細(xì)胞外泌體的分離提取標(biāo)準(zhǔn)化及臨床轉(zhuǎn)化進(jìn)展

在多細(xì)胞生物中，細(xì)胞間通訊是維持細(xì)胞功能和組織穩(wěn)態(tài)所必需的。這種細(xì)胞間的溝通可通過(guò)細(xì)胞間的直接聯(lián)系來(lái)實(shí)現(xiàn)，也可通過(guò)分泌介質(zhì)來(lái)傳遞。其中細(xì)胞釋放各種類(lèi)型的囊泡，如外泌體、核內(nèi)體、微囊泡等可攜帶DNA、RNA、蛋白質(zhì)等物質(zhì)，在細(xì)胞通訊中起到關(guān)鍵作用，外泌體為近年生命科學(xué)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)

。外泌體是一類(lèi)由細(xì)胞分泌的直徑約30～150 nm，密度為1.13～1.19 g/mL的納米級(jí)球形脂質(zhì)雙分子層囊泡

。雖然外泌體這一名詞已得到普遍使用，但根據(jù)國(guó)際細(xì)胞外囊泡學(xué)會(huì)（International Society for Extracellular Vesi?cles，ISEV）2018 年指南，由于外泌體分離存在困難，因此將普遍提取的外泌體學(xué)術(shù)詞匯定義為“細(xì)胞外小泡（small extracellular vesicles，sEVs）”

。目前外泌體提取已存在的技術(shù)主要是基于體積和密度差異的原理，這些分離技術(shù)大多不能完全分離及純化出外泌體。

不同細(xì)胞來(lái)源的外泌體其內(nèi)容物和功能具有特異性，研究發(fā)現(xiàn)不同細(xì)胞來(lái)源外泌體可根據(jù)其性能分別用于疾病的診斷、藥物的傳輸以及免疫治療和再生藥物等。雖然外泌體的商業(yè)價(jià)值已得到廣泛的關(guān)注，但其臨床研究并不樂(lè)觀，主要原因在于：①目前尚未研發(fā)出外泌體大規(guī)模生產(chǎn)純化的技術(shù)

；②目前國(guó)際上尚未制定出外泌體商品化臨床生產(chǎn)準(zhǔn)則

。因此，本文將綜合分析已存在的外泌體分離技術(shù)，比較不同分離技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)，對(duì)目前提出的外泌體提取規(guī)范原則進(jìn)行論述，并闡明不同細(xì)胞來(lái)源外泌體的功能及作用，闡述牙源性間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體的應(yīng)用前景，為未來(lái)外泌體的提取及使用提供參考和建議。……