血清LncRNA TapSAKI對腎結石患者術后并發癥的預測價值

腎結石是指機體代謝異常、尿路病變或者藥物因素等所致的聚集于腎臟的晶體物質，主要臨床癥狀包括不同程度腰疼、排尿困難、血尿等，好發于男性

。腎結石嚴重時需外科手術治療，經皮腎鏡取石術是目前臨床治療腎結石的主要手段，具有結石清除率高，術后出血少，恢復快等優點

。但是，取石術后患者常出現不同程度感染、尿瘺、輸尿管損傷等并發癥，嚴重影響患者預后

。尋找有效手段提前預測術后并發癥發生情況，并制定針對性護理干預措施，對改善患者預后具有重要意義。LncRNA TapSAKI屬LncRNA家族成員，研究顯示

，其表達上調通過加速腎組織的凋亡而致膿毒癥，進而誘發急性腎損傷。我們推測，LncRNA TapSAKI可能參與了腎臟疾病的發生、發展，并與預后有關，但是目前鮮見相關報道，本研究通過測定其在腎結石患者中的表達水平，旨在探討其在腎結石取石術后并發癥發生過程中的作用。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2020年5月至2021年4月遼健集團鐵煤總醫院收治的行經皮腎鏡取石術的腎結石患者103例為研究對象，所有患者均行經皮腎鏡取石術，根據術后14 d內患者是否出現并發癥將其分為并發癥組和無并發癥組。并于同期隨機選取60例健康體檢者為對照組。各組研究對象性別、年齡、BMI、FPG等基線資料比較，差異無統計學意義(

＞0.05)，具有可比性，見表1。本研究獲得醫院倫理委員會的批準，所有患者及家屬均簽署手術知情同意書。

稱量100g鉬精礦，分別加入助溶劑9g Co-NC，8g復合氟化物，200mL 30%HCl，反應溫度 75℃，充分攪拌反應，分別考察 1、1.5、2、2.5、3、3.5h 反應時間對鐵和硅的含量影響，結果見表2。

1.2 選取標準 納入標準：患者符合《泌尿系統結石診治指南》

中關于腎結石診斷標準；符合經皮腎鏡取石術手術指征，且無手術禁忌證；所有患者均完成術后的定期隨訪，且隨訪資料齊全。排除標準：心功能障礙及肝功能不全的患者；腎積水、腎小管中毒、各類腎炎等腎臟疾病；患者曾接受過傳統開放或者腔鏡治療者；急、慢性炎癥反應性疾病以及自身免疫性疾病患者；甲狀腺功能亢進、痛風等可能影響本研究結果的疾病；納入研究前接受過抗凝藥物、類固醇類藥物治療者；精神疾病患者及惡性腫瘤患者；孕產婦及哺乳期女性患者。

1.3 方法

習近平綠色發展理論考慮發展問題時，具有十分寬泛的視野。不僅注意到局部細節，而且考慮了戰略大局；不僅正視現實問題，而且回溯過去，展望未來；不僅立足國內，而且綜合考慮國際形勢的變化發展。

1.3.2 血清炎癥因子水平檢測 抽取腎結石患者入院次日(術前)清晨空腹肘靜脈血5 mL，健康體檢者于入院當日清晨空腹抽取5 mL肘靜脈血，血液標本置于含EDTA的抗凝試管中室溫下靜置1 h，以3 000 r/min的轉速離心，離心半徑10 cm，離心持續時間10 min，留取血清并將其分裝到兩個試管中，在－80 ℃冰箱中保存，留待檢測。其中1管試管采用酶聯免疫吸附法檢測血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)、IL-1β，單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)水平，相關試劑盒購自于上海瑞番生物科技有限公司，檢測儀器為鉑金埃爾默企業管理(上海)有限公司提供的EnVision型多功能酶標儀，檢測過程嚴格按照試劑盒上相關說明進行。

1.4 隨訪 對所有患者術后均進行隨訪，隨訪方式為住院復查、出院后的電話和門診復查，隨訪時間至少14 d以上，隨訪終點為患者出現感染、出血、輸尿管損傷、尿瘺等并發癥。

