腹腔穿刺引流術通過激活Nrf-2/HO-1通路和抑制自噬減輕大鼠重癥急性胰腺炎

重癥急性胰腺炎(SAP)是一種以高發病率、高致死率為特征的消化系統疾病，目前發病機制尚不明確。主流觀點認為多種原因導致的胰腺自身消化可引起全身炎癥反應綜合征，進而誘發多器官功能衰竭，是導致患者死亡的主要原因。本課題組前期研究證實，引流SAP早期產生的胰源性腹水（PAAF）即行腹腔穿刺引流術（APD）可顯著降低重癥急性胰腺炎病人的全身炎癥反應，對重要臟器起到保護作用。然而APD減輕胰腺損傷的具體機制目前尚不完全明了。

既往研究表明，受損的自噬介導腺泡細胞空泡化及胰蛋白酶原的激活，是導致急性胰腺炎（AP）發生與惡化的重要因素，而APD與自噬間是否存在聯系尚未得到證實。核因子E2相關因子2(Nrf-2）作為內源性抗氧化通路的關鍵因子，通過Nrf-2/抗氧化反應元件（ARE）信號通路上調其下游的血紅素合酶-1（HO-1）、超氧化物歧化酶（SOD）等抗氧化酶的表達，在胰腺炎等炎癥性疾病中發揮重要的保護作用。同時，Nrf2/HO-1通路還參與自噬調節。因此，我們推測APD可以通過激活Nrf2/HO-1通路并改善腺泡細胞的自噬活動，從而成為早期治療SAP的重要手段。基于此，本實驗擬從影響SAP大鼠腺泡細胞內自噬及Nrf-2/HO-1信號通路的角度探討APD的治療機制，為APD的臨床應用提供證據，并為未來探索更多SAP治療手段提供新的思路。

1 材料和方法

1.1 實驗動物及試劑

SPF 級8～9 周齡雄性SD 大鼠32 只，體質量210～230 g，購自成都達碩動物科技有限公司；牛磺膽酸鈉、鋅原卟啉（ZnPP）（Sigma-Aldrich）；TNF-α、IL-1β酶聯免疫吸附檢測試劑盒（江萊生物）；Trizol、全蛋白/核蛋白提取試劑盒（索萊寶）；……