2021 年安徽省屠宰及流通環節禽群主要呼吸道病毒感染情況調查

沈 艷，何長生，劉 華，王 維，朱良強

（安徽省動物疫病預防與控制中心，安徽合肥 230091）

禽類獨特的解剖、生理和免疫學特點，導致其呼吸系統疾病多發，其中以病毒誘發的危害最為嚴重[1]。在我國流行的烈性傳染性禽類呼吸道病毒中，高致病性禽流感病毒（AIV-H5/AIV-H7）為一類動物疫病病原，新城疫病毒（NDV）為二類動物疫病病原，禽傳染性支氣管炎病毒（IBV）和禽傳染性喉氣管炎病毒（ILTV）為三類動物疫病病原，它們均具有傳播快、發病急、死亡率高的特征。禽偏肺病毒（aMPV）雖然致死率不高，但同樣具有極高的傳染性，若伴有其他病原混合或繼發感染，會加重病情，增加死亡率。上述病原通常以單獨或者混合感染形式流行于禽群中，家禽感染后通常會產生相似的呼吸道癥狀，僅通過臨床診斷難以區分。

安徽省地處華東腹地，連接長江三角洲，是我國重要的家禽生產基地[2-3]。家禽業是安徽省農村經濟的重要產業，成為精準扶貧的“短平快”產業。規模化和集約化養殖是家禽養殖的發展趨勢所在。屠宰企業處于疫病傳播的關鍵節點，是禽產品從養殖場流向消費者餐桌的必經途徑，因此對屠宰和流通環節進行病原檢測，既能了解禽群病原感染情況，又能評估疫病傳播風險，對養禽業生產以及公共安全衛生意義重大。本研究對2021 年3—11 月在安徽省不同地區17 家家禽屠宰點和1 家農貿市場采集的472 份雞鴨喉頭氣管組織樣品，進行AIV-H5、AIV-H7、NDV、IBV、ILTV、aMPV 病原檢測，通過分析比較不同季節、不同區域、不同禽種的樣本陽性率差異，了解這幾種家禽呼吸道病毒在安徽省禽群中的感染情況，以期為本地區家禽病毒性呼吸道疾病防控提供依據。

1 材料和方法

1.1 樣品來源

472 份雞鴨喉頭氣管組織樣品分別于2021 年3 月（春季）、6 月（夏季）和11 月（秋季）采自皖北（潁上縣、碭山縣、利辛縣、霍邱縣）、皖中（肥西縣、和縣、鳩江區、三山區）、皖南（寧國市、廣德市、涇縣、旌德縣）12 個縣（市、區）的17家屠宰企業和1家農貿市場，共采集27批次（表1）。

表1 2021 年27 批次的采樣信息

1.2 主要試劑

AIV-H5/H7 亞型雙重實時熒光RT-PCR 檢測試劑盒（批號20210426P）、ILTV 實時熒光RT-PCR檢測試劑盒（批號20210302P），購自哈爾濱元亨生物藥業有限公司；NDV 通用型實時熒光RT-PCR檢測試劑盒（批號20210621）、IBV 實時熒光RTPCR 檢測試劑盒（批號71019）、aMPV 核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法，批號71023），購自深圳澳東檢驗檢測科技有限公司。

1.3 樣品處理及檢測

剪取喉頭氣管組織，按1:5（V/V）加入含2%雙抗的PBS 保存液，在組織研磨器內研磨，反復凍融3 次，4 ℃、10 000 r/min 離心10 min 后取上清，采用磁珠法抽提RNA；將所獲得的RNA 根據試劑盒說明書，進行熒光定量RT-PCR 檢測。

1.4 數據統計與分析

對472 份組織樣本分別進行AIV-H5、AIV-H7、NDV、IBV、ILTV、aMPV 病原檢測。1份樣本中只檢測出1 種病原陽性為單一感染，同時檢出2 種病原陽性為雙重感染，同時檢出3 種病原陽性為三重感染，以此類推。利用方差分析方法，分析比較不同季節、不同區域、不同禽源間上述病原陽性率差異以及病原混合感染情況。

