胃癌組織中胎盤特異性基因1在不同部位的表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系

王 磊 辛小敏 閆小燕 王秀敏

胃癌是臨床常見的消化道惡性腫瘤，其發(fā)病率和死亡率均居高不下，是全球第四大癌癥，但80%患者就診時已處于中晚期，診療效果較差，5年總生存率僅約30%[1-3]。胎盤特異性基因1(placenta-specific 1，PLAC1)為癌-睪丸抗原(CT抗原)家族中的一員，在生殖細(xì)胞或胎盤滋養(yǎng)層組織等正常組織中表達(dá)，在腫瘤組織中普遍高表達(dá)[4-5]。研究報道PLAC1在胃癌中高度表達(dá)，并影響患者預(yù)后[6]。有研究表達(dá)，PLAC1在乳腺癌、肝癌和肺癌等腫瘤中具有促癌作用，但是在胃癌中的作用機制仍不清楚[7-8]。在不同腫瘤組織中PLAC1的表達(dá)以及發(fā)揮的功能可能不同，因此，本研究探討胃癌組織中不同部位PLAC1表達(dá)與臨床病理特征以及預(yù)后的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2020年1月本院收治的胃癌患者68例，年齡18～69歲，平均(57.32 ±7.64)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《胃癌規(guī)范化診療指南(試行)》[9]中關(guān)于胃癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，患者經(jīng)病理檢查確診為胃癌； ②行根治術(shù)或姑息術(shù)切除腫瘤，且術(shù)前未接受過放化療、免疫治療患者；③所有患者病理組織均可進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測； ④患者簽署自愿受試同意書，患者及其家屬需簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他器官嚴(yán)重性病變患者 ；②合并其他惡性腫瘤患者。

1.2 免疫組化法檢測PLAC1表達(dá)

將包埋制作好的組織芯片蠟塊切成3～5 μm的薄片，烘片后置于二甲苯中20 min，經(jīng)無水乙醇、90%、80%、70%梯度乙醇清洗，ddH2O清洗后，3%H2O2溶液浸泡，PBS浸泡后加封閉液37℃封閉1 h。PBS浸泡后加一抗，4℃孵育過夜。PBS浸泡后加二抗，室溫孵育1 h，PBS浸泡清洗后加DAB顯色。ddH2O漂洗后蘇木精襯染后自來水沖洗玻片，65℃烘干后中性樹膠封固。結(jié)果判定：采用雙盲法閱片。在低倍鏡(100×)、高倍鏡(400×)下觀察癌周與癌巢部位染色強度，細(xì)胞核呈棕黃色顆粒為陽性。根據(jù)陽性細(xì)胞百分比計分：無陽性細(xì)胞數(shù)為0分、<10%為1分、10%～50%為2分、>50%為3分，其中0～1分為低表達(dá)，2～3分為高表達(dá)。

1.3 隨訪

采用電話或門診的方式進(jìn)行隨訪，隨訪截止日期為2021年1月，總生存期(OS)定義為從腫瘤確診至隨訪截止日期或死亡時間。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 胃癌中PLAC1在癌周和癌巢組織中的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

PLAC1在癌周組織中高表達(dá)率為41.18%(28/68),在癌巢組織中高表達(dá)率為47.06%(32/68)。胃癌中PLAC1在癌周組織中的表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤分期、淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等臨床病理特征均無關(guān)(P>0.05)；胃癌中PLAC1在癌巢組織中的高表達(dá)與腫瘤最大直徑有關(guān)(P<0.05)，與其他病理特征無關(guān)(P>0.05)，見表1。

表1 胃癌中PLAC1在癌周和癌巢表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系/例

2.2 PLAC1表達(dá)與患者生存預(yù)后的相關(guān)性

Kaplan-Meier生存分析結(jié)果顯示：癌周PLAC1表達(dá)與患者生存呈負(fù)相關(guān)(P=0.034)，即高表達(dá)的患者的生存期更差，癌巢PLAC1表達(dá)與患者生存無顯著相關(guān)性(P=0.395)，見圖1。

