HPV E6/E7、SCC、CA19-9水平變化與HSIL關(guān)系

謝田鳳 楊進(jìn)瓊 徐梅燕

廣東省高州市人民醫(yī)院婦科二區(qū) 525200

宮頸癌(Cervical cancer，CC)居女性惡性腫瘤第2位，研究報道，我國每年死于CC的人數(shù)將近5萬，嚴(yán)重威脅女性健康[1]。CC病程發(fā)展具有明顯階段性特征，是宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變(SIL)持續(xù)進(jìn)展的結(jié)果，即宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)，分為CINⅠ、CINⅡ、CIN Ⅲ，CIN I歸為鱗狀上皮內(nèi)低度病變(LSIL)，CINⅡ、CIN Ⅲ歸為高級別鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL)[2]。目前，在癌前病變階段早發(fā)現(xiàn)早干預(yù)，是降低CC發(fā)病率和死亡率最有效的手段。大量研究證實，高危型人乳頭瘤病毒(HPV)持續(xù)感染是CC及癌前病變的主要致病因素，而E6、E7是HPV導(dǎo)致癌變過程中最重要的2個癌基因[3-4]。腫瘤標(biāo)志物檢測是早期發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤的重要手段，鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCC)、糖類抗原19-9(CA19-9)是最常用和重要的CC腫瘤標(biāo)志物[5]。基于此，本文探討HPV E6/E7、SCC、CA19-9水平變化與HSIL的關(guān)系及對防范CC的指導(dǎo)意義，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年8月—2021年7月我院CIN患者164例，其中鱗狀上皮內(nèi)低度病變(LSIL)患者81例作為LSIL組，HSIL患者83例作為HSIL組，同期選取HPV感染但無宮頸病變患者43例作為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：LSIL組、HSIL組均經(jīng)組織學(xué)診斷明確；觀察對象均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：盆腔放射治療史；子宮全切除史；妊娠；檢查前3d有性生活或陰道沖洗、放藥治療等；嚴(yán)重肝、腎疾病史。本研究經(jīng)我院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法 (1)HPV E6/E7 mRNA：將宮頸取樣毛刷插入子宮頸管內(nèi)，同一時針方向轉(zhuǎn)動5周，取出刷毛，放入HPV E6/E7 mRNA專用保存液瓶中，保存送檢。采用轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)(TMA)檢測HPV E6/E7 mRNA，Panther自動檢測平臺，Aptima HPV試劑盒。陽性標(biāo)準(zhǔn)：分析物S/臨床閾值(cut-off，CO)≥0.5，且內(nèi)部指控<2 000 000RLU，分析物≤13 000 000RUL。(2)SCC、CA19-9：空腹抽取靜脈血5ml，離心(3 000r/min，5min，離心半徑5cm)，取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測SCC、CA19-9，以美國Bio-RAD公司Bio-RAD 550型酶標(biāo)儀與配套試劑盒。

1.3 觀察指標(biāo) (1)比較3組HPV E6/E7 mRNA陽性率、SCC、CA19-9水平。(2)HSIL的單因素分析。(3)HSIL的多因素分析。(4)HPV E6/E7 mRNA、SCC、CA19-9對HSIL的診斷價值。

2 結(jié)果

2.1 3組HPV E6/E7 mRNA陽性率、SCC、CA19-9水平比較 HSIL組HPV E6/E7 mRNA陽性率、SCC、CA19-9水平高于LSIL組、對照組，且LSIL組高于對照組(P<0.05)，即隨宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變進(jìn)展，HPV E6/E7 mRNA陽性率、SCC、CA19-9水平呈遞增趨勢(P<0.05)。見表1。

表1 3組HPV E6/E7 mRNA陽性率、SCC、CA19-9水平比較

2.2 HSIL的單因素分析 年齡、病變范圍、點狀血管、陰道鏡下醋白上皮與HSIL無關(guān)(P>0.05)；有癥狀(接觸性出血、外陰瘙癢、白帶增多等)、病灶多灶性、HPV E6/E7 mRNA陽性、SCC、CA19-9高表達(dá)均為HSIL的相關(guān)因素(P<0.05)。見表2。

表2 HSIL的單因素分析[n(%)]

2.3 HSIL的多因素分析 以宮頸上皮內(nèi)瘤變情況為因變量，將表2中差異有統(tǒng)計學(xué)意義的項作為自變量(賦值見表3)，應(yīng)用Logistic回歸模型分析，結(jié)果顯示，校正癥狀、病灶多灶性后，HPV E6/E7 mRNA陽性、SCC、CA19-9高表達(dá)均為HSIL獨立危險因素(P<0.05)。見表4。