一、準備好行裝。早些擬出一個單子，寫出要帶的東西，可以避免出發前臨時忙亂。如果到東南亞旅游，可別忘了，那里永遠都是夏天。您的夏季衣服一定別忘了帶。很多人在國內住過酒店，就以為國外的酒店也啥都有，不用準備，這就錯了。許多國家的酒店，別管多高檔次，牙具、拖鞋都不預備。如果忘記帶，小事也能讓你很尷尬。

1.3.3 血清LncRNA TapSAKI水平檢測 檢測另1試管中的血清LncRNA TapSAKI水平，檢測方法如下。①提取總RNA：在無菌環境下冰上凍融血清，采用TRIzol試劑(焦作路非凡生物科技有限公司，生產批號：JMS12279)提取血清中的總RNA，操作過程參考說明書進行，利用紫外分光光度計測定提取得到的總RNA濃度及純度，得到OD 260/280比值在1.9～2.1的RNA即純度最高，留存。②逆轉錄合成cDNA：根據QuantiTect Reverse Transcription逆轉錄試劑盒(天津泰澤興業生物科技有限公司，生產批號：205314)將RNA逆轉錄合成為cDNA。③檢測LncRNA TapSAKI水平：參考Perfectstart Taqman qPCR master mix試劑盒(上海瑤韻生物科技有限公司，生產批號：TQ2301-01)說明，以cDNA為模板進行擴增，GAPDH為內參，其中LncRNA TapSAKI上游引物序列為5’-GCCTGGTCAAAGTCCATCC3’，下游引物序列為5’-TAACATA GGTCTCGTCTCTGCTC-3’，GAPDH 上 游 引 物 序 列 為 5’-GTGGGGCGCCCCAGGCACCA-3’，下游引物序列為5’-CTCCTTAATGTCACGCACGATTTC-3’，上述引物序列均由上海生工合成。擴增后按照實時熒光定量PCR 法(qRT-PCR)構建20 μL反應體系：SYBRPremix Ex Tap Ⅱ共9 μL，cDNA共2 μL，正向引物0.8 μL，反向引物0.8 μL，并加入無酶蒸餾水7.4 μL。反應條件設置為95 ℃預變性60 s，循環1次，95 ℃變性，持續時間20 s，60 ℃退火，持續時間30 s，72 ℃延伸，持續時間20 s，上述程序循環36次。LncRNA TapSAKI 相 對 表 達 量 采 用2

表 示。

1.3.1 經皮腎鏡取石術 所有患者均行經皮腎鏡取石術治療，患者全麻后取截石位于手術臺上，經輸尿管插管后將膀胱鏡置入輸尿管導管中，并及時調整體位為仰臥位，將腰腹墊高后在手術消毒皮膚表面L

間隙做長度≤1 cm的微小切口，穿刺定位到腎盞中心，同時結合B超進一步定位穿刺位置并擴張筋膜，經皮建立手術通道后在膀胱鏡直視下確定結石位置及大小，大結石(直徑＞8 mm)先使用鈥激光將結石擊碎，再將其使用鉗夾夾出，小結石通過流水沖出或直接取出，最后查看有無殘留結石，必要時行留腎造瘺管。

2 結果

推薦理由:本書以陜西歷史博物館為切入點，以文物為載體，通過圖片、音頻、視頻等多種媒體形式深入淺出地介紹了陜西的歷史、文化和人物。書中拓展了眾多精彩美麗的歷史故事和課外文物知識，給讀者特別是青少年了解文物、了解陜西歷史文化提供一個窗口，向人們展示了三秦大地厚重而悠遠的歷史文化。

同治六年（公元1867年）4月，59歲的劉崐接替李瀚章任湖南巡撫。同治十年(1871年)，63歲的劉崐因巴揚阿的誣告而被朝廷撤職。經兩廣總督李瀚章查明系無中生有，朝廷諭令“前撫來京”。但劉崐宦海沉浮對做官一事早已心灰意冷,故“因病請假”，在湘就醫調理,寓居長沙,沉湎于酒以自放,世以“劉伶第二”稱之。

2.1 并發癥組并發癥發生情況 術后對所有患者進行隨訪，術后14 d內，共有28例患者出現不同程度并發癥，其中感染11例，出血12例，輸尿管損傷4例，尿瘺1例，術后并發癥發病率為27.18%(23/103)。

