4-辛基衣康酸抑制糖酵解調控M2型巨噬細胞極化*

陳成英，藍 利，2，袁江浪，孔星星，王新航，2，劉彧冰，李 菡，陸彩玲，李習藝，唐 深，2△

（廣西醫科大學 1.基礎醫學院；2.廣西高校基礎醫學研究重點實驗室；3.公共衛生學院，南寧 530021）

巨噬細胞（Mφ）是固有免疫的重要細胞，主要分為促炎的M1 型Mφ 和抑炎的M2 型Mφ，在不同炎癥微環境刺激下會迅速做出反應，發揮促炎或抑炎功能，調控炎癥以限制損害和保護人體[1-2]。當暴露于促進Mφ 可塑性和重編程的細胞因子環境時，M1 和M2 型Mφ 可發生可逆的功能變化，在調節炎癥發生及消退過程中發揮著重要作用[3]。

衣康酸（itaconate，ITA）是M1 型Mφ 中最豐富的代謝產物之一，可以通過激活核因子相關因子2（nuclear factor E2-related factor 2，Nrf2）途徑抑制炎癥[4]。4-辛基衣康酸（4-Octyl itaconate，4OI）是一種可透過細胞膜的ITA 衍生物，在活化的Mφ 中被代謝為ITA，具有抗炎作用[5]。研究報道，4OI 可降低LPS 誘導的肺部炎癥[6]。4OI 可抑制M1 型Mφ 和促炎因子的產生，抑制炎癥反應[5]。研究提示，4OI 發揮抗炎作用的機制可能是通過調節M1 型Mφ 的炎癥極化。目前4OI對M2的作用機制未見詳盡報道，本項目以人髓系白血病單核細胞（THP-1）誘導M2型Mφ 為研究對象，初步研究ITA 衍生物4OI 對M2型Mφ 的影響和作用機制，為ITA 衍生物治療炎癥提供新的科學依據。

1 材料和方法

1.1 材料

THP-1 細胞（中國科學院典型培養物保藏委員會細胞庫）。佛波酯（phorbol myristate acetate，PMA）、TRIzol、刃天青（Sigma公司）；白介素（IL）-4（PeproTech 公 司）；4OI（MedChemExpress）；RPMI1640 培養液、胎牛血清（Gibco 公司）；青霉素、鏈霉素、己糖激酶（Hexokinase，HK）、丙酮酸激酶（Pyruvate kinase，PK）檢測試劑盒（索萊寶生物科技公司）。蛋白定量和RNA提取試劑盒（TaKaRa公司）；SYBR?Green Master（Roche公司）；引物由Invitrogen 公司合成；Leica 倒置顯微系統、StepOne 熒光定量PCR儀、Multiskan Go全波長酶標儀。

1.2 方法

1.2.1 細胞培養及實驗分組