2 結果與分析

2.1 不同病原

病原檢測統計結果（表2）顯示，472 份樣本中，檢出NDV、IBV、ILTV、aMPV 核酸陽性，平均陽性率分別為9.96%、27.54%、1.06%、5.51%，陽性批次占比分別為11/27、11/27、3/27、6/27，未檢出AIV-H5、AIV-H7 核酸陽性。

表2 不同呼吸道病毒核酸檢測結果

2.2 不同季節

季節統計結果（表3）顯示：NDV 陽性率秋季最低，與其他季節差異顯著（P＜0.05），春季與夏季差異不顯著（P＞0.05）；IBV 陽性率春季最高，與其他季節差異顯著（P＜0.05），夏季與秋季差異不顯著（P＞0.05）；aMPV 陽性率春季最高，與其他季節差異顯著（P＜0.05），夏季與秋季差異不顯著（P＞0.05）。結果表明，NDV、IBV、aMPV 存在一定的季節流行特征，春季流行率普遍較高。ILTV 僅在夏季檢出，其他季節均未測出。

表3 不同季節病原陽性率統計結果

2.3 不同區域

區域統計結果（表4）顯示：NDV 自北向南都有陽性樣本檢出，但各區域間的陽性率差異不顯著（P＞0.05）；IBV 樣本陽性率皖南、皖中間差異顯著（P＜0.05），而皖北未檢出；ILTV 僅在皖北檢出；aMPV 在皖南、皖中區域均有陽性檢出，但兩區域間的陽性率差異不顯著（P＞0.05）。結果表明，NDV 在安徽省傳播范圍較廣，而其他病原存在一定的區域分布特征，其中IBV 在皖南地區流行最為嚴重。

表4 不同地區病原陽性率統計結果

2.4 不同禽群

472 份樣本中，雞源樣本381 份、鴨源樣本91 份（表5）。NDV 與ILTV 在雞源與鴨源樣本中均有檢出，其中NDV 的雞源陽性率（11.55%）顯著高于鴨源（3.30%），而ILTV 的雞源和鴨源陽性率無顯著差異。IBV 與aMPV 僅在雞源樣本中檢出，陽性率分別為34.12%、6.82%。結果表明，NDV、IBV 在雞群中流行較為嚴重。

表5 不同家禽病原陽性率統計結果

2.5 單一及混合感染

共檢出183 份病毒陽性樣品，其中單一感染159 份、混合感染24 份，占比分別為86.89%、13.11%。單一感染中，IBV 占比最高，為66.67%（106/159）；混合感染以IBV+NDV 和IBV+aMPV 雙重感染為主，占比分別為45.83%（11/24）和50.00%（12/24），僅檢出1 份三重感染樣本，為NDV+IBV+aMPV。結果表明，上述病原仍以單一感染為主，IBV 與其他病原的混合感染較多見。具體結果見表6。

表6 病原感染情況

3 討論

能誘發禽呼吸道疾病的病毒較多，其中AIV、NDV、IBV、ILTV 和aMPV 等較常見。H5和H7 亞型AIV 是一種急性、烈性動物傳染病病原，不僅嚴重危害養禽業發展，也嚴重威脅人類健康，被認為是最有可能導致人類流感大流行的病毒之一[7-8]。從此次檢測結果來看，未檢出H5 及H7 亞型AIV 陽性樣本，說明安徽省高致病性禽流感整體防控較好，但是安徽境內水網密集，且分布有候鳥遷徙途徑，因此對高致病性禽流感的防控仍是家禽疫病防控的重中之重[9]。