2.2 各組研究對象血清LncRNA TapSAK及炎癥因子水平比較 各組研究對象血清LncRNA TapSAK及炎癥因子水平比較，差異有統計學意義(

＝24.835、57.133、79.472、63.328、67.038，

＜0.05)，兩兩比較，并發癥組、無并發癥組血清LncRNA TapSAK及炎癥因子水平高于對照組，且并發癥組高于無并發癥組，差異有統計學意義(

＜0.05)，見表2。

2.3 血清LncRNA TapSAK與炎癥因子TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1的相關性 經Pearson積矩相關分析，腎結石患者血清LncRNA TapSAK與炎癥因 子TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1 均 呈 正 相 關 性(

＝0.537、0.622、0.596、0.608，

＜0.05)，見圖1。

2.4 血清LncRNA TapSAK對腎結石患者術后并發癥的預測價值 繪制ROC曲線評價血清LncRNA TapSAK對腎結石患者術后并發癥的預測價值，結果顯示，血清LncRNA TapSAK預測術后并發癥的AUC為0.835 (95%

：0.819，0.852，SEAUC＝0.029，

＜0.001)，約登指數0.69，臨界值為1.92，敏感度、特異度分別為0.87、0.82，見圖2。

3 討論

LncRNA位于細胞質或核內的長度超過200 nt的無蛋白質編碼功能的RNA轉錄本，通過多層次調控染色體轉錄及轉錄后蛋白質編碼基因的表達而介導細胞的分化、增殖、凋亡，以及器官形成，物質代謝等生理過程，異常表達與感染、免疫反應等密切相關

。LncRNA在腎臟病發病過程中的作用尚處在研究初期，研究顯示

，LncRNA TCF7通過激活miR-200c表達，可引發內質網應激反應而參與糖尿病腎病的發生、發展過程。Jiang等

發現，LncRNA HOTAIR表達上調與miR-34c相互作用共同促進腎組織凋亡，進而介導膿毒癥所致的急性腎損傷。Zhang等

證實，LncRNA CHCHD4P4在腎結石患者中表達上調，其主要機制與促進草酸鈣結晶沉積有關。基于上述研究，LncRNA功能的異常改變可能與腎臟疾病密切相關。

LncRNA TapSAKI位于人第22號染色體上，研究發現，其在缺氧損傷的腎小管上皮細胞以及內皮細胞中表達豐富，通過轉染TapSAKI siRNA后可抑制TapSAKI表達，進而促進腎小管上皮細胞的增殖并抑制其凋亡

。本研究結果顯示，腎結石患者血清LncRNA TapSAK水平高于健康體檢者，并且經皮腎鏡取石術后出現并發癥的患者血清LncRNA TapSAK水平高于無并發癥患者，提示該指標參與了腎結石發病過程，并與術后并發癥有一定關系。研究還發現腎結石患者TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1水平顯著升高，尤其是取石術后出現并發癥的患者。相關性分析結果顯示，腎結石患者血清LncRNA TapSAK與炎癥因子TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1均呈正相關性，上述結果提示，LncRNA TapSAK可能通過介導機體炎癥反應而參與調控腎結石發病過程，并進一步與術后并發癥有關。其機制可能是：尿液中LncRNA TapSAK表達上調導致草酸鈣晶體大量沉積，誘發炎癥反應，炎癥反應又協助晶體通過細胞外基質進入腎間質，加重腎間質炎癥反應而促使結石形成，兩者協同作用不斷加重腎結石病情

；與此同時，加重的炎癥反應導致血管腔狹窄，血壓升高，并進一步導致血管破裂出血，腎實質脆性增大，而手術過程中容易造成腎實質撕裂，最終引發感染、出血、輸尿管損傷等術后并發癥

。繪制ROC曲線表明血清LncRNA TapSAK能有效預測術后并發癥發生風險，AUC為0.835，敏感度、特異度分別為0.87、0.82，提示術前通過檢測血清LncRNA TapSAK水平，并以1.92為異常界值，有助于早期預測術后并發癥發生風險，從而指導臨床制定針對性干預措施，改善患者預后。

綜上所述，血清LncRNA TapSAK表達上調通過介導機體炎癥反應而參與腎結石患者經皮腎鏡取石術后并發癥的發生過程，早期檢測該指標有望輔助臨床早期預測術后并發癥，從而指導臨床治療。

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