非特異性陰道炎患者血清及陰道灌洗液細胞因子水平分析

段寧霞 申超紅 顏喜玲

陰道炎為常見婦科疾病，包含非特異性陰道炎及特異性陰道炎，其中特異性陰道炎是因一些特定的病原微生物引起的感染，如風濕性心肌、腎小球腎炎等［1?2］，而非特異性陰道炎則是因一般病原菌感染引起的，如鏈球菌、變形桿菌等，陰道分泌物增多、褲子物料不適合等均會引發非特異性陰道炎［3?4］，在臨床中非特異性陰道炎發生率占比更多，患者早期無明顯特征，急性發作期間有陰道分泌物增多、外陰道瘙癢等癥狀，且遷延的病情及反復發作特點均嚴重影響患者生活質量。近年來研究提出，免疫細胞功能紊亂或自身細胞因子紊亂是促進非特異性陰道炎發生的重要因素［5?6］。本研究中通過對非特異性陰道炎患者血清及陰道灌洗液中T 細胞群及炎癥因子水平進行分析，旨在探討以上指標在非特異性陰道炎中表達情況，為臨床診斷及治療提供客觀依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年6月至2021年6月在許昌市建安區婦幼保健院治療的108 例非特異性陰道炎患者為研究對象（研究組），另選取同期本院體檢健康的志愿者68 例為對照組，其中觀察組平均年齡（41.56±5.37）歲；平均病程（3.54±0.67）個月。對照組平均年齡（41.67±5.33）歲；平均病程（3.59±0.54）個月，兩組一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05）有可比性。納入標準：①研究組均診斷為非特異性陰道炎［7］，對照組為體檢健康者；②患者有外陰瘙癢、白帶增多、陰道灼痛感；③均知情并自愿參與本研究；④均為已婚女性且有性生活史。排除標準：①合并其他宮頸或者陰道病變者；②合并其他惡性腫瘤者；③合并嚴重心肝腎器質性疾病者。本研究符合赫爾辛基宣言。

1.2 方法及觀察指標

1.2.1 病原菌分析

采用無菌棉試紙收集患者陰道上側壁約2 cm 處單層柱狀上皮細胞，置于培養基上進行培養，并在37℃下孵育，采用VITEK 2 Compact 全自動微生物分析儀（法國生物梅里埃公司）鑒定病原菌，并采用快速革蘭氏染色液確定細菌種類。

1.2.2 治療方法

采用克霉唑栓（國藥集團武漢中聯四藥藥業有限公司生產，國藥準字H42021869，規格0.15 g）治療研究組患者，1 粒/次，1 次/d，夜晚使用，均在月經結束后用藥，在治療前采用溫開水：碳酸氫鈉溶液（1∶500）清洗外陰及陰道，向陰道深處置入栓劑，治療期間禁止性生活、游泳及盆浴，盡可能避免進食辛辣刺激食品，1w 為1 個療程，治療4 個療程。

1.2.3 炎癥因子及T 細胞群檢測

取樣：在治療前后收集患者清晨空腹靜脈血，均分為2 份。另取膀胱截石位，應用無菌生理鹽水沖洗陰道壁上1/3 處，回吸沖洗液，均分為2 份。陰道灌洗嚴格遵循《陰道灌洗操作方法及標準》中相關準則進行。檢測：采用流式細胞儀檢測T 細胞群指標水平；采用雙抗體夾心ELISA 法檢測TNF?α、IL?2、IL?8、IL?10 水平。

1.3 統計學方法

采用SPSS 20.0 軟件處理數據；無序分類資料采用χ2檢驗；計量資料以（）表示，組內計量資料比較采用配對樣本t檢驗，組間計量資料比較采用獨立樣本t檢驗；血清及陰道灌洗液中炎癥因子與T 細胞群指標相關性采用Spearman 相關性分析；P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 病原菌分布

108 例患者共檢出120 株病原菌，且對病原菌分析發現，鏈球菌屬感染最為常見，占比36.67%，葡萄球菌屬感染次之，占比23.33%。見表1。

表1 病原菌分布Table 1 Distribution of pathogenic bacteria

2.2 兩組血清中炎癥因子含量比較

治療前研究組血清中IL?2、TNF?α 低于對照組，IL?8、IL?10、IL?6 高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05），且研究組治療后血清中IL?2、TNF?α 均顯著升高，IL?8、IL?10、IL?6 降低，差異有統計學意義（P<0.05），但研究組治療后血清中以上指標與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05）。見表2。

