中老年女性梅毒檢測結果分析

瞿莉

【摘要】目的 探討化學發光微粒子免疫法（CMIA）、甲苯胺紅不加熱血清試驗 （TRUST） 和梅毒螺旋體明膠凝集試驗 （TPPA） 在中老年女性梅毒檢測中的運用價值。方法 選取2021年6月至2022年2月在南京市婦幼保健院進行梅毒檢測的40歲以上女性人群107例為研究對象，用CMIA作為梅毒篩查方法，對梅毒陽性標本用TRUST和TPPA方法進一步復查。結果 CMIA檢出 105 例梅毒陽性標本， TPPA確證陽性 96 例， 陽性符合率為 91.43% （96/105） ；其中31 例TRUST陽性， 且TPPA確證試驗均為陽性； 76 例TRUST陰性， TPPA確證 67 例陽性， 9 例為陰性。結論 CMIA初篩中老年女性梅毒檢測中存在著一定比例的假陽性， CMIA初篩陽性標本第一步應做TRUST驗證， 然后再進一步用TPPA金標準確證， 以降低梅毒的誤診率和醫患糾紛。

【關鍵詞】化學發光微粒子免疫法（CMIA）；甲苯胺紅不加熱試驗（TRUST）；梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）；梅毒

Analysis of syphilis test results in middle-aged and elderly women

QU Li

Maternity Hospital affiliated to Nanjing Medical University （Nanjing Maternal and Child Health Care Hospital）， Nanjing， Jiangsu 210004， China【Abstract】Objective To investigate the application value of CMIA combined with treponema pallidum red unheated serum test （TRUST） and treponema pallidum gelatine agglutination test （TPPA） in the detection of syphilis in middle-aged and elderly women.Methods Selection in June 2021 to February 2022 in nanjing maternity and child health care hospital for syphilis detection of female population aged over 40 107 cases as the research object，CMIA for syphilis screening method，The positive specimens were further examined by TRUST and TPPA.Results CMIA detected 105 syphilis positive specimens， TPPA confirmed positive 96 cases， positive coincidence rate was 91.43% （96/105）. Among them， 31 cases were positive for TRUST and TPPA confirmatory test.TRUST was negative in 76 cases， TPPA confirmed positive in 67 cases and negative in 9 cases.Conclusions CMIA screening of syphilis in the middle-aged and old women syphilis detection there is a certain proportion of false positive results，CMIA positive specimens should be verified by TRUST in the first step， and then confirmed by TPPA gold standard to reduce the misdiagnosis rate of syphilis and doctor-patient disputes.

【Key Words】Syphilis； Chemiluminescence microparticle immunoassay（CMIA）； Toluidine red unheated test （TRUST）； Treponema pallidum gelatin agglutination test （TPPA）

近年來梅毒在我國各地飛速增長，已然成為報告病例總數最多的性病。梅毒是人類特有的疾病，絕大部分由性接觸傳播，傳染危險性極強，危害嚴重性較重，是傳染病防控的重中之重[5]。隨著社會理念的改觀和生活水平的改善，梅毒已經不是男性朋友的專利，女性感染梅毒的病例比重數也在日益增加。尤其是在40歲以上的中老年女性當中，陽性人數呈現增長趨勢。南京市婦幼保健院為本地區最大的三級甲等婦幼保健院，肩負著本區域70%以上女性健康安全保健工作。本研究統計分析近半年來在南京市婦幼保健院就診的40～80歲中老年女性患者的梅毒抗體檢測結果，對比分析目前實驗室最常用的三種梅毒血清學檢查方法，包括化學發光微粒子免疫法（CMIA）、甲苯胺紅不加熱血清試驗 （TRUST）和梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA），探求不同梅毒血清學檢查方法在中老年女性病例中的應用分析，現報道如下。

1.1 一般資料

選取2021年6月至2022年2月在南京市婦幼保健院進行梅毒檢測的人群107例為研究對象，其均為40歲以上女性患者，平均年齡為 50.13歲。

1.2儀器和試劑

儀器：ARCHITECT 全自動化學發光免疫檢測儀（美國雅培公司生產）；恒溫箱為新苗三用恒溫水箱，其型號為H.SWX-600BS；生物安全柜型號為ESCO-A2型。所用儀器設備的檢測性能均能滿足實驗要求。

試劑：CMIA是由美國雅培原裝進口的配套試劑；TRUST是英科新創（廈門）科技有限公司生產的梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗診斷試劑盒；TPPA是由日本富士瑞必歐株式會社體外診斷用醫藥品梅毒螺旋體抗體診斷試劑。上述試劑盒均在有效期內。

