非小細胞肺癌患者血清NSE和CEA及CYFRA21-1表達與預后的關系*

丁怡， 陳航， 張恩源， 胡劍

(1.貴陽市第一人民醫院 胸外科， 貴州 貴陽 550002； 2.貴州省人民醫院 胸外科， 貴州 貴陽 550002)

肺癌是最危險的癌癥之一，生存率低于其他類型的惡性腫瘤，5年總生存率僅為10%～20%[1]。據統計，肺癌占惡性腫瘤總病例數的11.6%，占癌癥死亡數的18.4%[2]。盡管近年來在肺癌的治療方面取得了進展，但由于肺癌細胞的轉移，導致其預后仍不理想[3-4]。因此，找到肺癌預后的敏感標志物，對于提高肺癌患者的預后生存率具有重要意義。神經元特異性烯醇化酶(neuron specific enolase, NSE)是一種參與糖酵解的烯醇化酶，主要分布在機體神經組織當中[5]，肺癌可引起神經內分泌組織NSE分泌增加，導致血液中NSE含量增加[6]。癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)首次提取于結腸癌和胚胎組織中，早期CEA是作為結腸癌的診斷標志物[7]；后來大量臨床研究證明，在其他惡性腫瘤的血液中也發現了CEA的異常升高，包括肺癌[8]。細胞角蛋白19片段抗原21-1(cytokeratin 19 fragment antigen 21-1，CYFRA21-1)是一種血清腫瘤標志物[9]，對肺癌診斷有較大意義，但是其作為單一的肺癌診斷指標其結果并不準確[10]；有研究發現，食管癌等疾病也可能會引起CYFRA21-1水平的升高[11]。雖然目前臨床上都會對于肺癌患者血清的NSE、CEA及CYFRA21-1水平進行檢測，但是其主要作用是對肺癌進行診斷，通過NSE、CEA及CYFRA21-1水平來預估肺癌患者預后情況的卻很少。因此，同時檢測多種標志物，有助于對患者的預后情況進行有效評估及針對性的治療。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2016年1月—2019年1月胸外科首次收治的非小細胞肺癌患者作為病例組，要求所有患者符合臨床病理診斷為非小細胞肺癌[12]、且有完整的臨床資料。排除標準：(1)非原發性肺癌患者；(2)患者伴有嚴重心、腦、肝、腎等重要器官功能障礙；(3)甲狀腺功能減退；(4)急性感染或免疫系統疾??；(5)凝血功能障礙患者；(6)具有器官移植史患者；(7)拒絕隨訪者。病例組共納入患者97例，男性72例、女性25例，年齡46～87歲、平均(63.95±10.25)歲。另選擇同年健康體檢人群71例作為對照組，男性47例、女性24例，年齡45～83歲、平均(62.58±9.80)歲。2組研究對象一般資料見表1。本研究已取得患者及家屬知情同意。

1.2 研究方法

1.2.1臨床資料收集 收集非小細胞肺癌患者住院記錄及相關檢查單等資料，使用同一表格歸納匯總患者一般基礎資料和疾病相關信息(腫瘤大小、分化程度等)；收集對照組性別、年齡、疾病史等信息。

1.2.2血清腫瘤標志物NSE、 CEA及CYFRA21-1檢測 體檢和住院當天清晨分別取對照組和病例組研究對象空腹外周靜脈血3 mL，4 ℃下2 500 r/min離心15 min，取上清液于新的離心管中，置于-80 ℃保存、備用；采用酶聯免疫吸附測定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法檢測2組研究對象血清中NSE、CEA及CYFRA21-1的水平，根據ELISA試劑盒說明書，對血清樣本進行處理后，采用全自動酶標儀(美國伯樂公司)于450 nm波長處檢測樣本吸光度，并根據標準曲線計算樣品中NSE、CEA及CYFRA21-1水平。根據本院檢驗科提供的參考值范圍對結果進行判定：NSE≥16.30 μg/L、CEA≥3.40 μg/L、CYFRA21-1≥74.40 μg/L分別為表達陽性。

1.2.3隨訪資料收集 以門診復查方式對病例組觀察對象進行36個月隨訪，隨訪周期為每月1次，收集患者體質量、身高、血壓、腫瘤細胞轉移情況及血清NSE、CEA、CYFRA21-1等指標；隨訪過程中對患者進行常規藥物治療，當患者出現腫瘤細胞擴散時、則判定為病情惡化，同時患者因病情需要在隨訪期間進行化療或患者死亡則判定為病情惡化、隨訪終止。

1.3 統計學分析

2 結果

2.1 一般臨床資料

2組研究對象的年齡、性別、飲酒史、是否有高血壓、糖尿病、心血管疾病和家族腫瘤史比較，差異均無統計學意義(P>0.05)；病例組患者吸煙人數比例高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 病例組和對照組研究對象的一般資料Tab.1 General information of the case group and the control group

2.2 總體生存情況

病例組非小細胞肺癌患者自出院開始進行隨訪1～36個月，中位隨訪時間為36.0個月；患者總生存期為1～36個月，中位生存期為36.0個月，1年生存率為78.4%(76/97)，3年生存率為52.6%(51/97)。見圖1。

