德谷胰島素聯合GLP-1 RAs對2型糖尿病患者Omentin-1、VaspinRBP4水平的影響

趙傳志 陳鳳玲

2型糖尿病是成年人常見的糖尿病類型，該疾病是由體內胰島素分泌不足或人體不能有效利用胰島素等多種原因造成的，從而引起血糖水平升高[1]。高血糖環境下，會使大血管、微血管、神經等疾病發生病變，進而使心臟、腎臟、眼睛等器官損害[2]。遺傳、年齡、種族、生活方式等因素都可導致2型糖尿病，到目前為止，我們還無法控制人體內的遺傳因素[3]。然而，我們可以通過干預環境因素來降低2型糖尿病的患病率。高熱量攝入和不合理的飲食結構會引起肥胖，隨體重的上升，體育鍛煉的減少，應激包括緊張、勞累、分娩、手術、精神刺激、使用升高血糖的激素等[4]。由于上述誘因，胰島素抵抗會逐漸增加，從而引起胰島素分泌不足，最終導致2型糖尿病的發生[5]。因此，本文探討德谷胰島素聯合胰高血糖素樣肽-1受體激動劑(GLP-1 RAs)利司那肽對2型糖尿病患者網膜素-1(Omentin-1)、絲氨酸蛋白酶抑制劑(Vaspin)、視黃醇結合蛋白4(RBP4)水平的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年7月至2020年7月我院收治的2型糖尿病患者172例，隨機分為GLP-1組和聯合治療組，每組86例。GLP-1組：男45例，女41例；年齡39～59歲，平均年齡(46.55±9.50)歲；病程1～5年，平均病程(2.85±1.90)年。聯合治療組：男46例，女40例；年齡42～58歲，平均年齡(47.50±7.60)歲；病程2～8年，平均病程(4.75±2.85)年。2組患者一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。患者、家屬均知情且簽署知情同意書。

1.2 納入與排除標準

1.2.1 納入標準：患者均符合《中國2型糖尿病防治指南(2017年版)》[6]中的診斷標準；餐后2 h血糖(2 hPBG)≥11.10 mmol/L；患者均為初發，初次確診；經期未接受藥物治療。

1.2.2 排除標準：合并肝、腎、心功能等嚴重障礙者；對德谷胰島素過敏者；合并嚴重急慢性感染、自身免疫性疾病者；近6個月做過重大手術者。

1.3 藥物來源 利司那肽[賽諾菲(北京)制藥有限公司]規格：20 μg：0.10 mg/ml×3 ml支。德谷胰島素[諾和諾德(中國)制藥有限公司(Novo Nordisk A/S)]規格3 ml：300單位。

1.4 方法

1.4.1 用藥:GLP-1組用利司那肽治療，起始劑量為10 μg，1次/d，連續治療14 d。維持劑量在第15天開始，1次/d，20 μg/次。聯合治療組在GLP-1組基礎上于每晚睡前皮下注射德谷胰島素，起始劑量為0.1～0.2 U/Ag,第2天根據患者FBG水平調整使用劑量，每2～4天劑量增減(2～4 U)，連續使用12周。

1.4.2 Omentin-1、Vaspin、RBP4、CA199、CA125水平檢測:采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測，抽取患者治療前后1 d 3 ml清晨空腹靜脈血，5 cm離心半徑、3 000 r/min轉速下離心10 min，分離血清，-80℃保存。設置10個標準孔并就讓相應水平標準品，設置1個空白孔及若干待測樣品在10 μl待測樣品中加入40 μl 樣本稀釋液，封板膜封板，置于37℃水浴箱溫育30 min，清洗反應板5次，每次間隔30 s，拍干，在除空白孔以外的各孔中加入酶標液50 μl，封膜溫育30 min，清洗反應板5次，每次間隔30 s，拍干，在各孔中加入顯色A液、B液各50 μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光環境下顯色15 min，在反應孔內加入終止液50 μl/孔以終止反應，450 nm波長測量每孔吸光度，查出Omentin-1、Vaspin、RBP4、CA199、CA125水平表達。