本研究缺少冬季檢測結果，具有一定的局限性。早春和冬季等寒冷季節，禽舍的通風、溫度及濕度三者矛盾加劇，家禽易處于缺氧、低溫、高濕、高氨、高二氧化碳的不良環境之中，禽群抗病力降低，因此呼吸道疾病流行率偏高。本研究的季節統計結果顯示，NDV 陽性率春季明顯高于秋季，IBV 陽性率春季明顯高于夏季和秋季，aMPV 陽性率春季顯著高于秋季。鑒于寒冷季節家禽呼吸道病毒感染率較高，應重視早春及冬季寒冷季節呼吸道病毒感染的防控，在做好防寒保暖的同時，注意舍內空氣質量以及環境衛生。

隨著安徽省畜牧產業布局的調整優化，位于江淮和沿江地區的合肥、宣城、蕪湖等地作為安徽省肉禽優勢發展區域，家禽養殖發展迅速，尤其是皖南作為傳統的家禽優勢產業帶，養禽業一直是當地的支柱產業[13]。本研究選擇調查的屠宰禽群基本源于這些養殖區域，因此檢測結果可在一定程度上反映出安徽省不同區域的病原感染特點，其中皖中、皖南區域的病原檢出率較皖北區域相對要高。因此，在各地禽群養殖過程中，不同疫病的防控策略應有側重。針對養殖發展迅速的地區，養殖技術、養殖條件、管理模式要跟上養殖發展速度；傳統養禽區域要提高生物安全防護水平，控制疫病擴散，并做好種苗的“老病”凈化工作；而對于ILTV 僅在皖北檢出，其他區域未檢出，這個現象值得思考，基于本次調查的局限性，后續可以從養殖環境、養殖品種、日常管理、疫苗接種等方面繼續深入調查，從而掌握該病毒的真實流行狀況。

傳統觀念認為，NDV、IBV、ILTV 和aMPV主要感染雞群，造成雞群發病，水禽多攜帶病原而不發病。NDV、aMPV 和ILTV 的“經典”宿主是雞和火雞，很少導致其他禽類發病。而水禽對上述病原抵抗力較強，主要承擔病毒攜帶和傳播角色[4，11-12，17]。本次調查結果也基本符合這些特性，即雞群的病毒感染較鴨群嚴重，因此要重點加強雞群中的病毒性呼吸道疾病防控。但是，水禽是AIV、NDV 等多種禽類病毒的天然儲存庫，在病毒傳播和進化中的作用值得關注。通過“野生水禽-家養水禽-雞群”這幾個密切接觸的生態界面，病毒得以生存、傳播和進化[4]。因此，應重視對鴨群等家養水禽上述病毒性呼吸道疾病的防控，飼養時應避免禽群間的交叉污染。

以往研究[18-20]表明，禽群易存在混合感染，通常以病毒混合細菌或寄生蟲感染，或是免疫抑制病毒混合感染其他病毒為主。本研究發現，禽群呼吸道病毒感染以單一感染為主，且NDV、ILTV、IBV 以及aMPV 均有檢出，說明這些病原均可隱性感染禽群。因此，不同區域、不同季節、不同類型養殖場以及不同批次的養殖禽群，需要建立精準的防范措施。此次調查發現，禽群混合感染率較低，且混合感染類型較為單一，主要為IBV 與其他病原的混合感染，但結合NDV、ILTV、IBV 以及aMPV 均為RNA 病毒，且存在多個血清型，易發生突變等特點，需要加強各種病原感染的綜合控制，加強消毒滅源，合理運用疫苗，提高管理水平。

本研究采樣檢測了屠宰和交易禽群的呼吸道病毒感染情況，其結果可能不能真實體現所有養殖禽群的感染狀況，后續需要開展系統的流行病學調查，以準確掌握全省各區域所有環節禽群呼吸道病毒的流行特征。

4 結論

調查發現：安徽省家禽禽流感防控效果整體較好，但存在不同程度的NDV、IBV、ILTV、aMPV 等病原流行，尤以IBV 最為嚴重；病原存在一定的季節和區域流行特征，早春季節以及皖南區域感染較為嚴重；雞群中的病毒感染風險比鴨群高。因此，應根據不同病原流行特點，采取各有側重的防控策略。