血清AFP、GGTIⅡ、AFU和DCP聯合檢測對肝癌的診斷價值

陳琳 張恒 江斌

肝癌分為原發(fā)性與繼發(fā)性兩種，前者指肝細胞或肝內膽管上皮細胞發(fā)生的惡性腫瘤［1］，而后者指身體其他器官起源的惡性腫瘤擴散或轉移到肝臟［2］。Zeng 等［3］研究結果顯示，肝癌好發(fā)于中年男性人群中，發(fā)病率居惡性腫瘤第4 位，其發(fā)病多與飲酒、病毒性肝炎及遺傳因素等有關，發(fā)病早期臨床癥狀缺乏典型性，導致臨床診療難度較大。病理組織檢查是肝癌患者診斷“金標準”，能確定肝癌的類型、分期，可指導臨床診療，但是該方法具有一定的風險性，且患者診斷時會產生恐懼心理［4?5］。目前，甲胎蛋白（alpha?fetoprotein，AFP）廣泛應用于血清學診斷中，能預測肝癌的發(fā)生、輔助肝癌診斷，但是仍有30.0%患者肝癌患者AFP 呈陰性，且該指標診斷靈敏度僅為70.0%左右［6?7］。朱嫦琳等［8］研究表明，多項腫瘤標志物指標聯合檢測有助于提高肝癌診斷靈敏度。AFP、轉肽酶Ⅱ（gamma?glutamyltransferaseⅡ，GGTII）、a?l?巖藻糖苷酶（a?L?Fu?cosidase，AFU）及去r?羧基凝血酶原（des?γ?carboxy prothrombin，DCP）是近年來診斷肝癌較新的指標，具有一定診斷價值。本研究以肝癌患者為對象，探討AFP、GGTⅡ、AFU 及DCP 聯合檢測在肝癌患者中的診斷價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇2020年1月至2022年1月湖北醫(yī)藥學院附屬十堰市太和醫(yī)院肝膽胰診療中心收治的肝癌患者104 例為肝癌組；選擇同期治療的肝硬化患者34 例為肝硬化組；選擇同期治療的慢性肝炎患者31 例為肝炎組；選擇同期健康體檢者29 名為對照組。本研究均獲得倫理委員會批準，患者或家屬已簽署同意書，兩組臨床資料比較差異無統計意義（P>0.05），具有可比性。見表1。

表1 四組臨床資料比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of clinical data between the four groups［n（%），（±s）］

表1 四組臨床資料比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of clinical data between the four groups［n（%），（±s）］

組別肝癌組肝硬化組肝炎組對照組χ2/F 值P 值性別男66（63.46）18（52.94）19（61.29）16（55.17）1.294 0.782女38（36.54）16（47.06）12（38.71）13（44.83）年齡（歲）61.29±6.39 62.11±6.43 62.63±6.47 62.18±6.53 0.683 0.416 BMI（kg/m2）23.19±3.41 23.53±3.47 23.15±3.24 23.64±3.31 0.941 0.692

1.2 納入、排除標準

納入標準：符合肝癌、肝硬化、慢性肝炎診斷標準［9］，經肝功能兩對半、超聲及影像學檢查確診；配合完成AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 檢查；年齡≥18歲，患者臨床資料完整。排除標準：精神異常、凝血功能異常或伴有自身免疫系統疾病者；合并其他部位惡性腫瘤或近期出現維生素K 缺乏、服用藥物影響檢測指標者；認知障礙、近期行放化療、生物免疫治療者。

1.3 方法

1.3.1 血液標本采集

肝癌組、肝硬化組、肝炎組入院后次日取外周空腹肘靜脈血3 mL，對照組健康體檢當天取外周空腹血3 mL，靜止2 h 后，5 min 離心，速度為3 000 rpm，離心半徑10 cm，溫度為4℃。

