血清NPY水平與子宮內膜異位癥患者疼痛及焦慮、抑郁的相關性

章永平

[摘要] 目的 分析、探討血清神經肽Y（NPY）表達水平與子宮內膜異位癥（EMS）患者疼痛、焦慮和抑郁癥狀的相關性。方法 采集2018年1月至2020年12月江西省人民醫院病理診斷為子宮內膜異位癥患者108例的血清標本和健康對照者102例的血清標本，通過酶聯免疫吸附試驗（Elisa法）檢測血清NPY在研究組和對照組以及研究組不同疼痛程度組間的表達，同時探討血清NPY與EMS患者焦慮、抑郁的關系。結果 血清NPY在對照組中表達水平為（95.13±11.04）pg/ml，在研究組中表達水平為（147.80±21.83）pg/ml，差異有統計學意義（P<0.05）;EMS患者疼痛程度越強，血清NPY水平越高，疼痛亞組間兩兩比較，差異均有統計學意義（P<0.05）;EMS疼痛伴焦慮、抑郁者與對照組相比，血清NPY表達低，差異有統計學意義（P<0.05）。結論 血清NPY在EMS患者中高表達，其水平與EMS患者疼痛程度正相關，與EMS疼痛患者焦慮、抑郁程度負相關，表明NPY可能參與EMS的發病機制，其表達與EMS機體的情感障礙、應激狀態密切相關。

[關鍵詞] 神經肽Y;子宮內膜異位癥;疼痛;焦慮;抑郁

[中圖分類號] R711.71? ? ? ? ? [文獻標識碼] B? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2022）07-0051-04

Correlation between serum NPY level and pain， anxiety and depression in patients with endometriosis

ZHANG Yongping

Department of Gynecology， Jiangxi Provincial People′s Hospital， the First Affiliated Hospital of Nanchang Medical College，Nanchang? 330006， China

[Abstract] Objective To analyze the association between serum neuropeptide Y （NPY） expression and pain， anxiety， and depression in patients with endometriosis （EMS）. Methods Serum samples were collected from 108 patients with pathologically diagnosed endometriosis and 102 healthy subjects in Jiangxi Provincial People’s Hospital from January 2018 to December 2020. The enzyme linked immunosorbent assay （Elisa） method was used to detect the expression of serum NPY in the study group， the control group and the groups with different pain levels in the study group， and the relationship between serum NPY and anxiety and depression of patients in the study group was analyzed. Results The expression level of serum NPY was [95.13±11.04]pg/ml in the control group and [147.80±21.83]pg/ml in the study group， with a statistically significant difference （P<0.05）. The more severe the pain was in EMS patients， the higher the serum NPY level was， and statistically significant differences were observed between the pain subgroups （P<0.05）. The expression of serum NPY in patients with EMS pain accompanied by anxiety and depression was lower， with a statistically significant difference （P<0.05）. Conclusion Serum NPY is highly expressed in EMS patients， and its level is positively correlated with the degree of pain in EMS patients， but negatively correlated with anxiety and depression in EMS patients， suggesting that NPY may be involved in the occurrence and development of endometriosis， and its expression is closely related to the stress state of the body with endometriosis.

[Key words]Neuropeptide Y （NPY）; Endometriosis （EMS）; Pain; Anxiety; Depression

子宮內膜異位癥（endometriosis，EMS）是婦科常見病，多見于生育期女性，但其發生、發展機制仍不為世人所熟知。疼痛癥狀是折磨患者的頭號慢性殺手，因此EMS相關疼痛成為臨床研究亟待解決的問題。眾所周知，慢性疼痛疾病患者往往伴隨著心理障礙，因此，EMS患者經歷漫長的疼痛過程常伴有不同程度的心理障礙，臨床亦急需在解決子宮內膜異位癥疼痛的同時，治療其心理障礙。

肽類神經遞質中神經肽Y（neuropeptide Y，NPY）分布廣泛，可存在于機體各大系統的器官交感神經中，機體一旦發生應激反應，如亢奮、緊張等情緒波動，交感神經興奮將導致去甲腎上腺素（norepinephrine，NE）釋放，NE刺激交感神經立即高效合成NPY并釋放入血，NPY調控其相關受體完成機體指令發出的相應生理功能，最終參與機體應激器官的保護功能[1]。NPY在充血性心力衰竭、冠心病、糖尿病、原發性高血壓、神經、精神等多系統疾病的發生、發展過程中起到極其重要的作用。本文研究NPY在EMS患者的血清表達水平，以求證實其與EMS疼痛、焦慮、抑郁的相關性，進一步探討NPY可能參與EMS的疼痛機制與應激機制，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究對象為2018年1月至2020年12月江西省人民醫院108例EMS疼痛患者（研究組）及102名健康查體女性（對照組），問卷回收率100%，問卷調查前與患者及健康查體人員詳細解釋并征得對方自愿同意后簽署知情同意書。

