血清人附睪蛋白4在多囊卵巢綜合征患者妊娠早期的表達及與不良妊娠結局的關系

賀春燕 黃偉 周鋒 馮光勇 王進

多囊卵巢綜合征(polycystic ovary syndrome)是育齡期女性常見的內分泌紊亂疾病，發病率為6%～15%[1]。臨床表現為慢性無排卵、高雄激素血癥、痤瘡、不孕、多毛、月經異常、卵巢多囊樣變等，嚴重影響到育齡期女性的身心健康。另有研究顯示，多囊卵巢綜合征與代謝紊亂有關，是妊娠期糖尿病、妊娠期高血壓綜合征、動脈粥樣硬化的獨立危險因素[2]。由于該病的臨床表現呈多樣性且具有高度異質性，造成臨床診斷較為困難。目前多囊卵巢綜合征的診斷標準[3]是2003年歐洲生殖和胚胎醫學會與美國生殖醫學會提出的鹿特丹共識，但該共識采用的卵巢彩色超聲、雄激素水平檢測臨床差異性較大，加之早期癥狀不顯著，因此診斷價值不高。人附睪蛋白4(HE4)屬乳清酸性4-二硫化中心WFDC蛋白家族，是一種分泌蛋白，具有胰蛋白酶抑制劑特性，在生殖系統、呼吸系統和卵巢組織中均有不同程度表達[4]。研究發現HE4參與了多種疾病病理發生與發展過程[5]。本研究分析血清HE4在多囊卵巢綜合征患者妊娠早期表達水平及不良妊娠的可能關系，旨在為臨床診斷及預防提供參考。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年4月至2021年4月我院內分泌科收治的103例多囊卵巢綜合征患者103例，年齡24～32歲，平均年齡(25.13±5.06)歲；其中月經異常80例，肥胖45例，卵巢多囊病變92例，高雄激素表現54例。納入標準[6]：(1)入選患者均符合2003年鹿特丹共識的相關診斷標準；(2)超聲提示卵巢呈多囊性變化，具有高雄激素表現；(3)年齡≥18歲；(4)患者或家屬知曉本次研究，并簽署知情同意書；(5)經醫院倫理委員會審核并批準。排除標準：(1)近3個月應用激素類、調脂降糖類藥物治療者；(2)由于免疫、遺傳、有害物質接觸所致的不良妊娠結局者；(3)肝腎功能不全者；(4)合并嚴重慢性基礎性疾病者；(5)惡性腫瘤及全身感染性疾病。同期選取健康體檢80例健康女性為對照組，年齡23～38歲，平均年齡(26.18±3.35)歲，排除高血壓、胰島素抵抗、高血脂癥、糖尿病等原發性疾病。

1.2 方法

1.2.1 資料收集:查閱2組研究對象臨床資料，采集年齡、BMI、SBP、DBP等一般臨床資料。

1.2.2 血清學指標檢測:采集2組研究對象清晨空腹肘靜脈血5 ml，以3 000 r/min高速離心15 min(離心半徑800×g)，靜析后提取上層血清，置于-80℃冰箱內備用。檢測儀器為美國雅培i2000全自動化學發光分析儀，采用化學發光微粒子免疫反應法檢測血清HE4水平、空腹血糖(FPG)、空腹胰島素(FINS)，相關試劑盒購自上海酶聯免疫生物科技有限公司，試驗操作嚴格按照試劑盒說明書執行；并根據穩態模型評估法計算胰島素抵抗指數(HOMA-IR)：HOMA-IR=FPG×FINS/22.5。

2 結果

2.1 2組研究對象一般資料比較 2組研究對象年齡、BMI、SBP、DBP比較差異無統計學意義(P>0.05)；PCOS組的血清HE4、FPG、FINS、HOMA-IR顯著高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組研究對象一般資料比較

2.2 影響多囊卵巢綜合征的多因素Logistic回歸分析 Logistic回歸分析顯示，HE4(95%CI為0.867～0.957)、FINS(95%CI為0.228～0.562)、HOMA-IR(95%CI為0.002～0.110)是影響多囊卵巢綜合征的獨立危險因素，FPG不是獨立影響因素(95%CI為0.583～39.098，P=0.072)(P均<0.05)。見表2。

表2 影響多囊卵巢綜合征的多因素Logistic回歸分析

2.3 血清HE4對多囊卵巢綜合征的診斷價值 血清HE4對多囊卵巢綜合征和對照組的AUC為0.838(95%CI 0.781～0.895)，根據最大約登指數(0.549)確定最佳界值為110.09 ng/ml，敏感性為61.17%，特異性為93.75%，差異有統計學意義(Z=11.629,P<0.01)。見圖1。