1.3.2 檢測方法

采用電化學發(fā)光免疫分析測定各組AFP 水平，儀器為日本Lumipulse G1200 分析儀及配套試劑盒，參考值：（0～8.1）ng/mL［10］；采用全自動生化分析儀測定各組GGTII 水平，儀器購自于羅氏全自動生化分析儀，參考值：7～45 U/L［11］；采用化學比色速率法測定AFU 水平，儀器為日立7600?020ISE，試劑盒購自于浙江伊利康生物技術有限公司，參考值：234～414 μmol/L；采用酶聯免疫吸附試驗測定各組DCP 水平，試劑盒購自于北京熱景生物技術有限公司，參考值：<300 μg/L［12］。

1.3.3 診斷價值及效能

繪制ROC 曲線，分析血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 及聯合測定在肝癌中的診斷效能（靈敏度與特異度）。

1.4 統計分析

采用SPSS 24.0 計量資料軟件進行統計分析，符合正態(tài)分布采用（）表示，多組數據比較采用F檢驗，組間計量資料行t檢驗，計數資料采用n（%）表示，行χ2檢驗，以P<0.05 差異有統計學意義。

2 結果

2.1 四組患者血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 比較

肝硬化組、肝炎組及對照組血清AFP、AFU、DCP 水平比較差異無統計意義（P>0.05）；肝癌組血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 水平高于肝硬化組、肝炎組及對照組，肝硬化組血清GGTⅡ水平高于肝炎組及對照組，肝炎組血清GGTⅡ水平高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表2。

表2 四組患者血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 比較（±s）Table 2 Comparison of serum AFP，GGTⅡ，AFU and DCP among four groups（±s）

表2 四組患者血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 比較（±s）Table 2 Comparison of serum AFP，GGTⅡ，AFU and DCP among four groups（±s）

注：與對照組比較，aP<0.05；與肝炎組比較，bP<0.05；與肝硬化組比較，cP<0.05。

組別肝癌組肝硬化組肝炎組對照組F 值P 值n 104 34 31 29 AFP（ng/mL）153.98±15.28abc 3.69±0.63ab 3.65±0.61a 2.24±0.41 10.693 0.000 GGTII（U/L）123.19±9.17abc 74.57±6.74ab 43.19±5.12a 18.68±2.15 7.781 0.000 AFU（μmol/L）631.59±45.69abc 324.17±32.41ab 319.68±31.59a 317.81±31.32 8.518 0.000 DCP（μg/L）7.49±1.21abc 1.63±0.25ab 1.61±0.23a 1.58±0.21 9.285 0.000

2.2 肝癌組不同臨床病理特征下血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 比較

肝癌患者不同腫瘤直徑、腫瘤分期、門靜脈癌栓及遠處轉移病理狀態(tài)下患者血清AFP、GGTII、AFU、DCP 比較差異具有統計意義（P<0.05）。見表3。

表3 肝癌組不同病理下血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 比較（±s）Table 3 Comparison of serum AFP，GGTⅡ，AFU and DCP in liver cancer group under different pathologies（±s）

表3 肝癌組不同病理下血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 比較（±s）Table 3 Comparison of serum AFP，GGTⅡ，AFU and DCP in liver cancer group under different pathologies（±s）

病理類型腫瘤直徑n≥4 cm<4 cm 46 58 t 值P 值腫瘤分期Ⅰ～Ⅱ期Ⅲ～Ⅳ期71 33 t 值P 值門靜脈癌栓37 67 t 值P 值遠處轉移有無 是否28 76 t 值P 值AFP（ng/mL）167.19±18.33 143.50±12.15 8.481 0.000 148.73±12.11 165.27±17.43 7.125 0.000 171.57±21.95 144.27±14.12 7.285 0.000 170.58±22.11 147.86±12.38 5.298 0.000 GGTII（U/L）132.59±12.41 115.73±8.63 9.136 0.000 117.63 135.16±12.47 6.392 0.000 138.38±13.45 114.80±8.52 7.194 0.000 139.51±14.39 117.18±10.13 8.581 0.000 AFU（μmol/L）689.41±49.48 585.73±34.61 6.326 0.000 608.31±41.23 681.68±48.67 7.781 0.000 687.34±49.81 600.80±41.23 9.183 0.000 688.47±50.14 610.63±40.69 8.313 0.000 DCP（μg/L）8.17±1.32 6.95±0.98 9.029 0.000 7.15 8.21±1.35 6.252 0.000 8.27±1.37 7.06±0.74 6.114 0.000 8.23±1.34 7.22±0.78 6.193 0.000

