血清神經元特異性烯醇化酶、組織多肽抗原、胃泌素釋放肽前體對非小細胞肺癌的診斷價值研究

劉 穎 任中海 張英麗

流行病學報道分析發現，非小細胞肺癌(NSCLC)的發病率可超過850/10萬人左右[1]。臨床上NSCLC的發生能夠導致患者呼吸功能的顯著惡化，增加了肺癌患者遠期病死和致殘的風險[2]。臨床上通過對于NSCLC的早期非創傷性檢測，能夠為疾病的早期診斷提供依據。血清腫瘤調控蛋白的檢測，能夠為惡性腫瘤的診斷提供參考。神經元特異性烯醇化酶(NSE)是癌細胞骨戒結構蛋白，其能夠在癌細胞異常分裂的過程中顯著釋放[3]；組織多肽抗原(TPA)是癌細胞膜糖蛋白成分，其能夠翻譯癌細胞的持續性自我擴增狀態，反應癌細胞的異常凋亡分解速度[4]；泌素釋放肽前體(ProGRP)不僅能夠影響到胃腸道激素的分泌，同時還能夠影響到癌細胞的增殖轉錄調控過程[5]。為了揭示NSE、ProGRP、TPA在肺癌患者中的表達情況，從而為臨床上肺癌的診斷提供參考，本次研究選取2018年8月～2020年5月本院經病理學檢查確診的74例NSCLC患者，探討了NSE、ProGRP、TPA的表達情況及其診斷學價值。

1 材料與方法

1.1 對象

收集我院在2018年8月～2020年5月期間經病理學檢查確診的74例NSCLC患者(NSCLC組)、選取同期在體檢中心獲取的60例健康成年人作為志愿者(對照組)。其中NSCLC組，年齡41～75歲，平均年齡(63.0±9.4)歲；性別：男性40例，女性34例；TNM分期：Ⅰ期18例、Ⅱ期22例、Ⅲ期26例、Ⅳ期8例；腫瘤直徑≥3 cm 31例、<3 cm 43例。對照組60例，年齡40～75歲，平均年齡(60.8±10.4)歲；性別：男性31例，女性29例。二組研究對象在上述的一般資料方面進行比較，無統計學差異(P>0.05)。

1.2 納入及排除標準

診斷標準：NSCLC患者診斷標準參考中華醫學會制定的標準[6]；納入標準：①患者年齡在19～75歲以內；②經胸部CT、MRI檢查及病理學檢查確診，病理學類型為腺癌或者鱗癌；③既往未接受放化療、免疫學治療；④對照組來源于本院體檢中心結果健康的自愿者；⑤本研究符合《赫爾透辛基宣言》相關醫學倫理規定。排除標準：①合并嚴重肺部疾病等；②長期使用糖皮質激素或免疫抑制劑者；③其他部位感染及其他系統的重大疾病；④類風濕性疾病、免疫系統疾病患者。

1.3 檢測方法

采用患者靜脈血離心后取其上清液放入空白孔中，加入稀釋液、孵育、清洗等處理后，再加入TMB顯色底液(品牌：YSRIBIO ，由湖州英創生物科技公司生產)、孵育后，倒入終止液3 min內檢測OD450值，BioTek酶標儀購由美國伯騰儀器有限公司生產。

1.4 統計分析

2 結果

2.1 NSCLC組和對照組血清NSE、ProGRP、TPA水平比較

NSCLC組患者血清NSE、ProGRP、TPA水平均高于對照組，均具有統計學差異(P<0.05)；見表1。

表1 兩組血清NSE、ProGRP、TPA水平比較

2.2 血清NSE、ProGRP、TPA水平檢測診斷NSCLC的價值

血清NSE診斷NSCLC的靈敏度為34.82%、特異度為81.66%、ROC曲線下面積AUC值為0.623；血清ProGRP診斷NSCLC的靈敏度為42.74%、特異度為84.09%、ROC曲線下面積AUC值為0.668；血清TPA診斷NSCLC的靈敏度為51.28%、特異度為89.63%、ROC曲線下面積AUC值為0.704；血清NSE、ProGRP、TPA水平聯合診斷NSCLC的靈敏度為93.20%、特異度為83.87%、ROC曲線下面積AUC值為0.879；見表2、圖1。