1.4.3 FBG、2 hPBG、HbA1c水平檢測:2組患者治療前后空腹靜脈血3 ml，取血液3 000 r/min，半徑5 cm離心10 min，分離血清-80℃保存待檢。采用糖化血紅蛋白自動分析儀檢測電泳法取EDTA-K2抗凝血40 μl 注入160 μl的溶血素溶液中,37℃水浴15 min后,各孔中加入溶血。液10 μl于加樣梳中,經過染色、脫色、電泳、烘干,取出薄膜進行掃描得到結果,掃描時間約為1 h。將抗凝血放入樣品架上,得到結果。

1.4.4 HOMA-β、HOMA-IR水平檢測:采用Botnia鉗夾術檢測，空腹12 h檢查,測量身高、體重,排尿后躺在檢查床，30 min后檢測。患者雙側前臂行靜脈穿刺,將前臂置于60℃恒溫儀,確保靜脈血動脈化,靜脈通道由三通管組成，一側試驗取血，另一側注入胰島素和20%葡萄糖溶液，關閉輸液器采血，停止采血時緩慢靜滴0.9%氯化鈉溶液。

1.5 臨床療效評價 顯效：臨床癥狀基本正常，HbA1c減少率>1%，血糖恢復正常；有效：臨床癥狀有所好轉，HbA1c減少率為0.5%～1%；無效：臨床癥狀、HbA1c和血糖無任何效果，甚至更嚴重。顯效+有效=總有效。

1.6 不良反應情況 統計2組患者不良反應低血糖、皮下脂肪營養不良、過敏、體重增加等發生情況。

2 結果

2.1 2組患者Omentin-1、Vaspin、RBP4水平比較 2組治療前Omentin-1、Vaspin、RBP4水平比較差異無統計學意義(P>0.05)；治療后2組Omentin-1水平明顯升高，Vaspin、RBP4水平明顯降低(P<0.5)；與GLP-1組相比，聯合治療組Omentin-1水平明顯升高，Vaspin、RBP4水平明顯降低(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者Omentin-1、Vaspin、RBP4水平比較

2.2 2組患者2 hPBG、HbA1c、FBG水平比較 治療前2組患者2 hPBG、HbA1c、FBG水平差異無統計學意義(P>0.05)；治療后2組患者2 hPBG、HbA1c、FBG水平明顯降低(P<0.05)；與GLP-1組相比，聯合治療組2 hPBG、HbA1c、FBG水平明顯下降，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組患者2 hPBG、HbA1c、FBG水平比較

2.3 2組患者HOMA-IR、HOMA-β水平比較 治療前HOMA-IR、HOMA-β水平差異無統計學意義(P>0.05)；治療后2組患者HOMA-IR水平明顯降低，HOMA-β水平明顯升高(P<0.05)；與GLP-1組相比，聯合治療組HOMA-IR水平明顯下降，HOMA-β水平明顯上升，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 2組患者HOMA-IR、HOMA-β水平比較

2.4 2組患者CA125、CA199水平比較 2組患者治療前CA125、CA199水平差異無統計學意義(P>0.05)；治療后CA125、CA199水平明顯降低(P<0.05)；與GLP-1組相比，聯合治療組CA125、CA199水平明顯降低，差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 2組患者CA125、CA199水平比較

2.5 2組患者療效比較 與GLP-1組相比，聯合治療組治療總有效率較高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表5。

表5 2組患者療效比較 n=86,例

2.6 2組患者不良反應發生情況比較 與GLP-1組相比，聯合治療組總不良反應較高，但差異無統計學意義(P>0.05)。見表6。

表6 2組患者不良反應發生情況比較 n=86,例

3 討論

糖尿病是常見的內分泌代謝疾病，是繼腫瘤和心腦血管疾病后嚴重危害健康的重要的慢性非傳染性疾病[7]。腎臟疾病、視力障礙、心臟病、神經病變、周圍血管疾病等并發癥是引起糖尿病患者殘疾、死亡的重要原因[8]。2型糖尿病以長期高血糖為特征的代謝綜合征，2型糖尿病和1型糖尿病的主要區別在于1型糖尿病患者完全缺乏胰島素，需要依靠注射胰島素維持血糖終身。而2型糖尿病的病因是體內胰島B細胞功能下降，引起胰島素分泌不足，口服降糖藥可以控制血糖。

