自身抗體及肝功能檢測在自身免疫性肝病與病毒性肝炎鑒別診斷中的價值

李 劇 花艷艷 韓亞男

（大連市公共衛生臨床中心(大連市第六人民醫院)，遼寧 大連 116031）

肝臟是人體中的重要器官，以代謝功能為主[1]。在人體中，肝臟能夠對肝糖進行儲存，起到氧化等多種作用，并且能夠將人體內、外的非營養物質進行生物轉化，包括藥物、毒物以及體內的不同代謝物質，并通過新陳代謝的方式徹底分解非營養物質，將其排出。肝臟在人體器官中較為脆弱，致病率較高，因此需要良好的肝臟保護[2]。通常正常肝臟的脂肪含量低，患者自身免疫力處于正常狀態下，其肝功能呈良好狀態[3]。而免疫性肝病主要是由于免疫力出現異常情況后，肝臟成為免疫攻擊的靶器官，對肝細胞造成損傷[4]。自身免疫性肝病是一種慢性進展性的炎癥類疾病，以自身免疫反應為介導。臨床上主要的疾病類型有自身免疫性肝炎，原發性膽汁性肝硬化，原發性硬化性膽管炎以及這三類疾病其中二者同時發病狀態下出現的重疊綜合征。按照其臨床發病率進行排序，自身免疫性肝炎的發病率最高。目前臨床上已經有大量的數據和臨床研究可以證實，自身免疫性肝病的疾病發展經常是與抗體發展相伴隨的，但是這些自身抗體的致病機制卻并未明確。而國內外大多數理論性研究的方向都集中在疾病的診斷和鑒別上，對于其治療過程中的發展情況研究甚少。自身免疫性肝病通常需通過抗原激活，病毒通常指HCV、HBV、EB病毒以及麻疹病毒，其也會引起相應的免疫反應，物理、生物、化學等因素也會引發自身的抗原改變[5]。病毒性肝炎是由于人體的肝臟部位受到病毒的感染進而導致肝細胞受損引起的肝功能的異常。部分患者疾病會呈現慢性化的發展趨勢，最后可能會發展成為肝硬化，極少數患者也有可能會發展成為肝癌。據相關調查顯示，我國屬于乙型肝炎大國，因為自身免疫性疾病在發病初期通常和病毒性肝炎癥狀有著較高的相似性，無法有效確診。但是自身免疫性肝病與病毒性肝炎的治療方法并不一致，基于此原因，對自身免疫性的肝病特異性進行準確且及時的監測，對自身抗體的診斷及治療有著至關重要的作用。目前，臨床上對自身免疫性肝病的診斷方法有很多，間接免疫熒光法、化學發光法、免疫印記條帶法都是較常使用的檢測方法。主要對患者的血清自身抗體以及肝功能進行檢測，因此，本次研究中選擇時間為2018年6月至2019年6月，我院收治的48例自身免疫性肝病患者作為研究對象，在自身免疫肝病與病毒性肝炎鑒別診斷中，探究自身抗體及肝功能檢測的診斷價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇醫院在2018年6月至2019年6月收治的48例自身免疫性肝病（AILD）患者為A組，其中自身免疫性肝炎（AIH）11例、原發性膽汁膽管炎（PBC）32例、原發性硬化性膽管炎（PSC）5例。48例病毒性肝炎患者為B組，其中慢性乙型肝炎（CHB）34例、慢性丙型肝炎（CHC）14例。診斷標準：自身免疫性肝炎符合2010年美國肝病學會制定的《自身免疫性肝炎診治指南要點》[6]；原發性膽汁膽管炎符合2009年美國肝病學會制定的PBC相關診斷標準[7-8]；原發性硬化性膽管炎經實驗室檢查結果與膽管造影結果綜合確診；慢性乙型肝炎符合《乙型病毒性肝炎診斷標準》[9]；慢性丙型肝炎符合《WS213-2018丙型肝炎診斷》[10]。納入標準：①本研究內所有A組患者均符合自身免疫性肝病的基本診斷標準。②A組所有患者同時伴隨有血清丙氨酸氨基轉移同工酶和天門冬氨酸氨基轉移酶的異常升高情況。③本研究內所有B組患者均符合臨床病毒性肝炎的相關診斷標準。④B組患者均伴隨有不同程度的食欲減退、惡心、上腹不適以及肝區疼痛的情況。⑤臨床資料完整，均知曉本次研究。⑥通過倫理委員會批準。⑦本研究內A組和B組患者均不存在嚴重的智力障礙和精神障礙。排除標準：①合并其他系統性疾病。②因其他原因造成的慢性肝損害，如新陳代謝異常性肝病、藥物性酒精性肝損害、遺傳代謝性肝病或肝內占位性病變。③研究中途退出本次研究的患者。其中，A組患者男25例，女23例，年齡在29～70歲，平均年齡為（49.50±20.50）歲；B組患者男27例，女21例，年齡在30～69歲，平均年齡為（49.50±19.50）歲。兩組患者的相關資料對比，差異無統計學意義（P＞0.05），可比較。