圖1 病例組非小細胞肺癌患者的生存曲線Fig.1 Survival curve of patients with non-small cell lung cancer in the case group

2.3 血清腫瘤標志物NSE、CEA及CYFRA21-1水平

與對照組比較，病例組非小細胞肺癌患者血清NSE、CEA及CYFRA21-1水平均升高，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 病例組和對照組研究對象血清腫瘤標志物NSE、CEA及CYFRA21-1水平Tab.2 Levels of serum tumor markers NSE, CEA, and CYFRA21-1 in the case group

2.4 非小細胞肺癌患者預后單因素分析

對病例組非小細胞肺癌患者各指標采用log-rank檢驗單因素分析，結果顯示，不同病灶大小、腫瘤分期、腫瘤細胞是否轉移、腫瘤標志物陽性情況的非小細胞肺癌患者的生存狀況比較，差異有統計學意義(P<0.05)；不同年齡、性別的非小細胞肺癌患者的生存狀況比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 不同特征非小細胞肺癌患者預后的單因素分析Tab.3 Univariate analysis of different characteristics and prognosis of patients with

2.5 非小細胞肺癌患者預后多因素分析

經多元Cox逐步回歸分析結果顯示，腫瘤病灶≥3 cm、腫瘤臨床分期為Ⅳ期、腫瘤細胞發生轉移和腫瘤標志物NSE、CEA、CYFRA21-1中有2個及以上為陽性是非小細胞肺癌患者預后的獨立危險因素(P<0.05)。見表4。

表4 影響非小細胞肺癌患者預后的多因素Cox回歸分析Tab.4 Multivariate Cox regression analysis affecting the prognosis of patients with NSCLC

3 討論

肺癌是全球發病率和死亡率最高的惡性腫瘤之一，其發病率和死亡率占男性所有惡性腫瘤的第1位，占女性發病率和死亡率的第2位[13]。肺癌種類繁多，其中非小細胞肺癌約占所有類型肺癌的80%[14]。肺癌早期癥狀不明顯，往往耽誤最佳治療時間，導致后期病情加重，影響患者預后[15]。同時不同類型的肺癌在治療上也有不同的方法，所以肺癌的治療過程更加復雜與困難[16]。因此找到肺癌的預后標志物，以此來提高患者預后情況，是一個迫切的問題。既往研究多采用致癌或抑癌基因表達水平來預測患者的預后情況[17-18]，但是在實際臨床中對于基因的檢測卻很少。本研究采用了臨床上常用的肺癌檢測指標NSE、CEA及CYFRA21-1作為研究內容，通過結合以上3種血清學指標的結果，分析其對非小細胞肺癌患者預后的影響，對高危患者進行早期的針對性治療，以此來提高非小細胞肺癌患者治療后的生存時間和生存質量。

目前，臨床上對于非小細胞肺癌的診斷主要是通過病理檢查[19]。但是，當患者出現相應臨床指針并通過病理檢查確診時，往往錯過了最佳診療時間[20]。為了提高非小細胞肺癌患者后期的生存治療及生存時間，本研究回顧性收集了既往97例非小細胞肺癌患者的病例資料和71例健康體檢人群的相關數據，結果顯示非小細胞肺癌患者血清NSE、CEA、CYFRA21-1均高于健康人群，初步表明了血清NSE、CEA及CYFRA21-1對于非小細胞肺癌的診斷價值，即血清NSE、CEA及CYFRA21-1的異常升高可能與非小細胞肺癌的發生具有一定的相關性。

目前臨床上對于血清NSE、CEA及CYFRA21-1主要作為輔助診斷的作用，其原因是如炎癥和其他惡性腫瘤患者血清NSE、CEA、CYFRA21-1也可能異常升高[21-22]。但是本研究主要探討NSE、CEA及CYFRA21-1對非小細胞肺癌患者預后價值及對患者生存情況的影響。既往有研究報道NSE、CYFRA21-1與肺癌患者預后的關系，結果顯示NSE、CYFRA21-1均有助于對肺癌患者預后的判定[23]。有研究報道，在小細胞肺癌患者中，其血清腫瘤標志物NSE、CEA及CYFRA21-1有2項以上陽性時，存活率會降低[24]。在對非小細胞肺癌患者進行化療后，其血清NSE、CEA及CYFRA21-1均較治療前降低，提示NSE、CEA及CYFRA21-1可作為患者治療效果的指標之一[25]。本研究統計了患者的生存時間，結果表明NSE、CEA及CYFRA21-1中出現2個及2個以上陽性時，患者的平均生存時間相較于其他患者降低，提示在非小細胞肺癌患者中血清NSE、CEA及CYFRA21-1表達水平與患者的生存時間密切相關，可作為預估患者生存情況的重要依據。NSE、CEA及CYFRA21-1中有2個及以上為陽性是非小細胞肺癌患者預后的獨立危險因素，因此當患者出現以上2個指標陽性時，在出院后因密切隨訪發現病情惡化時及早治療，以提高患者生存時間。

綜上，非小細胞肺癌患者血清NSE、CEA及CYFRA21-1水平異常升高，從而可能會導致患者預后不良，減少非小細胞肺癌患者的平均生存時間，因此對于此類患者應密切隨訪，并進行針對性治療，以提高其生存時間。