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過表達TrxR1重組HEK293細胞株的構建和鑒定

2022-05-06 07:19:50呂曉梅周知音黃慧丹劉曉平
南方醫科大學學報 2022年4期
關鍵詞:檢測

硫氧還蛋白還原酶1(TrxR1)屬于吡啶核苷酸二硫化物氧化還原酶家族,作為目前已知的唯一能夠還原硫氧還蛋白(Trx)的酶,TrxR1可以將氧化型的Trx還原成還原型Trx。還原型的Trx能夠還原多種蛋白的二硫鍵,進而調控細胞的多種生物進程,如細胞增殖、分化以及凋亡等等。

桁架平臺提升過程需分段進行,每提升10~15m進行一次檢查,須確保桁架平臺及電動施工升降平臺無異常狀況后方可繼續提升。

腫瘤細胞的代謝水平遠高于正常細胞,因而在細胞內會產生大量活性氧。因此,腫瘤細胞往往會通過誘導抗氧化酶的表達來維持自身的氧化還原穩態,而TrxR1是其中一種被誘導的抗氧化酶。近年來研究發現,TrxR1在多種腫瘤組織和細胞中高表達,如乳腺癌、胃癌、肺癌和腸癌等,并通過蛋白激酶B(PKB,又名AKT)、絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)及信號傳導及轉錄激活蛋白3(Stat3)等信號通路促進腫瘤細胞增殖、抑制凋亡及誘導耐藥,是一個理想的抗腫瘤藥物開發靶點。目前靶向TrxR1的藥物具有豐富的骨架結構,但尚無進入臨床使用的TrxR1靶向藥物,其中一大制約因素就是缺乏在藥物篩選早期可以快速準確評價藥物特異性的細胞模型。

我們在前期研究中發現,通過小干擾RNA(siRNA)降低腫瘤細胞中TrxR1的表達水平,可以協同增強TrxR1抑制劑的抗腫瘤及TrxR1酶抑制活性。該協同作用可以有效區分特異性TrxR1抑制劑和非特異性TrxR1抑制劑,但是短期干擾基因表達存在干擾時間短,影響因素多等缺點,很難用于快速高通量特異性TrxR1抑制劑篩選?!?br>

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