1.2 方法 兩組患者的自身抗體均通過間接免疫熒光法以及化學發光法進行檢測。其中，間接免疫熒光法通常用于檢測抗核抗體（ANA），抗體的滴度超過1∶100時，呈現陽性。可溶性酸性磷酸化核蛋白SP100抗體（SP100）、抗可溶性肝抗原抗體（SLA）、抗肝腎微粒體抗體1型（LKM-1）、血清抗核胞膜糖蛋白210抗體（GP210）、抗肝細胞溶質抗原1型抗體（LC-1）、抗線粒體抗體M2型（AMA-M2）則通過北京貝爾生物工程股份有限公司的全自動化學發光免疫分析儀Savi-180進行檢測。肝功能指標的檢測：抽取5 mL空腹靜脈血，經離心處理后，通過型號為德國 SIEMENS 2400的全自動生化儀對患者的肝功能指標進行檢測，包括天冬氨酸轉氨酶（AST）、丙氨酸轉氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、谷氨酰轉肽酶（GGT）、免疫球蛋白G（IgG）等。試劑來源：乙型肝炎病毒標志物購自雅培生物技術有限公司；肝病相關抗原基質、試劑以及相關抗體由歐蒙德國醫學實驗診斷有限公司提供。

1.3 統計學分析 采用SPSS 20.0統計學軟件對數據進行分析。計量資料采用（±s）表示，組間比較行t檢驗；計數資料采用[n（%）]表示，組間比較行χ2檢驗；P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者自身抗體陽性檢出率比較 A、B組的LKM-1與LC-1的檢查率對比，差異無統計學意義（P＞0.05），A組患者的SP100、GP210、AMA-M2、SLA、ANA均比B組高，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組患者自身抗體陽性檢出率比較[n（%）]

2.2 兩組患者肝功能有關指標比較 A組患者的AST、ALT、ALP、GGT、IgG肝功能水平均比B組高（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組患者肝功能指標比較（±s）

表2 兩組患者肝功能指標比較（±s）

2.3 兩組患者ANA熒光核型占比比較 A、B組熒光核型中均質型、顆粒型占比對比，差異有統計學意義（P＜0.05）；A組ANA熒光核型主要以均質型、核仁型為主，B組則以顆粒型為主。見表3。

表3 兩組患者ANA熒光核型占比比較[n（%）]

3 討 論

根據相關報道顯示，我國近些年肝臟疾病的發病率不斷增加，上升趨勢較為嚴重，這主要和我國廣大人民群眾的日常生活方式有著必然的聯系[11-12]。病毒性肝炎疾病主要是因為肝炎疾病所造成的一種傳染性疾病，此疾病的臨床癥狀體現在患者出現乏力、食欲缺乏、肝功能異常等多種癥狀上，如果不及時進行治療，部分患者會由于多種因素逐漸形成重癥肝炎[13-14]。重癥肝炎具有十分兇險的病情，對患者的身體健康造成嚴重的不利影響，具有極高的病死率，主要是因為肝昏迷、肝功能衰竭等癥狀發生。自身免疫性肝病通常是將肝臟作為特異性的免疫病理而造成器官損傷的自身免疫性的疾病[15-16]。在具體診斷過程中，此疾病主要是按照患者日常生活異常、自身抗體和肝組織特征進行。病毒性肝炎的主要治療類藥物為干擾素，誤診會嚴重影響患者的生命安全，嚴重耽誤藥物的治療療效，當前我國的病毒性肝炎診斷水平有了顯著的提升，國內、國外與自身免疫性肝病患病率的相關報道也逐漸呈上升趨勢，并受到廣泛的關注與重視。