表2 兩組血清中炎癥因子含量比較（±s）Table 2 The levels of serum inflammatory factors in the two groups（±s）

表2 兩組血清中炎癥因子含量比較（±s）Table 2 The levels of serum inflammatory factors in the two groups（±s）

注：與對照組比，aP<0.05；表格內統計值為治療后與治療前比結果。

組別對照組研究組n治療前治療后68 108 t 值P 值IL?2（pg/mL）16.25±3.54 8.87±1.33a 16.17±3.25 21.604 0.000 IL?8（pg/mL）116.54±12.36 517.26±56.43a 127.54±13.69 67.749 0.000 IL?10（pg/mL）13.05±2.64 28.36±3.54a 12.64±2.58 39.294 0.000 TNF?α（ng/L）32.56±3.78 23.64±5.41a 31.87±5.69 10.893 0.000 IL?6（pg/mL）44.67±5.29 71.56±9.42a 45.54±6.74 23.345 0.000

2.3 兩組陰道灌洗液中炎癥因子含量比較

治療前研究組陰道灌洗液中IL?2、TNF?α 低于對照組，IL?8、IL?10、IL?6 高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05），且研究組治療后陰道灌洗液中IL?2、TNF?α 均顯著升高，IL?8、IL?10、IL?6 降低，差異有統計學意義（P<0.05），但研究組治療后陰道灌洗液中以上指標與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05）。見表3。

表3 兩組陰道灌洗液中炎癥因子含量比較（±s）Table 3 The levels of inflammatory factors in vaginal lavage fluid of the two groups（±s）

表3 兩組陰道灌洗液中炎癥因子含量比較（±s）Table 3 The levels of inflammatory factors in vaginal lavage fluid of the two groups（±s）

注：與對照組比，aP<0.05；表格內統計值為治療后與治療前比結果。

組別對照組研究組n治療前治療后68 108 t 值P 值IL?2（pg/mL）13.26±2.48 7.56±1.03a 13.18±2.54 11.346 0.000 IL?8（pg/mL）105.64±12.33 489.64±51.33a 109.54±13.28 14.537 0.000 IL?10（pg/mL）11.45±2.64 26.54±3.15a 11.27±2.51 13.690 0.000 TNF?α（ng/L）27.64±3.54 18.33±2.64a 27.26±3.61 15.001 0.000 IL?6（pg/mL）40.61±5.28 65.41±7.53a 40.39±5.37 14.369 0.000

2.4 兩組血清中T 細胞群指標水平比較

治療前研究組血清中CD3+、CD4+、CD8+顯著低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05），且研究組治療后血清中CD3+、CD4+、CD8+均顯著升高，差異有統計意義（P<0.05），但研究組治療后血清中以上指標與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05）。見表4。

表4 兩組血清中T 細胞群指標水平比較（±s）Table 4 The levels of serum T cell subsets in 2 groups（±s）

表4 兩組血清中T 細胞群指標水平比較（±s）Table 4 The levels of serum T cell subsets in 2 groups（±s）

注：與對照組比，aP<0.05；表格內統計值為治療后與治療前比結果。

組別對照組研究組n治療前治療后68 108 t 值P 值CD3+（%）61.54±7.21 53.26±6.57a 61.07±7.18 5.671 0.000 CD4+（%）41.25±6.33 36.29±5.44a 41.33±5.69 7.920 0.000 CD8+（%）32.54±3.67 26.41±3.59a 32.13±4.23 11.200 0.000

2.5 兩組陰道灌洗液中T 細胞群指標水平比較

治療前研究組陰道灌洗液中CD3+、CD4+、CD8+顯著低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05），且研究組治療后陰道灌洗液中CD3+、CD4+、CD8+均顯著升高，差異有統計學意義（P<0.05），但研究組治療后陰道灌洗液中以上指標與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05）。見表5。

表5 兩組陰道灌洗液中T 細胞群指標水平比較（±s）Table 5 The levels of T cell subsets in vaginal lavage fluid of the two groups（±s）