表3 賦值

表4 HSIL的多因素分析

2.4 HPV E6/E7 mRNA、SCC、CA19-9對HSIL的診斷價值以HSIL患者HPV E6/E7 mRNA、SCC、CA19-9表達(dá)作為陽性樣本，以LSIL患者HPV E6/E7 mRNA、SCC、CA19-9表達(dá)作為陰性樣本，繪制各指標(biāo)診斷HSIL的ROC曲線，結(jié)果顯示，HPV E6/E7 mRNA、SCC、CA19-9診斷HSIL的AUC分別為0.812、0.732、0.715。見表5。

表5 HPV E6/E7 mRNA、SCC、CA19-9對HSIL的診斷價值

3 討論

宮頸病變存在病變消退、持續(xù)和進(jìn)展等情況，研究指出，LSIL(CINⅠ)自然消退率為60%，HSIL(CINⅡ、CINⅢ)的轉(zhuǎn)歸率分別為40%、20%～30%[6]。可見，HSIL轉(zhuǎn)歸明顯低于LSIL，其進(jìn)展為CC的風(fēng)險顯著增加。因此，早期準(zhǔn)確地檢測出HSIL，可及時阻斷罹患CC的風(fēng)險。

CC發(fā)病機制與HPV緊密相關(guān)。研究顯示，90%以上CC發(fā)生存在高危型HPV持續(xù)感染[7]。HPV持續(xù)感染，使HPV DNA與宿主宮頸基底膜細(xì)胞DNA整合，HR-HPV早期基因E2片段缺失，進(jìn)而引起E6/E7 mRNA表達(dá)，加快宮頸病變的進(jìn)展[8]。本文結(jié)果顯示，隨宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變進(jìn)展，HPV E6/E7 mRNA陽性率呈遞增趨勢(P<0.05)，與既往研究[9]一致。E6和E7是HPV最重要的2個癌基因，可干擾正常細(xì)胞周期，且E6/E7癌蛋白可滅活抑癌蛋白，增加宿主細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的可能性，同時，E6/E7癌蛋白誘導(dǎo)HPV免疫逃逸，干擾機體免疫反應(yīng)[10]。Logistic回歸分析顯示，HPV E6/E7 mRNA陽性為HSIL獨立危險因素。HPV在LSIL中主要侵犯基底層細(xì)胞，HPV基因常為非整合狀態(tài)，宿主基因組相對穩(wěn)定，HPV DNA低度復(fù)制，HPV E6/E7 mRNA處于低表達(dá)水平[11]。HPV在HSIL中主要侵犯基底層及中表層鱗狀細(xì)胞，病毒基因易與宿主發(fā)生整合，HPV DNA復(fù)制轉(zhuǎn)錄翻譯活躍，HPV E6/E7 mRNA持續(xù)表達(dá)[12]。

目前，腫瘤標(biāo)志物檢測已成為惡性腫瘤臨床診斷的重要方式。既往研究顯示，SCC、CA19-9均可作為腫瘤標(biāo)志物，用于診斷CC[13]。本文結(jié)果顯示，HSIL組血清SCC、CA19-9水平高于LSIL組、對照組，且LSIL組高于對照組(P<0.05)，表明隨宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變進(jìn)展，血清SCC、CA19-9表達(dá)逐漸升高，也提示SCC、CA19-9可預(yù)測CIN進(jìn)展為CC的風(fēng)險。分析原因，SCC為子宮鱗狀上皮細(xì)胞分離所形成鱗狀上皮細(xì)胞相關(guān)抗原TA-4亞單位，是靶基因表達(dá)異常的結(jié)果，其水平隨腫瘤浸潤性生長而逐漸升高；CA19-9為胚層細(xì)胞所分化形成的黏蛋白物質(zhì)，屬廣譜腫瘤標(biāo)志物，隨宮頸病變惡性進(jìn)展，其水平逐漸升高[14-15]。另ROC曲線顯示，HPV E6/E7 mRNA、SCC、CA19-9診斷HSIL的AUC分別為0.812、0.732、0.715，具有較高診斷價值。進(jìn)一步提示檢測HPV E6/E7 mRNA、SCC、CA19-9可作為區(qū)分宮頸潛在惡性病變的重要方法，對預(yù)防CC具有指導(dǎo)價值。

綜上可知，HSIL患者HPV E6/E7 mRNA、SCC、CA19-9異常高表達(dá)，可作為宮頸上皮內(nèi)病變篩查及分流的重要標(biāo)志物，指導(dǎo)CC預(yù)防，改善患者預(yù)后。