土鱉蟲研究概述

楊 麗,蘇學秀，顧炳麟，王太生，呂益濤，吳兆蕃，武玉婧，王曉燕，石林凡，李普凡，滕澤學，楊世琴，楊 伍

(白銀市藥品檢驗檢測中心,甘肅 白銀 730900)

1 人工養殖技術

土鱉蟲完成一個生命周期歷經產卵、幼蟲、成蟲共三個階段。文獻記載[1]，20世紀60年代，我國就開始了以江蘇省為首的土鱉蟲人工養殖技術探索。基于野生動物保護政策，現藥用土鱉蟲絕大多數為人工養殖，其養殖方式有盆養、缸養、池養和立體飼養等，最大優點表現為生長周期短，投資少，見效快。

人工養殖需要考慮其生活習性、養殖方法、飼料組成、溫度控制以及敵害防治等多個方面外界因素。最初，北方人工養殖土鱉蟲的方法為用磚頭、水泥板(或木板、電阻絲)組成飼養柜，另取干凈的培養土(加入適量生石灰)、鋸術屑或稻殼灰進行小范圍個體戶養殖[2]。后來，周維官等[3]選取不同地域土鱉蟲為試驗基材，對飼養土、蛋白質水平、溫度等多個飼養指標進行了詳細研究，選出了飼養土鱉蟲的適宜條件，發現優化后的養殖法土鱉蟲產量提高 15.5%，耗料比降低10.9%。吳巧鳳等[4]以土鱉蟲幼蟲為載體，率先選用含富硒酵母或亞硒酸鈉等加富飼料進行人工養殖，大大提高了土鱉蟲的品質和市場競爭力。至此，土鱉蟲的人工養殖技術取得突破性進展，終于可以進行大規模的養殖。

2 真偽鑒別

土鱉蟲真偽鑒別在其臨床應用與基礎研究中占有重要地位，鑒別方法有經驗鑒別法、顯微法、光譜法、色譜法、生物鑒定法等。

早在2011年，張葉[5]就在《土鱉蟲及其偽品的鑒別》一文中詳細介紹了地鱉、冀地鱉、金邊土鱉及東方潛龍虱的性狀鑒別要點。鞠康等[6]借助多種儀器對土鱉蟲的不同部位進行圖像采集，利用Photoshop CS5軟件景深合成高清晰度微性狀特征圖片對土鱉蟲進行微性狀鑒定法研究，發現土鱉蟲口器、腹背板邊緣、肛上板、生殖板、觸角、單眼間距與復眼間距比例、單眼、復眼、前足脛節、跗節、爪、尾須、背甲及腹甲剛毛等方面與混淆品有比較明顯的區別。

近年來，陳偉韜等[7]通過改變供試品溶液的制備方法、薄層色譜展開劑、薄層板和檢視方法等條件，確定金邊土鱉的薄層色譜中存在混偽品沒有的橙黃色熒光斑點，可作為金邊土鱉混偽品的鑒別依據。

生物鑒定法中目前應用較成熟的方法是分子生藥學技術。陳偉韜等[8]借助DNA條形碼通過基因數據庫可以有效的鑒別土鱉蟲及其混偽品。李娜等[9]借助線粒體 DNA 細胞色素氧化酶b( Cytb) 基因的分子標記技術對土鱉蟲及其混偽品炮制藥材進行了分子鑒定，確定只有土鱉蟲帶有擴增條帶，可以有效鑒別地鱉蟲及其混偽品。

3 化學成分

土鱉蟲作為傳統中藥動物藥，含有豐富多樣的化學成分，有蛋白質、氨基酸、脂肪酸、膽固醇、揮發油等，其中蛋白質含量占總干重的50%以上[10]。土鱉蟲中還含有多種人體必需氨基酸，已發現18種[11-13]，其中組氨酸基于首位。此外，土鱉蟲中含有多種脂肪酸，包括3種飽和脂肪酸(軟脂酸、豆蔻酸、硬脂酸)和3種不飽和脂肪酸(棕櫚油酸、油酸、亞油酸)。見表1。

表1 土鱉蟲中的化學成分及其種類

4 臨床藥理

現代臨床研究表明，土鱉蟲對治療人體肝、腰、關節等多個臟器疾病有重要作用。土鱉蟲作為中藥動物藥，與其他蟲類動物藥合并可用于治療骨關節類疾病。王繼萱等[16]引用土鱉蟲能破血逐瘀中醫辨證治病，將其用于治療慢性肝炎、早期肝硬化和肝區有悶痛等癥效果顯著。金鑫[17]對100例血瘀型腰痛患者在常規治療的基礎上口服土鱉蟲中藥，發現能有效減輕患者的疼痛、改善血流動力學、降低血液黏度。

