鼻咽癌細胞體外誘導腫瘤相關成纖維細胞形成并上調NNMT表達*

楊雨嘉，姚 茜,2，霍慧敏，崔 昆，姚小暄,，黃中恒,，唐錦平,，劉春磊,，韋正波，謝 瑩,2△

（1.廣西醫科大學生命科學研究院，南寧 530021；2.廣西區域性高發腫瘤早期防治研究教育部重點實驗室，南寧 530021；3.廣西醫科大學附屬腫瘤醫院，南寧 530021）

鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）是起源于鼻咽上皮細胞且在中國南方地區高發的惡性腫瘤，淋巴結轉移是其早期主要臨床表現[1]。自1889 年Steven Pegat 提出腫瘤微環境（tumor microenvironment，TME）學說以來，TME 與腫瘤發生、發展的關系越來越受關注[2-3]。TME包括腫瘤細胞、基質細胞如腫瘤相關內皮細胞（tumor-associated endothelial cells，TECs）、腫瘤相關成纖維細胞（cancerassociated fibroblasts，CAFs）、腫瘤相關巨噬細胞（tumor-associated macrophages，TAMs）等細胞成分及多種非細胞成分。其中CAFs 作為TME 中最重要的基質細胞之一，通過直接接觸、旁分泌、重塑細胞外基質、誘導血管形成等方式對腫瘤細胞增殖、遷移和侵襲起到營養支持和促進作用[4-5]。

煙酰胺-N-甲基轉移酶（nicotinamide N-methyltransferase，NNMT）編碼基因位于人類11 號染色體上（11q23.1），有3個外顯子和2個內含子，轉錄位點跨度約為16.7 kb，產生包含1 578 個堿基對的mRNA和264個氨基酸的蛋白質。單細胞測序結果顯示，NNMT 在成纖維細胞和腫瘤細胞中呈高表達，被普遍認為是一種腫瘤相關代謝酶，可改變多種腫瘤細胞的代謝途徑，顯著促進腫瘤細胞增殖、遷移和侵襲[6-8]。另有最新研究報道，NNMT在CAFs中呈高度表達，可能是CAFs活化的關鍵蛋白，敲低CAFs 中NNMT 表達后，α-平滑肌肌動蛋白（αsmooth muscle actin，α-SMA）表達下調[9]。本研究擬通過條件培養基（condition medium，CM）和Transwell小室共培養模式，將人胚肺成纖維細胞MRC-5與NPC 細胞系5-8F 共培養后誘導MRC-5 向CAFs轉化，檢測NNMT及成纖維細胞生物標志物的表達情況和細胞增殖能力；同時分離純化頭頸腫瘤來源CAFs，驗證相關標志物表達，探討NNMT 與CAFs的相關性。……