繼發性甲狀旁腺功能亢進癥來源的甲狀旁腺原代細胞的培養及鑒定

甲狀旁腺主細胞在機體甲狀旁腺素(PTH)的分泌和體內鈣磷代謝等方面發揮著重要作用，進而參與包括繼發性甲狀旁腺功能亢進癥（SHPT）在內的多種疾病的病理過程。SHPT的主要特征為PTH升高，而PTH的合成和分泌受到甲狀旁腺細胞膜上鈣敏感受體（CaSR）的調節。既往研究表明，在甲狀旁腺的發育過程中神經膠質細胞缺失因子2（GCM2）特異性表達，是關鍵的調控因子。目前，對SHPT的相關研究多局限于動物實驗和離體的病理學檢查等，關于人來源的原代甲狀旁腺細胞模型僅存在于原發性甲狀旁腺功能亢進（PHPT）中，尚缺乏SHPT人來源的原代甲狀旁腺細胞模型，存在實驗受限于多種復雜因素影響、細胞內相關機制難以闡明、實驗動物與人類存在先天差異性及病理學檢查存在實驗局限性等諸多缺點。因此，建立SHPT原代細胞模型對進一步的研究至關重要。本研究通過對培養的SHPT細胞進行PTH、CaSR和GCM2的檢測，成功分離并建立了原代甲狀旁腺細胞模型，為進一步研究SHPT的發病機制、藥物療效、調控機制等提供了前期基礎。

1 材料和方法

1.1 材料

人甲狀旁腺原代細胞（中南大學湘雅三醫院）。DMEM/F12培養液（賽默飛世爾公司）。細胞膠原酶I（BIOSHARP），胎牛血清（Gibco），熒光標記二抗（湖南艾佳生物公司），PTH兔源多抗（ABclonal），CaSR兔源多抗（Bioss），GCM2兔源多抗（Bioss），Odyssey雙色紅外熒光成像系統（Li-Cor），LightCycler-4800II PCR儀（Roche）等。

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