自身免疫性疾病是患者自身機體對其抗原所表現出來的免疫反應，并會對自身的相關組織造成嚴重的損害[17-18]。總結來看就是人體機體對自身抗原引起免疫反應導致的一種疾病，屬于自身免疫性肝疾病。當機體自身免疫對肝臟進行侵犯后會出現炎性反應，通常會導致肝細胞以及膽管壞死等，則為自身免疫性肝病[19-20]。原發性膽汁性肝硬化、原發性硬化性膽管炎、自身免疫性肝炎等都是較常出現的類型。自身免疫性肝病在確診之后，根據患者的患病類型進行區分，自身免疫性肝炎患者通常使用免疫抑制和硫銼嘌呤激素療法進行治療，原發性膽汁性肝硬化患者通常采用熊去氧膽酸進行治療。原發性硬化性膽管炎通常可使用糖皮質激素或抗生素進行治療。但是，目前仍然未確定自身免疫性肝病的主要發病機制[21-22]。作為自身免疫性肝病，很多的患者在臨床上不會表現出明顯的特異性，多數的患者僅能診斷出肝功能的異常，因此自身免疫性肝病經常會被誤診為病毒性肝炎。根據相關學者研究發現，此疾病和其他疾病之間確實存在一定的必然聯系，其中就包括病毒性肝炎[23-24]。機體由于病毒的產生而出現感染，通過這一現象導致自身抗原的修飾，同時引起相應的免疫反應，對自身免疫系統造成破壞，加之該疾病的最初臨床表現通常與病毒性肝炎具有較強的相似性，這就會造成誤診[25]。但是治療自身免疫性肝病的方法是通過使用激素類免疫抑制劑進行治療，而病毒性肝炎的治療方法則截然不同，是選擇使用干擾素進行治療。不論基于何種原因，對自身免疫性肝病特異性進行準確且及時的檢測，對自身抗體的診斷有著至關重要的作用[26]。自身抗體主要是人體自身組織中的各個細胞，包括器官的抗體、細胞與細胞成分。人體血液在處于正常情況下存在滴度較低的自身抗體，當自身抗體滴度超過某水平，會嚴重影響人體的健康，使人體出現損傷，從而引發多種疾病。針對慢性肝病的不同類型，各個特征具有一定的相似性，也就是說，在血清中，和肝臟疾病有相關的免疫抗體。通常在不同的免疫性疾病中自身抗體以及ANA、ANA不會出現程度不同的陽性檢出率。

本研究結果顯示，A、B組的LKM-1與LC-1的檢查率對比，差異無統計學意義（P＞0.05），A組患者的SP100、GP210、AMA-M2、SLA、ANA、肝功能水平均比B組高（P＜0.05）。即ANA處于自身免疫性的肝病中，其陽性檢出率更高，可用于對病毒性肝炎以及自身免疫性肝病的鑒別與診斷中。另外，肝病的自身抗體SLA、SP100、AMA-M2、SLA均屬于對病毒性肝炎以及自身免疫性肝病進行鑒別的指標。本次研究中，LKM-1與LC-1的陽性檢出率均為0，表示LKM-1與LC-1無法對病毒性肝炎以及免疫性肝病進行有效的鑒別。除此之外，A組的肝功能相關指標均比B組高，表明肝功能能夠作為對病毒性肝炎及免疫性肝病進行輔助鑒別診斷的依據。本次研究結果與王憲紅和高志峰[24]的研究結果一致，說明免疫性肝病的ANA、AMA-M2、SLA均高于病毒性肝炎。

自身免疫性肝病核型在臨床上的分類較多，常見的類型有均質型、核膜型、顆粒型、著絲點型與核仁型等[25]。自身免疫性肝病核型在自身免疫性肝炎與病毒性肝炎疾病中具有明顯的差異[26]。病毒性肝炎患者的抗體主要以顆粒性為主，其次是均質型。而自身免疫性肝病患者的抗體主要以均質型為主，其次是核仁型。并且考慮到自身免疫性肝疾病本身是以肝臟為靶向器官的自身免疫性疾病，因此疾病出現后患者的部分生化指標會出現異常的情況，臨床上可以通過對患者指標的進一步檢查來準確辨別疾病類型，并配合抗體類型的判別完成區分。當前臨床上針對肝病患者進行抗體檢驗已經成為了自身免疫性肝病的初篩實驗，通過對抗體的集中檢測，能夠大大提升自身免疫性肝病的診斷準確率。

本研究通過對比A、B兩組ANA熒光核型中均質型、顆粒型占比，差異有統計學意義（P＜0.05）；且A組的ANA熒光核型中，均質型與核仁型占比較多，而B組則主要以顆粒型為主。這一結果提示，通過ANA熒光核型特征能夠有效鑒別與診斷自身免疫性肝炎與病毒性肝炎，自身免疫性肝病患者在ANA熒光核型中均質性和核仁型較多，這符合自身變異性肝病患者的相關診斷標準，而病毒性肝病患者的顆粒型較多，兩組數據對比明顯，在臨床上具有一定的指導意義。本次研究中研究對象均為住院患者，存在一定局限性，對研究結果可能存在一定影響，受到樣本例數和試驗場地的影響，本次的研究成果并不能作為最終結論進行處理，且本次研究為回顧性分析，臨床資料收集具有局限性，且并未對自身患者治療后自身抗體、肝功能檢測進行深入分析，將來仍需樣本數量更大，研究時間、隨訪時間更廣的研究進一步證實。目前臨床上對病毒性肝炎和免疫性肝病患者的鑒別和診斷研究并不是個例，但是從抗體以及患者的肝功能指標入手進行鑒別的相關研究數據仍然不多，相信未來伴隨著臨床診斷水平的不斷提升，免疫性肝炎與病毒性肝炎的誤診情況會不斷地下降，其診斷指標會更加細化，診斷相關標準也更為細致。

綜上所述，自身抗體以及肝功能指標的檢測在病毒性肝炎、免疫性肝病的鑒別及診斷中有著重要的意義。