1 組織分離試驗設計

試驗設K0、K1、K2共3個處理，分離部位分別為菌蓋和菌柄連接處、菌柄及菌蓋，每個處理20個重復。

將野生羊肚菌放入超凈工作臺，用75%酒精進行表面消毒，再用紫外線消毒30 min。從菌蓋和菌柄連接處、菌柄及菌蓋3個部位分別切取一小塊組織，接種于PDA試管培養基中并做好標記，于20℃恒溫培養箱培養。定期觀察并記錄菌絲萌發時間、長勢、成活率、污染率等情況，并對分離成功的菌絲體進行交配型基因檢測。

1.2.2 孢子分離試驗設計

試驗設L0、L1共2個處理，分別為單孢分離接種和多孢分離接種，每個處理20個重復。

采集成熟的野生羊肚菌，收集子囊孢子，在超凈工作臺按照無菌操作規程，以單孢分離和多孢分離2種方式，分別接種于PDA試管培養基中并做好標記，置于20℃恒溫培養箱培養。定期觀察并記錄菌絲萌發時間、長勢、成活率、污染率等情況，并對分離成功的菌絲體進行交配型基因檢測。

1.3 母種培養基篩選試驗

1.3.1 供試菌株與培養基配方

使用編號為NK-02的野生羊肚菌菌株，采集于四川綿陽。

母種培養基設計M1~M5共5個不同配方。

M1：葡萄糖20 g、瓊脂20 g、馬鈴薯200 g（去皮煮汁），水1 000 mL

M2：葡萄糖20 g、瓊脂20 g、馬鈴薯200 g（去皮煮汁）、麥麩50 g、硫酸鎂0.5 g、磷酸二氫鉀1.0 g，水1 000 mL。

M3：葡萄糖20 g、瓊脂20 g、馬鈴薯200 g（去皮煮汁）、硫酸鎂0.5 g、磷酸二氫鉀1 g，水1 000 mL。

M4：葡萄糖20 g、瓊脂20 g、黃豆芽500 g（煮汁）、硫酸鎂1 g、磷酸二氫鉀1 g，水1 000 mL。

M5：葡萄糖20 g、瓊脂20 g、豆餅200 g（煮汁）、玉米粉10 g、硫酸鎂0.5 g、磷酸二氫鉀1 g，水1 000 mL。

1.3.2 試驗處理設計

設計單因素試驗，共設5個處理（N0、N1、N2、N3、N4，其中N0為對照），配方分別為M1、M2、M3、M4、M5；每個處理設10個重復。將分離純化的羊肚菌，在無菌條件下接種于母種試管培養基中，做好標記后放入20℃恒溫培養箱培養。定期觀察菌絲生長狀況，記錄菌絲密度、顏色、長勢、整齊度及長滿試管的時間。菌絲長滿試管后在顯微鏡下觀察其形態和顏色并記錄。

1.4 羊肚菌優良菌株選育試驗

分別對羊肚菌母種進行初選和復選，觀察測定菌絲萌發和菌霜形成時間、子實體形態特征、出菇時間和產量，并進行詳細記錄，篩選出其中產量高、品質好的優良菌株。

1.4.1 試驗地點及條件

初選、復選及生產示范試驗地均位于榆林市馬合鎮（109°25′E，38°30′N），陜北地區毛烏素沙漠南緣。該地地勢平坦；氣候屬溫帶大陸性半干旱季風氣候，四季分明；近5年年平均氣溫為8.8℃，極端低溫平均為-19℃，極端高溫平均為35℃；年平均無霜期為152 d；多年平均降雨量為453 mm，降雨少而不均，大部分降雨集中在6月~9月；土壤為沙質土，通氣性好，保肥保水性相對較差[9]。

初選、復選及生產示范試驗在鋼架棉被拱棚內進行。10月上旬進行羊肚菌栽培，次年5月上旬采集。1.4.2 初選試驗

2016年~2017年，將經分離得到的26個羊肚菌母種制備成原種和栽培種，在榆林市馬合農場南沙分場食用菌菌種篩選基地進行栽培出菇試驗。每個菌株為1個處理，每個處理小區面積為222 m2，各3次重復。