表2 血清NSE、ProGRP、TPA水平檢測對NSCLC的診斷價值

圖1 血清NSE、ProGRP、TPA水平檢測診斷NSCLC的ROC曲線

3 討論

NSCLC具有較高的總體發病率，其在不同類型的肺癌患者中，NSCLC的發病比例較高，其遠期病死的風險也明顯上升[7]。臨床觀察發現，NSCLC患者的生存預后惡化較為明顯，多數NSCLC患者臨床確診時已處于疾病的中晚期[8]。而通過早期診斷NSCLC，能夠為臨床上NSCLC的根治性手術治療提供契機，從而改善NSCLC患者的整體臨床預后。現階段影像學檢查雖然能夠在NSCLC的診斷過程中發揮作用，但依靠胸部CT等檢查診斷NSCLC的靈敏度較低，其對于早期NSCLC診斷的可靠性仍然存在一定的局限。血清學方面的腫瘤指標，能夠發揮其定量化和檢測便捷的特點，在惡性腫瘤的早期篩查和診斷過程中具有重要輔助參考價值。雖然癌胚抗原或者糖鏈蛋白能夠在NSCLC的診斷中發揮作用，但依靠癌胚抗原或者糖鏈蛋白診斷NSCLC的假陽性率仍然較高[7]。本次研究通過對于NSCLC患者血清中NSE、ProGRP、TPA的表達分析研究，能夠為臨床上肺癌的診斷提供新的研究指標。

NSE是神經特異性烯醇化酶，其主要表達于神經組織、間質成分等中，在癌細胞異常分裂的過程中，癌細胞內骨架結構蛋白的分解，能夠顯著促進NSE的釋放[9]；ProGRP是胃泌素釋放前體物質，其對于腫瘤細胞增殖調控的影響，能夠提高上皮來源惡性腫瘤細胞的DNA分裂速度。相關分子生物學的研究還認為，ProGRP對于腫瘤細胞生物學行為的改變，能夠提高中晚期腫瘤細胞的浸潤轉移風險[10-11]；TPA是組織多肽抗原，其能夠在腫瘤細胞膜破碎的過程中顯著釋放，并能夠反應癌細胞的增殖活躍狀態[12]。

本次研究通過對于NSCLC患者血清中NSE、ProGRP、TPA的表達分析可見，在肺癌病例組患者血清中，NSE、ProGRP、TPA的表達濃度明顯上升，高于健康對照成年組，統計學差異顯著，表明NSE、ProGRP、TPA的高表達均能夠影響到肺癌的病情進展過程。NSE、ProGRP、TPA的高表達，主要考慮由于癌細胞增殖活性的增強、癌細胞浸潤行為的惡化及癌細胞核DNA的異常分裂等有關，多種病理性途徑的激活，最終均能夠促進NSE、ProGRP、TPA的表達釋放。其他研究也表明，NSE的表達濃度在肺癌患者血清中可隨著患者病情的惡化而顯著升高，如果合并有遠處轉移或者遠期復發傾向的患者，其NSE的表達濃度均明顯升高[13,14]。診斷學方面的分析可見，NSE、ProGRP、TPA在單獨診斷肺癌的過程中均具有一定的價值，NSE、ProGRP、TPA指標超過血清中檢測臨界值時，其診斷NSCLC的靈敏度雖然較低，但其診斷的特異度可超過70%以上，可靠性較為明顯。但單獨NSE、ProGRP、TPA檢測的靈敏度較低，其原因主要由于單一的指標檢測，難以對于不同類型來源的NSCLC均具有較高的特異性標志作用。而通過聯合NSE、ProGRP、TPA進行檢測，可以發現其診斷的靈敏度可超過90%以上，診斷的特異度也有所上升，提示了聯合檢測的現實參考意義。這主要由于聯合不同指標進行檢測，能夠避免單一指標個體表達差異導致的診斷效能的下降。但有研究者認為，通過NSE、ProGRP等指標聯合診斷，其診斷NSCLC的靈敏度仍然不超過50%[15-16]，不同的研究之間數據差別較大，考慮由于入組病例數量及檢測方式的不同有關。

綜上所述，在NSCLC患者血清中，NSE、ProGRP、TPA的表達濃度明顯上升，同時NSE、ProGRP、TPA在聯合檢測的過程中，其可以顯著提高NSCLC的診斷效能。本次研究的現實意義在于探討了NSE、ProGRP、TPA的具體診斷臨界值。