羅渝雯,李俊,顓清芮,孟琳,杜幸柱,周丹,王龍飛,劉鴻宇,侯云鵬,傅祥偉,4*
(1.中國農業大學動物科學技術學院,北京 100193;2.河北醫科大學第一醫院生殖中心,河北石家莊 050031;3.中國農業大學生物學院,北京 100193;4.省部共建綿羊遺傳改良與健康養殖國家重點實驗室,新疆石河子 832003)
2016 年,野生貓科動物被列入世界自然保護聯盟瀕危物種紅色名錄(IUCN)。家貓是與野生貓科動物親緣關系最近且最容易獲得的生物模型,已有研究證明多種家貓輔助生殖技術(ART)方案可以應用于野生貓科動物。同時,作為人類的伴侶動物,家貓的輔助生殖技術也獲得了極大的社會關注度。
慢速冷凍和玻璃化冷凍是動物配子、胚胎冷凍保存的2 種基本方法。Whittingham 等于1972 年首次將小鼠胚胎成功進行低溫保存,又于1977 年成功冷凍小鼠成熟卵母細胞。隨后,低溫保存技術不斷在兔、牛、人等物種上成功應用。慢速冷凍過程中會遇到設備操作復雜、耗時長等諸多問題,特別是在慢速冷凍過程中,細胞內會不可避免地產生冰晶,損害細胞結構,嚴重時甚至會造成細胞死亡。為改善冷凍保存的效果,Rall 等在1985 年發明了玻璃化冷凍法。玻璃化冷凍利用高濃度的冷凍保護劑(CPA)處理細胞,實現快速降溫從而使細胞呈現玻璃化狀態。由于超快速降溫和高濃度CPA 能抑制冷凍過程中冰晶的形成,因此玻璃化冷凍相對于慢速冷凍可以有效減少冷凍損傷。在過去的十年中,玻璃化冷凍已經逐步取代了慢速冷凍,成為冷凍保存卵母細胞的首選技術?!?br>