受精液中精子密度及添加單寧酸對豬胚胎體外生產(chǎn)效率的影響

林 娟，紀竺青，曾申明

（中國農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院，北京 100193）

豬胚胎體外生產(chǎn)技術(shù)可有效利用優(yōu)秀青年母豬及小母豬卵巢中大量的卵泡資源獲得早期胚胎，通過胚胎移植獲得大量優(yōu)秀后代，從而加速良種擴繁和新品種培育進程。然而，與牛、羊相比，豬體外受精（In vitro Fertilization，IVF）胚胎生產(chǎn)效率較低，其原因目前尚不清楚。豬胚胎體外生產(chǎn)技術(shù)包括卵母細胞體外成熟、IVF 和胚胎體外培養(yǎng)3 個環(huán)節(jié)。其中最重要、影響最大的是IVF，盡管人們已采用多種方法來提高IVF胚胎的質(zhì)量，但體外生產(chǎn)的豬胚胎相較于體內(nèi)生產(chǎn)胚胎的發(fā)育能力仍存在較大差距。

單寧酸（Tannic Acid，TA）是一種天然多酚，由5 個鞣酸殘基共價連接到1 個中央葡萄糖而組成，它是一種有效的自由基清除劑和脂質(zhì)過氧化抑制劑。TA作為單寧家族的一員，可抑制精子頂體釋放的透明質(zhì)酸酶活性，阻止卵丘-卵母細胞復合體（Cumulus-oocyte Complexes，COCs）胞外基質(zhì)水解過程，從而影響受精過程中精子在卵丘細胞間的遷移效率。研究表明，在豬受精培養(yǎng)液內(nèi)添加TA 可降低活性氧（Reactive Oxygen Species，ROS）水平以調(diào)節(jié)頂體反應（Acrosome Reaction，AR），并可通過抑制IVF 過程中透明質(zhì)酸酶活性來阻止多精受精發(fā)生。本研究旨在探索受精液中精子密度和添加TA 對豬胚胎體外生產(chǎn)效率的影響，以期優(yōu)化豬IVF 技術(shù)參數(shù)從而提高整體生產(chǎn)效率。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 豬卵巢 豬卵巢取自沙河第五肉聯(lián)廠屠宰場，置于盛有30～32℃的雙抗-生理鹽水的保溫瓶中于2～3 h 內(nèi)運回實驗室。

1.1.2 豬冷凍精液 豬冷凍精液購自百鈞達科技發(fā)展（北京）有限公司，使用液氮罐運輸至實驗室。……