發汗續斷中真菌群落的組成分析及其對川續斷皂苷Ⅵ積累的影響

周太敏，何華，徐嬌，江維克，潘琪，張成剛，周濤（貴州中醫藥大學，貴陽 550025）

中藥材續斷來源于川續斷科植物川續斷

Dipsacus asper

Wall. ex Henry的干燥根，具有補肝腎、強筋骨、續折傷等功效。川續斷皂苷Ⅵ是續斷藥材質量評價的指標成分，現代藥理研究表明其能預防骨質疏松、鎮痛。2020年版《中國藥典》規定續斷藥材需進行發汗加工。已有研究結果表明，續斷經發汗加工后，川續斷皂苷Ⅵ的含量會顯著升高，但是其對應的機制尚不清楚。研究表明，真菌在促進萜類、生物堿類等中藥活性成分的轉化及積累中發揮作用，可以用于提高中藥活性成分的含量，其對應的機制主要包括提供底物轉化的關鍵酶以及作為誘導子激發特定次級代謝產物的合成。趙慧在厚樸發汗的研究中發現，不同發汗階段的厚樸中內生真菌的數量存在差異，而內生真菌會對厚樸次級代謝產物的形成具有一定影響。

基于上述研究背景，推測續斷發汗后藥材中川續斷皂苷Ⅵ含量的變化與其真菌群落的構成有一定關系。因此，本研究在前期建立的續斷發汗條件的基礎上，對續斷發汗前后藥材中的真菌群落進行高通量測序，分析發汗前后續斷中的真菌群落差異，篩選出發汗續斷中的優勢菌，將優勢菌制備成誘導子與川續斷無菌苗共培養，探討優勢菌對發汗藥材中川續斷皂苷Ⅵ含量變化的影響，為解析中藥材發汗加工的科學內涵奠定理論基礎。

1 材料

1.1 試藥

新鮮川續斷、川續斷成熟種子采于貴州省龍里縣，經貴州中醫藥大學江維克教授鑒定為川續斷科植物川續斷

Dipsacus asper