1.4.3 復選試驗

2017年~2018年，將初選得到的菌株于同一個試驗基地進行復選。每個菌株為1個處理，每處理小區面積為667 m2，各3次重復。

1.5 生產示范

2018年~2019年，將復選得到的菌株在榆林市馬合農場新墩分場食用菌園區進行大面積生產示范。每個菌株的栽培面積為20.001 hm2。

1.6 示范推廣

2019年~2020年，經生產示范驗證的優良菌株在榆林市馬合農場食用菌園區、山西省呂梁市、云南省香格里拉市、內蒙古自治區呼和浩特市進行大面積栽培示范與推廣。

2 結果與分析

2.1 菌株鑒定分析

真菌核糖體基因及間隔區進化程度不同，有的序列比較保守，有的序列進化較快，因此可以根據保守序列對真菌進行鑒定。將收集到的26個野生羊肚菌菌株送至中國科學院微生物研究所進行菌種鑒定，以編號為NK-23的野生羊肚菌菌株為例進行分析。對菌株NK-23的測序序列構建系統發育樹，結果見圖1。

圖1 基于內轉錄間隔區區域序列分析的系統發育樹Fig.1 Phylogenetic tree based on sequence analysis of internal transcribed spacer regions

由圖1可知，菌株NK-23與Morchella importunastrain SCYDJ1-A1（GenBank登錄號：OL898492.1）的序列同源性為99%。分析表明，菌株NK-23與Morchella importuna以99%支持率聚為一群，即菌株NK-23為梯棱羊肚菌（Morchella importunaM.Kuo,O’Donnell&T.J.Volk）。

其他25個菌株與菌株NK-23的分析鑒定方法相同，匯總所有菌株鑒定結果及相關信息，詳見表1。

由表1可知，各地采集到的野生羊肚菌種類和數量不盡相同。

表1 羊肚菌菌株信息匯總Tab.1 Information summary of Morchella spp.strairs

采集自四川綿陽的菌株包括Mel-21、七妹羊肚菌（Morchella septimelata）、Mel-13、六妹羊肚菌(Morchella sextelata）、梯棱羊肚菌，其中以七妹羊肚菌為主，共2株。

采集自云南老君山的菌株包括六妹羊肚菌、七妹羊肚菌、Mel-13，以七妹羊肚菌和Mel-13居多，各2株；采集自云南維西的菌株包括六妹羊肚菌、梯棱羊肚菌、Mel-21；采集自云南劍川的菌株包括梯棱羊肚菌3株、Mel-21羊肚菌1株。綜合分析自云南省采集到的12株羊肚菌，梯棱羊肚菌、六妹羊肚菌、Mel-13和Mel-21的菌株數分別占菌株總數的1/3、1/4、1/6和1/6，七妹羊肚菌僅有1株。采集自吉林長白山的菌株包括梯棱羊肚菌2株、六妹羊肚菌1株、七妹羊肚菌1株。

甘肅諾爾蓋有梯棱羊肚菌1株。榆林岔河則、小紀汗、黨岔采集到的菌株均為海綿羊肚菌（Morchella spongiola）。不同地方的26個羊肚菌菌株共有梯棱羊肚菌8株、六妹羊肚菌5株、七妹羊肚菌4株、Mel-21羊肚菌3株、Mel-13羊肚菌3株、海綿羊肚菌3株。除了NK-24、NK-25、NK-26菌株呈現菌蓋黃色、邊緣不規則、頂部近半球形的形態特征外，其他菌株均呈現菌蓋黑褐色、邊緣不規則、頂部近圓錐形的形態特征。

2.2 羊肚菌菌種分離結果分析

以羊肚菌不同部位進行組織分離，其菌絲萌發時間、菌絲長勢、污染率、菌核、基因類型情況見表2。

表2 以羊肚菌不同部位進行組織分離的試驗數據Tab.2 Data of different tissue isolation sites of Morchella spp.