問卷調查均在規定時間、場所內完成，由研究組成員協助完成一般情況調查表、簡化視覺模擬評分（visual analogue scale，VAS）（Cronbach′s ɑ=0.85）、自評焦慮量表（self-rating anxiety scale，SAS）（Cronbach′s ɑ=0.897）、自評抑郁量表（self-rating depression scale，SDS）（Cronbach′s ɑ=0.788）。根據一般情況調查表，研究組患者與對照組人員在年齡、文化程度（高中以上）、既往有無重大疾病史、心理疾病史比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。見表1。

VAS 0分為無痛組、1～3分為輕微痛組、4～6分為中等痛組、≥7分為重度疼痛組;SAS標準閾值設定為40分，40分以上為焦慮[2];SDS標準閾值設定為50分，50分以上為抑郁[3]。

問卷內容、目的及程序均經醫院醫學倫理委員會審批同意。問卷時長20～30 min，問卷全部真實、有效，結束后立即采集210人肘靜脈血5 ml，靜置15 min后取血清，放置離心機內2500 r/min離心15 min，移液槍吸取上清液后用eppendorf管封管，標記，凍存于-80℃冰箱中待用。

1.2 方法

NPY Elisa試劑盒由Cloud Clone Corp. USA公司生產（貨號CEA879Hu，批號L181012416），實驗耗材和儀器分別由江西省人民醫院病理實驗室、中心實驗室和PCR實驗室提供。

①碳酸鹽緩沖液加入抗體中逐漸稀釋，直至蛋白質含量為5 μg/ml左右，聚苯乙烯酶標板（Elisa Plate）96孔每個小孔中均加入100 μl，在恒溫冰箱中4℃過夜，第2天吸去孔內溶液，緩沖液沖洗3次。②每孔再加入200 μl封閉液，于37℃恒溫箱中孵育2 h后放入洗板機，洗滌3遍。經過生理鹽水稀釋的100 μl血清上清液樣品加至已經過處理的反應孔中，均以標準品孔和空白孔進行比對，然后再以陰性和陽性對照孔比對質控。③封板后再次放入恒溫箱中孵育2 h，洗滌3遍后加入抗體，并在每個孔中加入100 μl抗體稀釋液。⑥再次封板后又放入恒溫箱中孵育1 h，再次洗滌3遍后，在每個孔中加入100 μl酶反應稀釋液。⑦再次封板后放入恒溫箱避光孵育30 min，再次洗滌3遍后，恒溫箱內避光，在每個孔中加入100 μl TMB底物溶液，標準品孔經底物溶液稀釋后出現明顯色澤梯度為止。⑧每個反應孔中均加入100 μl 2M硫酸溶液，孔內顏色逐漸由藍變為黃。10 min內在酶標儀上，450 nm處以空白孔對照調零后，再測各孔OD值進行測定結果并逐一記錄。

1.3 觀察指標

根據標準品濃度和OD值設定NPY標準曲線作為觀察指標，再依據該標準曲線方程分別計算出樣本的濃度值，并一一記錄。

1.4 統計學方法

應用SPSS 19.0統計學軟件進行數據分析，P值均取雙側概率，α值均取0.05為檢驗水準。計量資料以均數±標準差（x±s）表示，采用t檢驗和F檢驗，如差異較顯著則采用LSD-t檢驗進行組間兩兩比較校正，計數資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 研究組和對照組血清NPY水平比較

研究組血清NPY水平表達明顯高于對照組（P<0.001），表明NPY可能參與EMS的發病機制。見表2。

2.2 不同疼痛程度的EMS患者血清NPY水平比較

根據VAS將研究組劃分為不同疼痛程度的4組（無痛組、輕微痛組、中等痛組、重度疼痛組），其4組間血清NPY水平比較，差異有統計學意義，重度疼痛組表達最高，無痛組表達最低，各組間兩兩比較，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表3。

2.3 研究組與對照組SAS、SDS評分比較，研究組血清NPY在不同焦慮、抑郁程度患者中的表達

研究組SAS評分顯著高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表4。按照SAS評分劃分標準，將研究組劃分為無焦慮組（n=49）和焦慮組（n=59），焦慮組與無焦慮組比較，血清NPY表達更低，差異有統計學意義（P<0.05）。見表5。

研究組SDS評分顯著高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表6。按照SDS評分劃分標準，將研究組劃分為無抑郁組（n=47）和抑郁組（n=61），抑郁組與無抑郁組比較，血清NPY表達更低，差異有統計學意義（P<0.05）。見表7。