1.3方法

患者均于清晨采集靜脈血至少2ml，采血前避免劇烈運動，采集完成進行離心后取上清液進行檢測，分別利用化學發光微粒子免疫法（CMIA）、甲苯胺紅不加熱試驗（TRUST）和梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）進行檢測，所有檢測遵循試劑盒說明書進行。

1.4觀察指標

以TPPA結果作為金標準，計算CMIA和TRUST的準確率、靈敏度并進行比較。

1.5統計學方法

采用SPSS25.0統計學軟件進行數據統計分析。計數資料采用（%）表示，進行χ2檢驗，計量資料采用（χ±s）表示，進行t檢驗，P<0.05為差異具有統計學意義。

研究對象經TPPA檢測出 98例陽性，9例陰性。CMIA檢出 105例陽性，2例陰性，陽性率為98.13%；TRUST檢測出陽性31例，陰性76例，陽性率28.97% 。CMIA檢測的準確率89.72%，靈敏度97.96% ；TRUST檢測的準確率37.38%，靈敏度31.63%，詳細數據見表1、表2。

人體感染梅毒后，會產生一類特異性抗體和另一類針對類脂質的非特異性抗體。除感染梅毒之外，患另外一些疾病如風濕性心臟病、鉤端螺旋體病等，體內也可能產生微量抗類脂質抗體導致TRUST陽性[6]。這些疾病均是中老年患者常見的內科疾病，特別是伴有心腦血管疾病的中老年人，CMIA和TRUST同時出現假陽性的情況有一定概率。目前實驗室檢測梅毒螺旋體抗體主要以血清學檢查為主。檢測特異性抗體常用的方法有TPPA、ECLIA和CMIA， 而TRUST為檢測非特異性抗體的常用方法。TPPA是在明膠粒子上包被著Nichols 株的精制菌體，然后樣本中的特異性抗體與載體菌株結合，產生凝集反應，從而評判抗體效價，檢測出TP值[1]。雖然TPPA檢測梅毒具有較高的可靠性和穩定性， 但由于檢測耗費較長時間，手工操作流程繁瑣，試劑成本較高且在判定兩孔對比顏色時受主觀控制，因此不合適大批量的初篩試驗。甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）的原理是該甲苯胺紅溶液試劑能與梅毒患者血清或血漿中的反應素形成凝集反應，試劑操作簡易，成本較低，結果容易觀察，此試驗可作為梅毒血清學快速檢測及臨床療效之參考[4]。TRUST是一種常用的梅毒非特異性抗體的血清學檢測方法[2].但是非特異性抗體在臨床上出現類似硬性下疳表征4周后才能檢出，對神經性和潛伏期梅毒極不敏感，假陰性率較高而容易漏診。因此不適合作為梅毒的初篩試驗，但在判斷病程和抗體滴度方面有重要應用價值?；瘜W發光微粒子免疫法（CMIA）檢測是樣本與重組梅毒螺旋體抗原（TpN15、TpN17 和 TpN47）包被的微粒子和項目稀釋液結合，樣本中抗體與微粒子相互結合，沖洗。再加入標記物標記形成的抗體復合物再次沖洗后，最后與預激發液和激發液形成復合物，測量其發光值（RLUs）表示。ARCHITECT 系統根據各樣本和質控品的 RLU 值與 Cutoff RLU 值得比值（S/CO）計算出ARCHITECT 梅毒螺旋體抗體檢測結果。CMIA明顯具有較高的準確性和重復性，同時CMIA具有自動化程度高、流程簡易、時間較短、高穩定性等優點，可作為臨床實驗室大批量檢測梅毒抗體的初篩方法[3]。