圖1 PLAC1 在癌周和癌巢表達(dá)與患者生存分析

2.3 影響胃癌患者預(yù)后的單因素分析

截止到2021年1月，68例患者中生存38例，死亡30例。

單因素分析發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、癌周PLAC1表達(dá)是影響胃癌預(yù)后的因素(P<0.05)，見表 2。

表2 影響胃癌患者預(yù)后的單因素分析/例

2.4 影響胃癌患者預(yù)后的多因素分析

多因素分析顯示淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、癌周PLAC1表達(dá)是影響胃癌預(yù)后的獨立危險因素，見表3。

表3 影響胃癌患者預(yù)后的多因素分析

3 討論

胃癌是常見的消化道惡性腫瘤，發(fā)生率與死亡率分別位居全球第5位與第3位[10]。我國胃癌發(fā)病率與死亡率僅次于肺癌，居第2位，多數(shù)患者因中晚期胃癌就診[11-12]。胃癌的主要臨床表現(xiàn)為遠(yuǎn)期生存狀況低下、臨床治療效果差，且具有易復(fù)發(fā)、易轉(zhuǎn)移的特點[13]。盡管近年來晚期胃癌患者手術(shù)及放化療方案不斷發(fā)展，但是5年生存率仍然較低[14]。雖然針對表皮生長因子受體、c-met等藥物正在進(jìn)行臨床試驗，但是胃癌的發(fā)生、發(fā)展是多因素、多步驟的復(fù)雜過程，其在胃癌中的應(yīng)用存在局限性[15-16]。另外關(guān)于胃癌發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)移的分子機制尚不清楚，因此探討胃癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)等過程的作用機制，尋找新的預(yù)后指標(biāo)是目前臨床研究亟待解決的問題。

PLAC1在正常組織中低表達(dá)，在多種腫瘤組織中高表達(dá)，因此PLAC1可作為腫瘤特異性抗原，有成為腫瘤治療靶點的潛力[17]。有研究報道PLAC1在胃癌組織中高表達(dá)，且高表達(dá)PLAC1患者預(yù)后差，且PLAC1表達(dá)與胃癌的腫瘤分期有關(guān)，分期越高PLAC1表達(dá)量越高[18]。本研究發(fā)現(xiàn)雖然癌巢組織中PLAC1的表達(dá)和患者的生存期不存在相關(guān)性，但與腫瘤大小有關(guān)，提示癌巢PLAC1高表達(dá)的患者中腫瘤最大直徑超過5 cm的患者更多、惡性程度更高。雖然胃癌中PLAC1在癌周表達(dá)與患者臨床病理特征均無關(guān)，但是癌周PLAC1表達(dá)與患者生存呈負(fù)相關(guān)，即高表達(dá)的患者的生存期更差，癌周PLAC1表達(dá)是影響胃癌預(yù)后的獨立危險因素，提示癌周PLAC1有潛力成為預(yù)測胃癌患者預(yù)后的生物標(biāo)志物，但其中具體作用機制尚不明確，潛在的原因還需進(jìn)一步試驗數(shù)據(jù)加以驗證。本研究并未發(fā)現(xiàn)PLAC1表達(dá)與胃癌腫瘤分期之間存在相關(guān)性，可能與樣本量偏少以及其他影響因素有關(guān)。

綜上所述，胃癌癌巢組織中PLAC1表達(dá)與腫瘤最大直徑有關(guān)，癌周組織PLAC1表達(dá)可作為預(yù)測胃癌患者預(yù)后的生物標(biāo)志物，具有臨床指導(dǎo)意義。但本研究由于是單中心研究，樣本量偏少，在研究結(jié)果上存在一定的局限性，因此需要更具前瞻性的大樣本量研究。