由表2可知，以羊肚菌不同部位進行組織分離，菌絲萌發的時間相同。以菌柄分離的菌絲長勢、污染率與以菌蓋和菌柄連接處分離的相同，該分離方式污染率低，但菌核分散、菌絲長勢相對較弱，交配型基因為MAT1-1-1或MAT1-2-1。以菌蓋分離的菌絲長勢最佳，菌核密集，同時存在MAT1-1-1和MAT1-2-1交配型基因，但污染率高達65%。綜合而言，以菌蓋分離效果最佳，雖然其分離污染率較高，但形成的菌核密集，且同時存在MAT1-1-1和MAT1-2-1兩種交配型基因，以菌蓋進行組織分離是羊肚菌菌種分離的有效方法。

羊肚菌不同孢子分離方式下菌絲萌發時間、菌絲長勢、污染率、純化成功菌株數、菌核、基因類型情況見表3。

表3 羊肚菌不同孢子分離方法的試驗數據Tab.3 Data of different spore isolation methods of Morchella spp.

由表3可知，孢子分離方式對菌絲萌發、菌絲長勢和菌核無影響；但在污染率及純化成功菌株數方面，多孢分離方式污染率低，更易成功，且同時存在MAT1-1-1和MAT1-2-1兩種交配型基因。

2.3 母種培養基篩選結果分析

5種母種培養基篩選結果見表4。

表4 不同母種培養栽培羊肚菌基的試驗數據Tab.4 Data of different stock culture media for Morchella spp.cultivation

由表4可知，5種處理的培養基對菌絲長滿時間、菌絲顏色和菌絲整齊度無影響。N2~N4處理的培養基對菌絲密度和菌絲長勢的影響與N0相同，N1處理培養基菌絲健壯濃密、長勢強、整齊，是生產羊肚菌母種的最佳培養基。

2.4 羊肚菌優良菌株選育結果分析

2.4.1 羊肚菌菌株初選試驗結果

對26個羊肚菌菌株進行初選，結果見表5。

由表5可知，不同菌株的菌絲萌發時間不同，其中菌株NK-18的菌絲萌發時間最短，為1.5 d；另有7株菌絲萌發時間為2 d；菌株NK-08的菌絲萌發時間最長，為6 d；其余菌株的菌絲萌發時間以4 d、3 d居多，分別有9株和5株。菌霜出現時間最短為6 d，最長為16 d，分別有2株和1株；其余菌株的菌霜出現時間以8 d和7 d為主，分別為9株和6株。26個不同菌株的頂部主要有廣圓錐形和圓錐形，偶爾出現卵圓形，其中以“圓錐形，偶爾卵圓形”和“廣圓錐形或圓錐形”2類為主。對產量進行分析，菌株NK-02最優，為210 kg·667-1m-2；除了未出菇的菌株NK-24、NK-25和NK-26以外，菌株NK-16產量最低，僅為16 kg·667-1m-2。產量低于150 kg·667-1m-2的菌株多數出現了病原菌污染、病蟲害嚴重或子實體稀疏等問題；產量高于150 kg·667-1m-2的菌株子實體相對密集，無嚴重病原菌污染或嚴重病蟲害問題發生。以產量作為主要因素，綜合菌絲萌發、菌霜出現時間、菇形特征，初選出菌株NK-02、NK-03、NK-05、NK-08、NK-09、NK-10、NK-15、NK-17、NK-18、NK-20、NK-21和NK-23進行復選。