表5 兩組陰道灌洗液中T 細胞群指標水平比較（±s）Table 5 The levels of T cell subsets in vaginal lavage fluid of the two groups（±s）

注：與對照組比，aP<0.05；表格內統計值為治療后與治療前比結果。

組別對照組研究組n治療前治療后68 108 t 值P 值CD3+（%）60.27±5.33 52.36±5.45a 61.33±6.97 13.201 0.000 CD4+（%）41.33±6.54 35.67±5.28a 41.28±5.64 23.114 0.000 CD8+（%）32.47±3.69 25.41±3.6a 32.57±4.13 15.219 0.000

2.6 血清中炎癥因子與T 細胞群指標相關性分析

相關性分析發現，血清中炎癥因子與T 細胞群指標無相關性（P>0.05）。見表6。

表6 血清中炎癥因子與T 細胞群指標相關性分析Table 6 Correlation between serum inflammatory factors and T cell subsets

2.7 陰道灌洗液中炎癥因子與T 細胞群指標相關性分析

相關性分析發現，陰道灌洗液中炎癥因子與T細胞群指標無相關性（P>0.05）。見表7。

表7 陰道灌洗液中炎癥因子與T 細胞群指標相關性分析Table 7 Correlation between vaginal lavage fluid inflammatory factors and T cell subsets

3 討論

在本研究中，108 例患者共檢出120 株病原菌，且對病原菌分析發現，鏈球菌屬感染最為常見，葡萄球菌屬感染次之，提示鏈球菌及葡萄球菌為非特異性陰道炎感染的主要病原菌，而臨床亦需進行相關藥敏試驗后給予治療，避免產生耐藥性。

本研究結果提示非特異性陰道炎患者IL?2、TNF?α 較健康者更低，IL?8、IL?10、IL?6 水平更高，分析Th1 及Th2 淋巴細胞通過其分泌物對彼此細胞分化及增值進行調節，Th1 及Th2 的失衡打破則會影響機體細胞因子的合成，IL?2、TNF?α 主要由Th1 細胞分泌，IL?8、IL?10、IL?6 則由Th2 細胞分泌，為抗炎因子，是維持機體免疫平衡的重要因子，在病原體侵襲陰道后，體內免疫環境被破壞，促炎因子水平降低，抗炎因子水平升高，而，Th1 及Th2 的失衡后，則會導致陰道炎癥發生［8?9］。本研究中研究組治療后血清及陰道灌洗液中IL?2、TNF?α均顯著升高，IL?8、IL?10、IL?6 降低，但研究組治療后血清及陰道灌洗液中以上指標與對照組比較，差異無統計學意義，這提示經藥物治療后患者血清及陰道灌洗液中細胞因子可恢復平衡。

此外，治療前研究組血清及陰道灌洗液中CD3+、CD4+、CD8+顯著低于對照組，提示非特異性陰道炎患者血清及陰道灌洗液中CD3+、CD4+、CD8+均較健康者低，CD3+為識別性T 細胞主要標志物，CD4+為Th 表面標志物，Th 可通過增生擴散，將其他可直接產生免疫反應的細胞進行激活，CD8+為細胞毒性T 細胞（Tc）標志物，Tc 殺傷力較強，可反復殺傷病毒靶細胞及微生物感染的細胞［10?12］。而非特異性陰道炎患者表現為血清及陰道灌洗液Tc 細胞抑制，機體免疫功能低下，血清及陰道灌洗液中細胞毒及淋巴細胞增生能力均呈反應性降低，平衡被打破后，T 淋巴細胞對細胞因子的合成也隨之受到影響，CD3+、CD4+、CD8+顯著降低［13］。炎癥因子水平的升高多與機體免疫功能紊亂有一定關系，但本研究經相關性分析發現，血清及陰道灌洗液中炎癥因子與T 細胞群指標無相關性，可能與本研究中樣本量較少有關。

綜上所述，非特異性陰道炎患者血清及陰道灌洗液中IL?2、TNF?α 及T 細胞群指標表達降低，IL?8、IL?10、IL?6 表達升高，推測其誘導的細胞免疫及體內免疫功能紊亂是誘發非特異性陰道炎的重要因素。