五味子乙素通過抑制TLR4/NF-κB 信號通路減輕PD 小鼠炎癥反應及DA能神經元凋亡①

賈 璐 杭 薇 徐幸杰 王 青 李彥青 秦劭晨 張海飛 樊慧杰 柴 智 馬存根（山西中醫藥大學神經生物學研究中心，晉中 030619）

帕金森病（Parkinson's disease，PD）是一種以中腦黑質多巴胺（dopamine，DA）能神經元進行性變性缺失為主要病理表現的神經退行性疾病，主要的臨床癥狀包括靜止時震顫、運動遲緩、僵直和姿勢不穩定。雖然PD 的發病原因及發病機制尚未完全明晰，但來自PD 患者和動物模型的大量證據提示，炎癥反應參與了PD 的神經變性過程［1-2］。研究表明，Toll 樣受體4（Toll-like receptor 4，TLR4）/核因子-κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB）作為一條與免疫癥性反應有關的經典信號通路，可調控免疫應答促進PD的發病進程［3］。

傳統中藥五味子具有收斂、生津、滋補之功效，五味子乙素（Schisandrin B，Sch B）是五味子中的一種活性單體，屬于聯苯環辛烯類木脂素，具有亞甲二氧基結構（化學結構式見圖1），表現出抗炎、抗氧化、抗凋亡等廣泛的藥理作用［4-6］。但Sch B 能否改善1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶（1-methyl-4-phenyl-1，2，3，6-tetrahydropyridine，MPTP）誘導的PD小鼠神經元損傷仍是未知。在此，本研究利用MPTP 誘導的小鼠作為PD 動物模型，探究Sch B 的神經保護作用，并基于炎癥反應和TLR4/NF-κB 信號通路探討其可能機制。

圖1 Sch B化學結構式Fig.1 Chemical structure of Sch B

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 8～10 周齡雄性C57BL/6 小鼠（體質量20～25 g）購自北京維通利華實驗動物有限公司，許可證號：SCXK（京）2016-0006。在標準動物飼養室內（室溫：23±1℃，相對濕度：40%～60%）適應性飼喂1周。

1.1.2 試劑與儀器 Sch B（成都曼斯特生物科技有限公司，貨號：A0204）；MPTP（美國Sigma-Aldrich公司，貨號：23007-85-4）；IL-1β、IL-6和TNF-α ELISA試劑盒（上海酶聯生物科技有限公司，貨號ml301814、ml002293、ml002095）；TH 抗體和Alexa Fluor 594 標記山羊抗兔IgG 二抗（美國Abcam 公司，貨號：ab6211、ab150080）；Bcl-2、Bax 與p-NF-κB p65抗體（美國Cell Signaling Technology 公司，貨號：D17C4、D3R2M、S536）；TLR4抗體（中國武漢愛博泰克生物科技有限公司，貨號：WH114312）；……