近年藥理學研究顯示，土鱉蟲具有降低血脂、促進骨細胞增殖、抗腫瘤等多種藥理作用。姜珊等[18]研究發現土鱉蟲活性肽DP17能夠調控高脂血癥SD大鼠體內能量代謝平衡并激活AMPK/mTOR信號通路來抑制大鼠肝臟脂肪堆積現象，從而發揮降血脂的作用。王晶等[19]發現土鱉蟲的水溶性成分對MC3T3-E1成骨細胞有促增殖作用。馬家寶等[20]歸納總結了土鱉蟲抗腫瘤有效成分和抗腫瘤機制。發現土鱉蟲抗腫瘤有效成分為脂溶性脂肪酸、纖溶活性蛋白、多糖、多種提取物等，抗腫瘤機制則是通過抑制腫瘤細胞的增殖和誘導腫瘤細胞的凋亡來實現的。

5 有害物質及毒性

5.1 有害物質

《中國藥典(2020年版)》已經收錄了中藥土鱉蟲中有害物質的檢測方法。有害物質以重金屬和黃曲霉毒素為主。

重金屬蓄積會引起人體暫時或永久性病理變化，甚至危及生命。朱曉東[21]利用高效液相-電感耦合等離子體質譜技術對86批土鱉蟲中重金屬進行分析檢測，發現土鱉蟲中Pb、As、Cu總體超標率達到56.98%，As殘留水平接近限量值，考慮可能是喂養飼料和地下水通過食物鏈的生物放大效應造成土鱉蟲As積累。李耀磊等[22]采用電感耦合等離子體質譜對土鱉蟲中16種無機元素進行測定，發現土鱉蟲中As、Cd和Pb殘留量較高，提示，重金屬超標應引起關注。

黃曲霉毒素是含劇毒的真菌毒素，嚴重威脅患者用藥安全。建立快速的中藥材污染真菌鑒定方法檢出潛在的產毒真菌，意義重大。白玲[23]通過高效液相色譜法對56批來自五省不同藥材市場的土鱉蟲樣品中4種黃曲霉毒素含量進行分析檢測，均檢出黃曲霉毒素。劉晶晶等[24]采用HPLC柱后光化學衍生熒光檢測法對3種含土鱉蟲中成藥(24批)中黃曲霉毒素進行分析檢測，發現其中21批檢出黃曲霉毒素，檢出率為87.5%。提示，以土鱉蟲為例的中藥動物藥中黃曲霉毒素污染應引起生產企業和藥品監管部門的高度重視。

5.2 毒性

近年來，隨著中藥不良反應報道不斷增多，中藥潛在毒性受到日益關注。人體服用中藥土鱉蟲后，可能發生皮膚過敏、腹痛、全身乏力等中毒癥狀。王雨等[25]從106篇不良反應/事件的文獻報道中篩選涉及含動物藥組分(土鱉蟲、全蝎與蜈蚣)的中成藥92例，臨床不良反應表現為皮膚及其附件、神經系統、循環系統，提示可能與動物藥毒性有關。

目前關于中藥土鱉蟲毒性成分的研究報道很少。傳統中醫用藥時，將生土鱉蟲使用文火焙干后得到炒土鱉蟲，可以起到降低毒性、提高藥效的作用。趙明會等[26]首次制定了炒土鱉蟲規范化炮制工藝和炒土鱉蟲飲片的質量標準研究，為推動動物藥土鱉蟲產業化、功能化開發奠定了基礎。

6 總結與討論

土鱉蟲作為一種傳統中藥動物藥，具有破血逐瘀，續筋接骨的功效。對跌打損傷，筋傷骨折，血瘀經閉，產后瘀阻腹痛，癥瘕痞塊的患者有顯著的治療效果。筆者對近年來中藥土鱉蟲的人工養殖技術、真偽鑒別、化學成分、臨床藥理、有害物質及毒性等五個方面的研究進行歸納總結，發現土鱉蟲的致毒成分和致毒原理尚未明了，關于土鱉蟲致毒機理的研究報道也很少，這將是未來科研學者需要攻克的重點和難點。此外，吳巧鳳等[4]采用真空冷凍干燥和超微粉碎等現代制藥工程技術，成功研制出富硒土鱉蟲凍干粉膠囊制劑，開創了土鱉蟲多功能產品的研發先河。筆者預測，開發土鱉蟲相關新劑型產品或將成為未來科研熱點。