全自動二維液相色譜法測定甲氨蝶呤血藥濃度及其臨床應(yīng)用

劉加濤，孫小珊，宋帥，蘇涌，夏泉（安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥劑科，合肥 230032）

甲氨蝶呤（MTX）是一種抗葉酸藥物，通過抑制葉酸生物合成中的關(guān)鍵酶二氫葉酸還原酶發(fā)揮活性，廣泛用于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、白血病、淋巴瘤、骨肉瘤等疾病。MTX血藥濃度升高可能導(dǎo)致MTX毒性風(fēng)險(xiǎn)增加，包括腎毒性、中樞神經(jīng)毒性、皮膚毒性、胃腸道毒性、血液學(xué)毒性、肝毒性和肺毒性，充分水化和堿化尿液可以減少這些不良反應(yīng)的發(fā)生率。MTX不良反應(yīng)的發(fā)生頻率和嚴(yán)重程度與給藥途徑和血藥濃度有關(guān)，大多數(shù)毒性作用與血藥濃度有關(guān)，并且如果能早期發(fā)現(xiàn)并進(jìn)行亞葉酸鈣解救治療通常是可逆的。MTX治療（尤其是高劑量時(shí)）的不良反應(yīng)發(fā)生率高，患者個體間的藥代動力學(xué)和藥效學(xué)變化大，需要對MTX進(jìn)行常規(guī)監(jiān)測，以指導(dǎo)亞葉酸類似物的解救治療方案，降低MTX毒性反應(yīng)。

MTX的監(jiān)測方法有多種，早期的分析方法雖然靈敏度高，但是耗時(shí)耗力并要求使用放射性同位素；而使用抗體的生物分析方法，如放射免疫分析、熒光偏振免疫分析和酶放大免疫測定法，雖具有操作簡單、檢測速度快和成本低等多種優(yōu)勢，但由于MTX與其代謝物之間潛在的抗體交叉反應(yīng)，導(dǎo)致結(jié)果的準(zhǔn)確性和特異性降低。此外，采用串聯(lián)質(zhì)譜（MS-MS）檢測MTX的方法雖具有靈敏度高、準(zhǔn)確性好等優(yōu)點(diǎn)，但質(zhì)譜相關(guān)設(shè)施昂貴，操作要求較高，醫(yī)院難以常規(guī)配備。因此，本研究旨在建立一種簡單、快速、特異、靈敏的MTX血藥濃度測定的全自動二維高效液相色譜（2D-LC）法，并在使用MTX治療的患者的常規(guī)藥物濃度監(jiān)測中進(jìn)行初步驗(yàn)證。……