楊雪梅,楊康明,李 娜
(1.甘孜州人民醫院麻醉科,甘孜 626000;2.甘孜州人民醫院肝膽一科,甘孜 626000;3.海南省人民醫院麻醉科,海口 572000)
急性腎損傷(Acute kidney injury,AKI)是一種常見的急性疾病,死亡率很高,并且容易導致慢性腎病的進展[1]。腎缺血再灌注損傷(renal ischemia-reperfusion injury,RIRI)是導致AKI 最重要的原因之一,常見于腎移植、腎部分切除術、休克、急性腎動脈阻塞和其他臨床手術過程[2]。自噬在RIRI中發揮著重要的作用。因此,開發一種能夠有效調控自噬的藥物將有助于RIRI 的治療。舒芬太尼(sufentanil,Sufen)是臨床最常用的麻醉藥物,具有鎮痛作用強、起效快、蘇醒時間短等優點。有研究報道,Sufen通過抑制過度自噬可減輕大鼠RIRI[3],但具體機制尚不清楚。因此,本研究通過構建RIRI 模型,探究Sufen對RIRI大鼠細胞自噬的影響及其作用機制。
1.1.1 實驗動物 60 只SPF 級雄性SD 大鼠,體質量(200±20)g,購于廣州銳格生物科技有限公司,生產許可證號為SCXK(粵)2021-0059。動物實驗均遵循3R原則,本研究得到甘孜州人民醫院動物倫理委員會的批準(倫理編號:2022-0175)。
1.1.2 主要試劑 枸酸舒芬太尼注射液(宜昌人福藥業有限責任公司);PI3K/AKT 通路抑制劑LY294002、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)檢測試劑盒(北京百奧萊博科技有限公司);丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒(北京索萊寶生物科技有限公司);兔源一抗微管相關蛋白1 輕鏈3(LC3)、p62、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、GAPDH 及辣根過氧化物酶(HRP)標記的羊抗兔二抗(廣州復能生物科技有限公司)。
1.2.1 動物的分組及處理 將60 只SPF 級雄性SD大鼠隨機分為對照組、模型組、Sufen 組、LY294002組、Sufen+LY294002 組,每組12 只。除對照組外,其它組均參考文獻[3]進行RIRI 模型構建。……