表5 羊肚菌菌株初選試驗數據Tab.5 Preliminary selection data of Morchella spp.strains

2.4.2 羊肚菌菌株復選試驗結果

對初選得到的12個羊肚菌菌株進行復選，結果見表6。

表6 羊肚菌菌株復選試驗數據Tab.6 Re-selection data of Morchella spp.strains

由表6可知，在擴大規模的復選試驗中，部分初選結果表現優良的菌株出現了產量降低、菇體畸形或病蟲害嚴重等問題；其中菌株NK-10產量降低最為嚴重，每667平方米產量僅有67 kg。對比復選結果，選擇菌株NK-02、NK-03、NK-09、NK-17、NK-20和NK-23開展進一步生產示范試驗。復選得到的6個菌株每667平方米的產量均大于150 kg，且栽培期間無病蟲害，菇形、菌柄長短及出菇周期正常。

2.4.3 羊肚菌生產示范試驗結果

將復選得到的6個羊肚菌菌株進行大面積生產示范試驗，結果見表7。

表7 羊肚菌生產示范試驗數據Tab.7 Data of production demonstration of Morchella spp.

由表7可知，6個復選試驗中表現優良的菌株在大面積示范過程中沒有出現嚴重的病蟲害或菇體畸形的問題；各菌株菌絲萌發時間、菌霜出現時間、菇形相對穩定；產量與復選產量相近或明顯增產，其中菌株NK-02、NK-09分別增產28.8%、24.2%。

2.4.4 羊肚菌生產示范推廣試驗結果

6個在生產示范中性狀穩定的羊肚菌菌株在不同地方進行大面積推廣栽培試驗，結果見表8。

表8 羊肚菌生產示范推廣試驗數據Tab.8 Data of demonstration extension ofMorchella spp.production in places

由表8可知，將6個優選羊肚菌菌株在陜西省榆林市、山西省呂梁市、云南省香格里拉市、內蒙古自治區呼和浩特市多個地區進行栽培，采收的子實體菇形好，菌蓋均呈圓錐形，菌柄均較短。平均產量最高的菌株為NK-02，在榆林市栽培時其平均產量最高達292 kg·667-1m-2。呂梁市栽培的菌株NK-20和香格里拉市栽培的菌株NK-09的平均產量最低，均為189 kg·667-1m-2，但高于6個菌株在生產示范試驗（186 kg·667-1m-2）和復選試驗（165 kg·667-1m-2）中的最低產量。同一羊肚菌菌株在不同地區進行栽培，其產量也有所不同。以在榆林市栽培可達最高產量的菌株NK-02為例，在呂梁市栽培其產量為231 kg·667-1m-2，而在香格里拉市、呼和浩特市的產量則居于兩者之間。在同一地區栽培不同的羊肚菌菌株，其產量也有所不同。以榆林市為例，產量最高的菌株為NK-02，產量最低的菌株為NK-03，其余4個菌株平均產量為224 kg·667-1m-2。綜合分析可知，菌株NK-02在榆林市栽培的產量高出該菌株在全國栽培的最低產量（231 kg·667-1m-2）約26%，高出該菌株在全國不同地方產量的平均值（259 kg·667-1m-2）約13%，高出6個菌株在全國的產量平均值（230 kg·667-1m-2）約27%，高出6個菌株中產量最低的菌株NK-20、NK-09產量（189 kg·667-1m-2）約54%。2.4.5 優選羊肚菌菌株產量綜合分析

對6個優選羊肚菌菌株在復選試驗、生產示范、生產示范推廣中的產量進行綜合分析，結果見表9。

表9 羊肚菌菌株在復選、生產示范與示范推廣試驗中的產量比較Tab.9 Comparision of Morchella spp.yield in the test of reselection,production demonstration and demonstration extension

由表9可知，6個菌株在示范推廣試驗中的產量較復選試驗時的產量均有增加，平均增加21.6%；增加最多為菌株NK-03（32.6%），最少為菌株NK-20（9.1%）。6個菌株在示范推廣中的平均產量較生產示范試驗中的平均產量平均增加11.7%；最多為菌株NK-03，增加33.3%，而菌株NK-02較生產示范產量呈現持平狀態。