圖1 血清HE4對多囊卵巢綜合征的診斷效能

2.4 多囊卵巢綜合征患者血清HE4表達與FINS、HOMA-IR的相關性分析 相關性分析顯示，多囊卵巢綜合征患者血清HE4表達與FINS、HOMA-IR呈顯著正相關關系(P<0.05)。見表3，圖2。

圖2 多囊卵巢綜合征患者血清HE4表達與FINS、HOMA-IR的相關性分析

表3 多囊卵巢綜合征患者血清HE4表達與FINS、HOMA-IR的相關性分析

2.5 血清HE4表達水平對多囊卵巢綜合征患者的不良妊娠結局比較 根據PCOS組血清HE4表達水平中位數(119.19 ng/ml)，將患者分為高水平組50例和低水平組53例。高水平組在產后出血、前置胎盤、胎兒窘迫、胎兒生長受限、巨大兒、自然流產、圍生期死亡等不良妊娠結局發生率明顯高于低水平組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 血清HE4表達水平對孕婦的不良妊娠結局比較 例(%)

3 討論

多囊卵巢綜合征是育齡期女性常見的內分泌病變之一，以糖脂代謝異常、卵泡發育不成熟、排卵異常、胰島素抵抗的主要特征表現[7]。由于多囊卵巢綜合征復雜性和個體差異性，臨床表現呈多樣性，有關病理生理的改變是臨床研究的難點，給臨床診斷和鑒別帶來困難。研究證實PCOS發病與細胞代謝、細胞增殖及基因表達調控相關[8]。

HE4作為一種分泌型蛋白，基因位于人類基因組染色體20q12-13.1分，包含有兩個WFDC結構域的一條單鏈。研究發現HE4主要分布于輸卵管上皮、子宮內膜和輸精管上皮等生殖系統上皮組織中，參與細胞增殖和免疫調節的作用[9]。隨著對HE4的研究深入和臨床診療的應用不斷增加，HE4在機體組織內生物學功能引起越來越多的相關學者關注。已有研究發現HE4作為新型生物標志物在多種疾病中均有不同程度表達，推測可能在疾病早期診斷、鑒別、風險評估中發揮至關重要作用[10]。

基因芯片和免疫組化研究證實人體正常卵巢組織中HE4呈低水平表達，而在疾病狀態下表達均升高[11]。徐靜等[12]HE4在PCOS患者血清中明顯上調，表明HE4在調控生殖細胞代謝和免疫調節方面發揮重要作用。研究表明HE4在子宮內膜癌、卵巢癌的早期階段具有較好的敏感性和特異性，以作為早期篩查的生物學指標[13]。研究證實多囊卵巢綜合征患者也同樣存在HE4基因擴增和蛋白高表達，且在血清中顯著升高[14]。本研究結果表明多囊卵巢綜合征患者血清HE4含量明顯高于對照組，推測HE4可能與多囊卵巢綜合征的發病有關，提示HE4可利于疾病的診斷，有望成為多囊卵巢綜合征的血清生物標志物之一。本研究中ROC曲線分析顯示，血清HE4對多囊卵巢綜合征的診斷曲線下面積為0.838，敏感性為61.17%，特異性為93.75%，表明血清HE4對多囊卵巢綜合征具有較高的診斷價值。

研究證實血清HE4表達在間皮瘤、子宮內膜癌、卵巢癌等多種惡性腫瘤中的變化同疾病進展呈正相關，表明通過連續監測血清HE4水平可評估疾病病情進展[15]。本研究結果進一步發現，多囊卵巢綜合征患者血清HE4表達與FINS、HOMA-IR呈顯著正相關，提示血清HE4表達水平在多囊卵巢綜合征病情進展中發揮重要作用。多囊卵巢綜合征患者可通過促排卵治療來提高受孕的概率，但成功妊娠的多囊卵巢綜合征患者妊娠后流產率達30%以上。相關報道稱多囊卵巢綜合征孕婦的不良妊娠結局可能與胰島素抵抗、糖脂代謝異常有關[16,17]。本研究結果表明，隨著多囊卵巢綜合征患者血清HE4水平升高，孕婦發生糖尿病風險增大，高血糖狀態會刺激母體處于高胰島素抵抗狀態，影響組織血供，引起胎盤血管收縮，導致生長受限、胎兒宮內缺氧缺血等不良結局。

綜上所述，血清HE4在多囊卵巢綜合征疾病進展中發揮重要作用，且水平與不良妊娠結局有關，可作為預測多囊卵巢綜合征和不良妊娠結局的血清標志物。