云南中甸地區(qū)3個(gè)牛種PRNP基因23 bp和12 bp位點(diǎn)的InDel多態(tài)性與表達(dá)水平

和曉明，Sameeullah MEMON，劉興能，岳 丹，鄧衛(wèi)東，席冬梅*

(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南 昆明 650201；2.云南農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，云南 昆明 650031)

牛海綿狀腦病(Bovine spongiform encephalopathy, BSE)，也被稱為“瘋牛病”，是一種發(fā)生在牛上的傳染性海綿狀腦病(Transmissible spongiform encephalopathies, TSEs)，自英國暴發(fā)后傳遍了英國的牧場，并進(jìn)入食物鏈，嚴(yán)重威脅著人類健康。BSE是具有傳染性和遺傳性的致命神經(jīng)退行性疾病，由異常折疊的朊病毒(protease-resistant infectious protein, PrP)誘導(dǎo)宿主中正常和非感染性的朊蛋白(cellular prion protein, PrP)轉(zhuǎn)化為非正常和傳染性的致病性PrP朊病毒構(gòu)象。研究表明，敲除PrP的轉(zhuǎn)基因小鼠可以抵抗朊病毒，動物體內(nèi)PrP減少可以抵抗BSE。在正常生物體內(nèi)PrP是一種高度保守并廣泛表達(dá)的糖蛋白，介導(dǎo)細(xì)胞增殖、分化和惡性變異，干預(yù)多條與腫瘤形成有關(guān)的信號通路，若完全缺失PrP可能會帶來一些副作用。編碼PrP的基因是個(gè)高度保守的基因，不同物種間的PrPmRNA序列不相同，甚至同一物種的不同個(gè)體中PrP氨基酸序列也有差別，眾多研究認(rèn)為人和多種動物TSEs的發(fā)生與基因多態(tài)性有關(guān)。第1內(nèi)含子12 bp序列和啟動子區(qū)23 bp序列的插入/缺失(InDel)多態(tài)性影響著基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，12 bp InDel與轉(zhuǎn)錄子SP1相關(guān)，23 bp InDel與轉(zhuǎn)錄因子阻遏蛋白58(RP58)相關(guān)，這兩位點(diǎn)的插入/缺失多態(tài)與BSE的抗性(或易感性)顯著相關(guān)。報(bào)告基因分析顯示兩個(gè)假定的轉(zhuǎn)錄因子之間的相互作用，等位基因23 bp插入(insertion，ins(+))/12 bp缺失(deletion，del(-))的表達(dá)水平低于23 bp del/12 bp del，12 bp del導(dǎo)致表達(dá)水平顯著降低，有這些缺失的牛，因缺乏其各自調(diào)控元件的結(jié)合位點(diǎn)，更容易感染經(jīng)典的BSE。本研究通過比較云南中甸3種地方品種牛基因12 bp和23 bp位點(diǎn)的InDel多態(tài)性，以及對延髓組織中基因mRNA的表達(dá)量測定，進(jìn)一步對中甸地區(qū)牛BSE的易感性進(jìn)行分析，為牛的抗病育種提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。……