基于網絡藥理學與實驗研究探討β-葡聚糖治療S180腹水瘤的作用機制

楊文卿，姜濤，程路峰*（. 新疆醫科大學藥學院，烏魯木齊 8300；. 新疆醫學動物模型研究重點實驗室，烏魯木齊 8300）

近年來，癌癥的發病率逐年升高[1]。有研究發現2018年全球新發癌癥人數達1810萬，我國占24%（約430萬）[2]。目前對于腫瘤的治療以免疫治療與靶向治療為主，但治療過程中易產生耐藥、副作用大等問題[3]。

天然多糖為結構多樣的生物大分子，從不同的植物、動物以及微生物中分離得到，在抗氧化[4]、抗凝血[5]、抗腫瘤[6]及刺激免疫[7]等方面表現出良好的活性。多種食用菌多糖已在體內外體現出明顯的抗腫瘤及免疫調節作用[8-9]。本研究利用網絡藥理學方法，以β-葡聚糖與腹水瘤作為研究對象，預測相關靶點及通路，并建立相關模型對其進行實驗驗證，以闡述其抗腫瘤的作用機制。

1 材料

1.1 軟件與數據庫

β-葡聚糖靶點的預測：Swiss Target Prediction數據庫（http：//www.swisstargetprediction.ch）；疾病靶點的獲取：Geen Cards數據庫（https：//www.genecards.org）；OMIM數據庫（https：//omim.org）。靶點間相互作用關系分析：String網站（https：//string-db.org）。相關關系圖的繪制：Draw Veen網站（http：//bioinfornatics.psb.ugent.be/webtools/Veen/）。互作網絡圖的繪制：Cytoscape 3.8.0軟件。相關通路分析：R Studio 3.6.3軟件。

1.2 細胞株與實驗動物

S180細胞（中喬新舟細胞庫）；C57小鼠，雌鼠體質量20～23 g；雄鼠體質量28～31 g，SPF級[新疆醫科大學實驗動物中心，合格證編號：SCXK（新）2018-0002]。

1.3 試藥

β-葡聚糖（S24487，上海源葉）；順 鉑（IC0440，索萊寶公司）；胎牛血清（FBS10099-141，Gibco）；RPMI1640培養基（AE29163439，Hyclone）；雙抗鏈霉素混液（Gibco）；二甲基亞砜（DMSO，Sigma）；小鼠白細胞介素（IL）-2、IL-4、IL-6、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、γ干擾素（IFN-γ）酶聯免疫吸附（ELISA）試劑盒（鈺博生物有限公司）。Bcl-2、Bax、Caspase-3、VEGF、JAK2、STAT3兔抗小鼠抗體（Abcam）；山羊抗兔二抗（Bioss，bs-40295G-HRP）。

1.4 儀器

光學顯微鏡、3-18K離心機（Sigma）；蛋白電泳儀及轉印儀（Bio-Rad）；凝膠圖像分析軟件。

2 方法

2.1 β-葡聚糖及腹水瘤疾病靶點預測

采用Swiss Target Prediction對β-葡聚糖作用靶點進行預測，使用Geen Cards與OMIM數據庫預測腹水瘤疾病靶點。……