多西環(huán)素對(duì)角膜瘢痕形成的影響*

周佳欣，鄒文進(jìn)

（廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院眼科，南寧 530021）

角膜瘢痕是導(dǎo)致失明的主要原因[1-2]，多種眼科常見病均可能導(dǎo)致角膜瘢痕，包括角膜堿燒傷、感染、炎癥、內(nèi)眼手術(shù)等[3]，一旦角膜愈合過程形成永久性瘢痕，將會(huì)影響視力，患者可能需要進(jìn)行角膜移植，但現(xiàn)在角膜供體非常緊缺，亟待一種可以抑制角膜瘢痕形成的藥物。多西環(huán)素是一種常用的抗生素，具有良好的抗炎和抗感染作用[4]，近年來的研究發(fā)現(xiàn)，其還可以抑制肺纖維化[5]、心肌纖維化[6]、減輕皮膚瘢痕厚度[7]等，然而其是否可以抑制角膜瘢痕形成鮮有報(bào)道，其如何對(duì)瘢痕相關(guān)因子的產(chǎn)生作用更是尚未闡明。角膜瘢痕形成是涉及炎癥細(xì)胞浸潤，多種細(xì)胞因子、生長因子合成與分泌，上皮細(xì)胞再生，角膜細(xì)胞纖維化增生的復(fù)雜過程[8]；其中轉(zhuǎn)化生長因子（TGF-β1）誘導(dǎo)的角膜細(xì)胞纖維化是重要因素。本研究通過TGF-β1 誘導(dǎo)角膜細(xì)胞分化成角膜肌成纖維細(xì)胞，觀察多西環(huán)素對(duì)體外培養(yǎng)的角膜肌成纖維細(xì)胞Collagen Ⅰ和Fibronectin表達(dá)的抑制作用，并用大鼠構(gòu)建角膜堿燒傷模型，觀察多西環(huán)素對(duì)堿燒傷后形成的角膜瘢痕作用，從體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其抑制角膜瘢痕形成，并探索其深入的機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 主要試劑和儀器 DMEM/F12培養(yǎng)基、PBS、胎牛血清、青霉素—鏈霉素雙抗（加拿大WISENT 公司）；0.05%胰酶（美國Sciencell 公司）；Ⅰ型膠原酶（美國Gibco 公司）；人重組轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β1（美國Peprotech 公司）；T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶（美國Corning 公司）；細(xì)胞培養(yǎng)箱（德國Binder 公司）；總RNA提取試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-qPCR）檢測(cè)試劑盒（日本Takara 公司）；……