3 討論

3.1 菌株收集與鑒定

采集的26個羊肚菌菌株中，除菌株NK-24、NK-25、NK-26呈現菌蓋黃色、邊緣不規則、頂部近半球形的形態特征外，其他菌株均呈現菌蓋黑褐色、邊緣不規則、頂部近圓錐形的形態特征，表明不同地方羊肚菌菌蓋顏色及形態較為相似。經鑒定發現，各地野生羊肚菌主要以梯棱羊肚菌、六妹羊肚菌和七妹羊肚菌為主，表明這3個羊肚菌品種具有較好的適應性，可為其人工馴化栽培提供依據。董彩虹[10]和Liu[11]的研究也發現，全國大部分省份主要栽培品種為梯棱羊肚菌、六妹羊肚菌及少量七妹羊肚菌，與此次調查的野生羊肚菌主要品種的結果一致。羊肚菌的人工馴化必須依據野生菌株的適應性，通過此次種質資源的收集和鑒定，為全國各地羊肚菌的進一步研究與栽培提供了相對可靠的理論依據。

3.2 羊肚菌菌種分離與純化

羊肚菌菌絲可通過組織分離或孢子分離的方式獲得。比較從菌蓋和菌柄連接處、菌柄、菌蓋3個部位進行組織分離的結果，以菌蓋分離獲得的菌絲最佳，表現為菌核密集，菌絲長勢較好。這與石建森[12]的研究中，菌絲長勢、密度、均勻度均表現為菌蓋和菌柄結合部位最好，菌柄次之，菌蓋部位最差的結論有所不同，可能的原因是其所研究的對象為野生尖頂羊肚菌（Morchella conica），菌絲生長情況與品種有關。

大型真菌子實體的形成與發育，除了受溫度、濕度、光照和空氣等環境條件以及相應營養條件影響外，還受其特有的遺傳因子控制；交配型基因（MAT）是調控真菌有性發育的關鍵因素[13]；缺失交配型基因易對菌絲及子實體生長產生不利影響[14]。結果發現，菌蓋和菌柄連接處以及菌蓋部分同時含有MAT1-1-1和MAT1-2-1兩種交配型基因，而菌柄中僅含有其中一種基因。不同的交配型基因及分離部位交互作用，可能導致菌絲及子實體生長羊肚菌表現出不同的菌絲長勢、污染率、菌核密集程度等特征。

黎智文[15]開展了羊肚菌子實體干品組織分離與多孢分離的對比研究，得出孢子萌發率較組織萌發率高的結論，但未開展單孢分離和多孢分離的對比研究。此次研究中，單孢分離和多孢分離的試驗結果表明，多孢分離方式所獲得的菌株污染率低，且同時存在MAT1-1-1和MAT1-2-1兩種交配型基因，利于后續研究的開展。

綜合而言，羊肚菌組織分離的部位及孢子分離方式的不同均會對菌絲長勢、污染率、菌核密集程度及基因類型產生一定影響。經對比，孢子分離方式較組織分離方式在菌絲長勢、污染率、純化成功菌株數、菌核狀態方面有明顯的優勢，特別是多孢分離。因此，多孢分離方式是羊肚菌菌種分離的最佳方法。

3.3 母種培養基篩選

劉奇正[16]研究發現外源營養模塊ENM(exogenous nutrition module）的碳氮比對主培養基中羊肚菌利用外源營養有較為顯著的影響。趙航軻[17]研究了碳源和氮源類型對羊肚菌母種培養基的影響，發現存在最佳的碳源和氮源，分別為可溶性淀粉和蛋白胨。結果表明，不同母種培養基對羊肚菌菌絲生長及形態特征有一定的影響，但不明顯，原因可能為各種培養基均能為菌絲生長提供合適的、足量的營養，碳氮比相對合適，碳源、氮源類型相差較小。王靜之[18]研究了不同碳源對羊肚菌母種菌絲生長的影響，結果顯示含有淀粉的培養基菌絲生長速度最快。此次試驗中，M2培養基為唯一含有麥麩的培養基，而麥麩富含淀粉，因此M2培養基中菌絲長勢佳可能與麥麩中含碳量高從而調配了培養基的碳氮比有關。

