氯胺酮致小鼠發(fā)育期神經(jīng)毒性中長(zhǎng)鏈非編碼RNA的表達(dá)變化

李春竹 李文龍 王 皓 嚴(yán) 佳 周徐慧 馬曉凡 徐安妮 姜 虹

大腦的發(fā)育是一個(gè)十分復(fù)雜的過(guò)程，包括各種神經(jīng)的分化成熟、突觸的發(fā)生，以及神經(jīng)元結(jié)構(gòu)的重塑等[1-2]。多項(xiàng)針對(duì)發(fā)育期動(dòng)物，如嚙齒類動(dòng)物和非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的研究[3]已證實(shí)，麻醉藥物會(huì)使發(fā)育期大腦神經(jīng)元發(fā)生凋亡等退行性改變，產(chǎn)生持久的認(rèn)知功能、行為和記憶方面的缺陷。另一方面，大量針對(duì)兒科患者進(jìn)行的回顧性研究[4]結(jié)果表明，反復(fù)或長(zhǎng)時(shí)間的麻醉會(huì)對(duì)發(fā)育期大腦產(chǎn)生不良影響，導(dǎo)致信息處理速度和精細(xì)運(yùn)動(dòng)等功能顯著受損。氯胺酮是臨床常用的麻醉藥物之一，主要應(yīng)用于兒科手術(shù)麻醉。長(zhǎng)時(shí)間或多次給予氯胺酮會(huì)損害實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的神經(jīng)發(fā)育，造成其遠(yuǎn)期認(rèn)知功能障礙。可能涉及的機(jī)制包括氯胺酮能促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞凋亡，影響神經(jīng)元的分化生長(zhǎng)、樹(shù)突棘形成及突觸可塑性改變等[5]。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNAs，lncRNAs)是非編碼RNA(non-coding RNAs，ncRNAs)的一種[6]。與其他組織相比，大腦中l(wèi)ncRNAs的富集程度高，在進(jìn)化過(guò)程中高度保守[7-8]，還表現(xiàn)出很強(qiáng)的時(shí)間、空間特異性[9-10]。上述特點(diǎn)均表明，lncRNAs是中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和功能調(diào)控的重要因子。由于lncRNAs的表達(dá)特異度高，可作為生物標(biāo)志物，在神經(jīng)發(fā)育方面的應(yīng)用有著廣闊的前景。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康無(wú)特定病原體(specific pathogen free, SPF)級(jí)孕14～16 d的雌性C57BL/6小鼠，以及出生后第7～9天的C57BL/6新生小鼠，均購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司上海分公司。將所有小鼠飼養(yǎng)于SPF級(jí)的動(dòng)物房中，單籠飼養(yǎng)，溫度(25 ℃)和濕度(50%)維持恒定，提供無(wú)限量食物和水，光暗周期為12 h(光控系統(tǒng)，早上7時(shí)至晚上7時(shí)光照，晚上7時(shí)至次日早上7時(shí)黑暗)。……