德谷胰島素是新型長效人胰島素類似物，去除人胰島素B鏈第30位的蘇氨酸，通過B29位的賴氨酸上的L-γ-谷氨酸連接子與脂肪二酸側鏈連接，經皮下注射后，以穩定聚六聚體存在，慢慢講胰島素單體釋放進入血液[9]。且具有穩定的藥效學特性，其氨基酸序列與人胰島素有較高的同源性，作用時間較長，血藥濃度穩定，釋放較慢，給藥時間和部位靈活，藥物代謝不會受到肝腎功能的影響。

GLP-1由30或31個氨基酸殘基組成是回腸末端、結腸神經內分泌L細胞分泌的[10]。GLP-1(7-36)NH2和GLP-1(7-37)有兩種亞型，前者穩定性較好，GLP-1受體不僅存在于細胞中，還存在于胃、脂肪組織、骨骼肌、心臟等細胞中[11]。利司那肽屬于GLP-1 RAS的一種，它含有44個氨基酸多肽，在擴鏈素-4的基礎上將第38位的脯氨酸去掉了，6個賴氨酸和絲氨酸連接在第39位[12]。與GLP-1的同源性為50%。修飾后的結構將DPP-4的降解能力有所提高，使其半衰期延長至3～4 h，是目前唯一每天服用1次即可控制全天餐侯血糖的藥物[13]。本研究顯示聯合應用德谷胰島素、利司那肽控制基礎血糖是新的給藥方式，可降低低血糖風險、體重減輕及減輕胰島素用量的優勢，效果顯著。

Omentin-1由網膜脂肪組織的血管基質細胞合成分泌，通過促進脂肪細胞的胰島素介導的葡萄糖轉運、Akp的磷酸化水平來改善胰島素敏感性[14]。李娜等[15]研究顯示，血清Vaspin和患者病程與DN的發生、發展緊密相連，可能會成為治療糖尿病的潛在靶點。RBP4編碼的單一肽鏈蛋白質由184個氨基酸殘基、3個二硫鍵組成，是一種與2型糖尿病、肥胖、胰島素抵抗相關的新型脂肪因子[16]。CA199常常用于胰腺癌的預后評價、診斷，CA125常用于卵巢癌的診斷、篩查、預后評價,但兩者在其他的惡性腫瘤、良性疾病中也顯示上升。曾毅等[17]研究顯示，腫瘤標志物呈高表達可能是因為血糖水平上升導致的，所以對T2DM患者進行控制血糖，可以降低惡性腫瘤的發生，HbA1c是紅細胞中的血紅蛋白與血清中的糖類相結合的產物。通過持續、緩慢、不可逆的糖化反應而成，含量的多少取決于血糖濃度以、血糖與血紅蛋白接觸時間，與患者是否空腹、抽血時間等因素無關[20]。空腹血糖(FBG)指在前1 d空腹第2天早餐前采的血，檢測的血糖值，為糖尿病常用的檢測指標[18]。HOMA-IR可以用來評估個體胰島素抵抗。HOMA-β可以評價個體的胰島細胞功能的指標，其指數是100%顯示是正常個體，糖尿病患者胰島β細胞功能下降則數值隨之下降，上升時數值也隨之上升[19]。本研究顯示，與GLP-1組相比，聯合治療組Omentin-1、HOMA-β水平明顯升高，Vaspin、RBP4、2 hPBG、HbA1c、FBG、HOMA-IR水平明顯降低，表明德谷胰島素聯合GLP-1 RAs治療2型糖尿病患者可有效降低血糖，改善胰島細胞功能，效果顯著。

綜上所述，德谷胰島素聯合GLP-1 RAs利司那肽治療2型糖尿病患者可有效升高Omentin-1水平，降低Vaspin、RBP4、血糖水平及不良反應發生率，效果顯著。