錳中毒小鼠黑質中m6A甲基化及其相關因子的表達研究*

廖嘉家，羅 曼，黃夏杰，黃 婉，李滋虎，覃海蘭，甘玉清，肖友生，王 進

（廣西醫科大學第一附屬醫院神經內科，南寧 530021）

錳是人體必需的微量金屬元素，在各種生理過程的正常運作中發揮重要作用，但過量接觸錳可導致錳中毒。錳中毒的患者可產生類似帕金森病的癥狀，如精神障礙、認知功能障礙及運動障礙等[1]，這些典型癥狀的出現主要與神經元損傷有關。目前錳對神經細胞的詳細毒性機制尚不清楚。N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine，m6A）是存在于mRNA上的甲基化修飾，是目前最常見和最豐富的真核mRNA甲基化修飾類型之一[2]。目前m6A酶系統中有3 種酶蛋白：催化m6A 甲基化的“書寫器”（writers）、催化去甲基化的“擦除器”（erasers）和識別甲基化的“閱讀器”（readers）[3]。Writers是指m6A甲基轉移酶，主要作用是催化m6A 對mRNA 的修飾，包括甲基轉移酶3（methyltransferase-like 3，METTL3）、甲基轉移酶14（methyltransferase-like 14，METTL14）、Wilms腫瘤1合蛋白（Wilms′tumor1-associating protein，WTAP）等。而erasers 是將m6A 轉化為腺苷的去甲基化酶，在真核生物中包括脂肪與肥胖相關基因蛋白（fat mass and obesity-associated，FTO）和AlkB 同源蛋白5（Alk B homologue 5，ALKBH5）等[4]。近年來，m6A 甲基化在神經系統疾病中的作用受到越來越多的關注，但m6A甲基化是否在錳中毒中發揮作用尚未見相關報道。本研究擬建立慢性錳中毒小鼠模型，檢測m6A甲基化及其相關因子在錳中毒小鼠黑質中的表達變化，為m6A甲基化在錳中毒中的研究提供依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及處理 實驗動物選用成年清潔級雄性昆明小鼠28只，體重（30～35）g，由廣西醫科大學實驗動物中心提供。實驗動物生產許可證號：SCXK 桂2020-0003，實驗動物使用許可證號：SYXK 桂2020-0004。本動物實驗已獲得廣西醫科大學實驗動物倫理委員會批準，審批號：202011011，嚴格遵循“3R 原則”進行。……