本次實驗結果顯示，研究對象經TPPA檢測出 98例陽性，9例陰性。CMIA檢出 105例陽性，2例陰性，陽性率為98.13%；TRUST檢測出陽性31例，陰性76例，陽性率28.97%。CMIA檢測的準確率89.72% ，靈敏度97.96% ；TRUST檢測的準確率37.38% ，靈敏度 31.63%。由此說明，CMIA在中老年女性患者梅毒檢測中的準確率和靈敏度遠高于TRUST，且差異有統計學意義（P<0.05）。說明CMIA具有較高的梅毒螺旋體感染診斷應用價值，適用于臨床檢測標本的大規模篩查。但需注意的是，該檢測方法存在著一定比并例的假陽性結果，比例多少主要取決于試劑盒的特異性、樣本完整性和篩查當地人群的特征，所以在ARCHITECT梅毒螺旋體抗體項目的檢測結果與臨床癥狀不符時，需要通過TRUST和TPPA來復查驗證檢測結果，以降低假陽性率。CMIA與TRUST、TPPA相比自動化程度較高， 檢測流程簡便 ，時間短并且手工環節更少，人工干擾因素較少，數據的重復性和一致性較高，結果數值具穩定性，適用于基層大規模的標本篩查，同時檢測結果也更易于留存。且實驗過程中可將標本處理對結果的影響降到最低[7]。標本量比較少時推薦用TPPA法檢測，若為急診手術患者或用于大規模篩查的實驗室，推薦用CMIA法檢測以確保檢驗結果的及時性和可靠性。但CMIA作為初篩試驗存在有一定的假陽性，若對這些假陽性結果不加以修正就隨意發出報告，容易導致醫患矛盾，并對患者和家屬也易造成無法挽回的傷害[8]。當ARCHITECT梅毒螺旋體抗體項目的檢測結果與臨床癥狀不符時，為了指導臨床醫生正確判讀患者感染的真實情況，實驗室需制訂CMIA檢查需要通過附加其他血清學檢測來驗證檢測結果。對于我院這107例病例主要針對近半年來40歲以上女性研究對象，樣本總數較少且性別單一等方面限制了本次試驗的完整性，這些不足之處會在以后的研究中加以改善及補充。需注意的是，不管何種檢測方法均無法百分之百確保樣本中包含的低量梅毒抗體，因此在梅毒感染初期或者潛伏期，如果已被懷疑為感染時，即使本試劑的判定結果為陰性，也要經過一段時間再進行檢查并與其他的檢查結果和臨床癥狀結合起來加以綜合判斷。因此任何時候取得的陰性結果都不能排除梅毒感染的可能性，需要結合其他信息進行診斷。對于我院這107例病例，主要針對在我院門診、體檢和住院的婦女，地區篩查特征性不足之處會在以后的研究中加以改善及補充。

綜上所述，梅毒是越早發現越好。凡有過高危性接觸者應及早去醫院就診抽血檢查，為了獲得最佳治療診斷，最好重復進行多次梅毒血清學檢查。在三種梅毒血清學檢查中，從試劑成本， 操作流程，結果判讀，數據保存，以及檢測結果的準確性，靈敏度等方面綜合考慮，CMIA可作為大批量梅毒標本篩查的理想檢測手段，用于梅毒螺旋體特異性抗體篩查試驗有助于提高準確性與陽性檢出率，但允許一定的假陽性率。在臨床試驗中，為了提高檢測結果的準確率， 必須輔以TPPA法對可疑標本進行二次確證復查[9]。CMIA初篩中老年女性梅毒檢測中存在著一定比例的假陽性，CMIA初篩陽性標本第一步應做TRUST驗證，TRUST有相對較高特異性，可以指導臨床根據滴度對梅毒的治療效果進行評價，然后再進一步用TPPA金標準確證，以降低梅毒的誤診率和醫患糾紛。

參考文獻

[ 1 ] 賴宇麗，楊志鵬，王禹淇.酶聯免疫吸附試驗 梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗 甲苯胺紅不加熱血清學試驗三種梅毒檢測的方法學比較[J].實用醫技雜志，2016，23（01）：68-70.

[2] 朱學英.3種梅毒檢測方法在檢測梅毒螺旋體中的應用價值[J].醫療裝備，2018，31（17）：74-75.

[ 3 ] 黃作良，劉眾齊，魏潔，蔣傳命.CMIA在梅毒特異性診斷中的臨床應用價值[J].邵陽學院學報（自然科學版），2020，17（05）：87-92.

[4] 賴宇麗，楊志鵬，王禹淇.酶聯免疫吸附試驗 梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗 甲苯胺紅不加熱血清學試驗三種梅毒檢測的方法學比較[J].實用醫技雜志，2016，23（01）：68-70.

[5] 王倩，孟慶晗，趙晉文，丁曉娜，劉朋，王欣俞.探討兩種全自動化學發光免疫分析儀檢測方法在梅毒檢測中的應用價值[J].中國醫學裝備，2021，18（03）：47-50.

[6] 伍尚華，莫國新，徐亮，王瀾，陳英.老年人群不同梅毒血清學檢查的診斷效能[J].深圳中西醫結合雜志，2020， 30（13）：8-9.

[7] 甘釗杏，黎麗紅，何景英.梅毒螺旋體抗體的CMIA法與TPPA檢測比較[J].臨床醫學工程，2011，18（08）：1262-1263.

[8] 張薇，車玉傳.雅培ARCHITECT i2000SR在梅毒實驗室診斷中的臨床應用和評價[J].檢驗醫學與臨床，2018， 15（24）：3721-3725.

[9] 任暉暉，益西措姆，次仁央金，巴桑央金，李慧.CMIA法篩查梅毒抗體[J].基礎醫學與臨床，2018，38（02）：235-236.