3.4 羊肚菌優良菌株選育

對來自全國不同地方的26株羊肚菌進行了初選、復選、生產示范、示范推廣研究。在初選試驗中，不同菌株表現出不同的菌絲萌發時間、菌霜出現時間、菇形特征、產量，其中有12個菌株（NK-02、NK-03、NK-05、NK-08、NK-09、NK-10、NK-15、NK-17、NK-18、NK-20、NK-21、NK-23）綜合表現優良，產量均高于150 kg·667-1m-2。不同菌株的產量等性狀的差異可能除了與其內在基因型有關外，也可能與陜北特定的風沙環境條件有關。

對初選所得的12個羊肚菌菌株開展復選試驗的結果表明，部分初選結果表現優良的菌株出現了產量降低、菇體畸形或病蟲害嚴重等問題，可能在于復選擴大栽培面積容易引發病蟲害或相關條件限制導致部分菌株性狀下降。復選得到了6個優良菌株（NK-02、NK-03、NK-09、NK-17、NK-20和NK-23），其出菇穩定，子實體形態特征穩定，畸形菇少，病害輕，產量高；原因可能是其抗病蟲害能力較強、適應能力好。

生產示范試驗中，6個復選得到的菌株均未出現菇體畸形或嚴重病蟲害的問題，各菌株菌絲萌發時間、菌霜出現時間、菇形特征相對穩定，產量與復選產量持平，甚至出現明顯的增產現象，進一步驗證了復選結果的分析。部分菌株較復選結果增產的原因可能為新的試驗地具有更合適的營養條件與環境條件。

在榆林市馬合農場食用菌園區及山西省、云南省、內蒙古自治區等地對6個生產示范中表現優良的菌株進行大面積推廣的研究表明，菌株NK-02、NK-03、NK-09、NK-17、NK-20和NK-23性狀穩定、抗病性強、有較強的適生性、平均產量高，均超過200 kg·667-1m-2；其中在榆林地區栽培的菌株NK-2平均產量最高，達到了292.5 kg·667-1m-2，是適合該地區栽培的最優品種。

4 結論

綜合菌種收集與鑒定、羊肚菌菌種分離與純化、母種培養基篩選及羊肚菌優良菌株選育的結果可知，全國野生羊肚菌品種主要以梯棱羊肚菌、六妹羊肚菌和七妹羊肚菌為主，其具有較好的適應性和馴化價值。不同部位的組織分離和不同的孢子分離對菌絲生長發育及產量影響不同，最優的分離方式為多孢子分離。

5種母種培養基對菌絲密度、長勢、整齊度及顏色有影響，但不明顯，其中以M2培養基所得菌絲最為濃密，為合適的母種培養基。不同類型的26個菌株具有不同的生物性狀，其中初選產量大于150 kg·667-1m-2且表現優良的菌株為NK-02、NK-03、NK-05、NK-08、NK-09、NK-10、NK-15、NK-17、NK-18、NK-20、NK-21和NK-23。在復選研究中，部分菌株出現了產量降低、菇體畸形或病蟲害嚴重的問題，最終菌株NK-02、NK-03、NK-09、NK-17、NK-20和NK-23因具有出菇穩定、形態特征穩定、畸形菇少、病害輕、產量高的特征，成為了生產示范的研究對象。

生產示范研究中，上述6個菌株均表現出性能穩定，抗性較強、產量高的特點，甚至部分菌株出現了增產。在全國不同地方大面積推廣栽培表明，6個菌株性能穩定、產量高、抗性強、適應能力好，在示范的區域內均適合進一步的推廣栽培。同一菌株在不同的栽培區域表現出不同的產量特點，不同菌株在同一栽培區域表現出不同的產量特點，應結合栽培區域選擇最優的菌株。適合在榆林地區栽培的最優菌株為NK-02，即來自四川綿陽的七妹羊肚菌，最高產量達292.5 kg·667-1m-2，居于26個菌株在不同地方的產量之首。