3 討論

NPY作為神經肽家族中一員，廣泛存在于神經系統，是一種多效性因子，參與機體多項重要的生理功能，如影響細胞增殖、心血管和代謝功能和神經元興奮性[4]。研究最多、影響最廣的表現在以下幾個方面：血清NPY水平可以在心肌缺血缺氧或心肌梗死、高血壓等狀態下起伏明顯[5];慢性腎功能衰竭患者血清中NPY表達升高顯著[6];血清NPY還對胰島素分泌起調控作用，參與飲食、生長發育等內分泌的調控[7]。以上均與機體應激狀態關系密切。近年血清NPY與神經性疼痛的研究進展迅速，Fu等[8]報道了NPY作用于脊髓NPY Y1受體，抑制脊髓背角細胞內由外周神經損傷誘導，驅動慢性神經性疼痛的感覺和情感成分的信號通路，Sun等[9]研究發現表明，NPY基因可能在神經性疼痛中發揮重要作用，可能將來作為神經性疼痛的治療靶點。血清中NPY除了血小板釋放以外，大多數來源于支配部位的交感神經，交感神經受到外界刺激引起興奮產生NPY，釋放入血，因而NPY血清水平可從側面反映機體的應激狀態。本研究中血清NPY水平隨EMS疼痛及疼痛相關的焦慮、抑郁程度而變化，論證NPY與機體的應激狀態相關。

近些年較多文獻報道NPY與情感、心理的關系密切，NPY系統可能是神經保護或抗抑郁化合物的潛在治療靶點，尤其是Y2和Y5受體在神經系統疾病和精神疾病如抑郁癥中的神經保護作用[10]。動物實驗研究證實，海馬中NPY低表達的大鼠比正常表達的大鼠更傾向于情緒低落，NPY表達水平與情感障礙密切相關，由此推斷NPY低表達基因型人群同樣會表現出強烈的負面情緒[11]。但是，當機體長期處于應激狀態下，血清NPY水平會逐漸下調，從而出現情感障礙，由此可見血清NPY對機體應激反應起到重要的調控作用[12];研究還發現，NPY也可反作用降低下丘腦的生物學作用，從而反作用調低應激反應[13]。通過蛋白、基因等不同層面的實驗方法均證實NPY表達與抑郁程度密切相關[14]。更為有趣的是，焦慮和抑郁患者經治療癥狀明顯緩解后，血清NPY表達可上調至正常，表明NPY水平與焦慮、抑郁密切相關[15]，由此推斷NPY可成為抗抑郁藥研究熱點。那么NPY通過何種途徑起調控作用？有學者研究發現，血清NPY可能通過其受體Y1和/或Y2產生級聯效應，起到抗焦慮、抗抑郁和抑制癲癇的作用[16]。內源性NPY能夠起到調控機體應激狀態，那么外源性NPY是否亦有此功效呢？有研究將NPY注入大鼠海馬CA3區后，再注入外源性Y1受體可以起到較明顯致抗抑郁作用，而注入外源性Y2受體卻可增加抑郁[17]。受此啟發，實驗證明注射外源性NPY、Y1受體激動劑可明顯抗焦慮和（或）抑郁作用，而外源性NPY拮抗劑有明顯致焦慮或抑郁的作用[18]。由此可見，NPY通過調節其受體Y1、Y2來調控諸如焦慮、抑郁等情緒應激行為，NPY-Y1通路和NPY-Y2通路可能在應激狀態調控過程中分別擔任不同的作用[19]。為進一步了解Y1、Y2受體是協同還是拮抗作用，實驗人員通過情緒障礙動物模型得到驗證，NPY-Y1通路能夠明顯緩解動物的情緒焦慮和抑郁，而NPY-Y2通路則恰恰相反，由此斷定NPY-Y1通路和NPY-Y2通路在情緒調控方面是相反或拮抗作用[20]。當然也存在少數不同觀點，認為血清NPY水平并不能真實反映中樞神經系統（CNS）中的NPY水平表達，因而認定其與抑郁焦慮等心理障礙和應激狀態無明顯相關性[21]，有待于進一步驗證。綜合以上，大多數文獻認定NPY參與機體疼痛機制，參與機體調節焦慮、抑郁心理障礙機制。本研究結論與大多數文獻結論相一致，在EMS患者中NPY可能參與EMS疼痛、焦慮和抑郁機制。

本研究結果證實NPY在EMS患者血清中水平較健康人群高，表明其可能參與EMS的發生、發展;血清NPY與EMS疼痛程度表達一致，表明其與EMS疼痛密切相關;血清NPY與EMS疼痛相關的焦慮、抑郁程度表達一致，表明其與EMS疼痛相關的焦慮、抑郁密切相關。綜上所述，血清NPY與EMS疼痛相關的應激狀態密切相關，推測NPY可能與EMS發生、發展及疼痛機制、心理障礙密切相關，有可能成為EMS疼痛治療及心理治療的新靶點。

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（收稿日期：2021-06-07）