2.3 血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 在肝癌患者中診斷價值

ROC 曲線結果表明：血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 聯合檢測在肝癌患者中診斷靈敏度與特異度高于四指標單一檢測（P<0.05）。見表4、圖1。

圖1 血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 在肝癌患者中診斷價值Figure 1 The diagnostic value of serum AFP，GGTⅡ，AFU and DCP in patients with liver cancer

表4 血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 在肝癌患者中診斷價值Table 4 Diagnostic value of serum AFP，GGTⅡ，AFU andDCP in patients with liver cancer

3 討論

肝癌是我國發(fā)生率較高的惡性腫瘤，隨著人們生活方式改變，疾病發(fā)生率明顯呈上升趨勢。林玲等［13］研究顯示，原發(fā)性肝癌起病隱匿，多數患者確診時已經是中晚期，增加臨床診療難度。AFP是一種糖蛋白，主要由胎兒干細胞及卵黃囊合成。AFP 在人體中具有多重生理功能，包括：運輸功能、作為生長調節(jié)因子的雙向調節(jié)功能、免疫抑制及T 淋巴細胞誘導凋亡等，其表達水平能反映患者的基本嚴重程度。對于肝癌患者AFP 水平多呈高表達，加強肝癌患者AFP 水平測定，能輔助臨床診斷［14］。但是，AFP 單一使用時存在一定的局限性，加強不同指標的聯合測定，對幫助患者早期確診具有重要的意義。

GGTⅡ是一種結合在細胞表面的生物酶，在HBV 感染的原發(fā)性肝癌中高表達，在肝癌患者中活性進一步上升，由此看出，GGTⅡ可作為肝癌診斷的重要指標［15］。本研究中，肝癌組血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 水平高于肝硬化組、肝炎組及對照組，肝硬化組血清GGTⅡ水平高于肝炎組及對照組，肝炎組血清GGTⅡ水平高于對照組。從本研究結果看出，血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 水平在肝癌患者中呈高表達，其表達水平能反映患者的疾病嚴重程度，可指導臨床診療。AFU 屬于是一種調節(jié)糖、蛋白質等大分子物質代謝的酸性水解酶，不僅存在于肝細胞組織中，亦可存在于腦、腎、胰腺等組織的成纖維細胞、白細胞中［16］。符白玉等［17］研究顯示，AFU 含量在原發(fā)性肝癌中顯著增高，較轉移性肝癌、肝硬化、惡性間皮瘤血清活性更高。凝血酶原是無活性的凝血酶的前體，主要由肝臟合成，并通過VitK 作為輔助因子γ羧化后轉位活化的凝血酶形式。當肝臟發(fā)生癌變后，合成了比正常結構少的γ 羧基谷酸，形成異常的凝血酶原。正常人血清中DCP 含量相對較低或不表達，但是在肝癌患者中DCP 水平呈上升趨勢。因此，通過測定DCP 能實現肝癌的診斷與監(jiān)測，尤其是對于AFP 陰性患者，可作為肝癌的輔助診斷指標［17］。本研究中，肝癌患者不同腫瘤直徑、腫瘤分期、門靜脈癌栓及遠處轉移病理狀態(tài)下患者血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 比較差異具有統計意義，從本研究結果看出，血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 表達水平與腫瘤直徑、腫瘤分期病理狀態(tài)存在緊密的聯系。為了進一步分析不同血清指標在肝癌患者中的表達，本研究中繪制ROC 曲線，結果表明：血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 聯合檢測在肝癌患者中診斷靈敏度與特異度高于四指標單一檢測。因此，臨床上對于疑似肝癌患者，應加強患者血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 水平測定，發(fā)揮不同檢測指標優(yōu)勢，幫助患者早期確診，必要時可聯合病理組織檢查，為患者后續(xù)診療提供參考依據。

綜上所述，血清AFP、GGTⅡ、AFU、DCP 在肝癌患者中呈高表達，且在患者不同病理中表達水平存在差異，不同指標聯合測定能提高診斷靈敏度與特異度，值得推廣應用。