異丙酚對(duì)胎鼠離體海馬神經(jīng)元腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子表達(dá)的影響*

韋 祎，周 沾，覃銀瑩，謝玉波，利 莉

（廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院麻醉科，南寧 530021）

異丙酚是快速短效的靜脈麻醉藥物，為GABA受體激動(dòng)劑，常用于誘導(dǎo)和維持小兒麻醉以及重癥監(jiān)護(hù)[1]。長期體內(nèi)外大劑量異丙酚給藥會(huì)引起神經(jīng)元損傷，導(dǎo)致認(rèn)知和學(xué)習(xí)能力障礙[2]。從胚胎時(shí)期起持續(xù)2～3 年這一時(shí)期大腦發(fā)育最快，神經(jīng)元、軸突、樹突和突觸數(shù)量迅速增加，在此期間內(nèi)長時(shí)間大劑量接觸異丙酚會(huì)誘發(fā)神經(jīng)元發(fā)育性神經(jīng)毒性[3]。然而，關(guān)于新生兒中異丙酚安全性的研究報(bào)道較少。因此，減少麻醉藥品對(duì)發(fā)育性腦神經(jīng)元的損傷成為一個(gè)日益熱門的研究課題。本研究擬評(píng)價(jià)異丙酚對(duì)胎鼠離體海馬神經(jīng)元腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）表達(dá)的影響，探討異丙酚神經(jīng)毒性的分子作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 采用廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供SPF級(jí)SD大鼠（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK[桂]2003-0005），實(shí)驗(yàn)遵循實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查指南（GB/T35892—2018）。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng) 將SD 大鼠腹中14 d 胎鼠處死，分離海馬組織，剪碎至1 mm×1 mm×1 mm并與DMEM/F12移入離心管中，加入不含EDTA 胰酶的膠原酶，吹打，37 ℃溫水浴，直至剪碎的海馬組織液呈現(xiàn)混濁不清并可拉出絲狀，然后加入不含EDTA的胰酶，吸除胰酶并加培養(yǎng)基終止消化。吸管上下吹打直至肉眼看不到明顯組織塊，離心，棄上清液，加培養(yǎng)液，制備單細(xì)胞懸液。篩網(wǎng)過濾，取過濾后液體0.5 mL，加入臺(tái)盼蘭染液，染色。鏡下細(xì)胞計(jì)數(shù)，藍(lán)色細(xì)胞為死細(xì)胞，無色透明為活細(xì)胞，密度以1～2×106個(gè)/mL接種于培養(yǎng)板中。顯微鏡下觀察并記錄海馬神經(jīng)元的生長情況包括胞體形態(tài)、樹突、軸突和排列密度程度等。……