利用GST pull-down 聯合質譜技術鑒定H7N9 禽流感病毒PA-X 的互作蛋白

徐國雙，姜童瀟，郭藝迪，段 銘，張茂林，關振宏

（吉林大學人獸共患病研究所/人獸共患病教育部重點實驗室，吉林 長春 130062）

【研究意義】禽流感病毒（Avian Influenza Virus，AIV）可引發家禽及野生禽類出現高度接觸性傳染病，高致病性AIV 亞型病毒的致死率接近100%。AIV 通過在宿主中頻繁變異和基因重組而不斷跨越種屬屏障，在人及其他哺乳動物之間造成感染和傳播，H5N1 和H7N9 亞型是其最典型的毒株［1-2］。自2013 年H7N9 亞型AIV 首次在我國出現后，人感染此亞型AIV 的病例持續增多，死亡率接近40%，已對人類健康造成嚴重威脅［3-6］。研究H7N9 亞型AIV 的致病機制是其防控的迫切需要，而病毒蛋白質與宿主細胞蛋白質相互關系的闡明有利于揭示病毒生命活動的分子機制，對流感治療和抗病毒新藥開發也具有一定指導意義。

【前人研究進展】PA-X 蛋白是流感病毒PA基因通過核糖體移碼來識別X-ORF 而產生的一種融合蛋白［7］。PA-X 蛋白已被證實在病毒感染過程中具有多種重要功能，包括宿主細胞關閉［8］、參與病毒復制［9-10］、調控宿主天然免疫和獲得性免疫反應［11-12］、調節病毒毒力和聚合酶活性［13-14］等。Jagger 等［7］證實PA-X 蛋白可以減弱1918年大流行的H1N1 亞型AIV 對小鼠的致病性，并能顯著抑制與炎癥及細胞凋亡相關的細胞免疫應答。研究發現，H5N1 亞型AIV 的PA-X 蛋白作為病毒毒力的負調控因子，可以通過抑制病毒復制和鈍化宿主的整體免疫反應而使病毒的毒力降低［15］。也有研究證實PA-X 蛋白能夠降低2009年大流行的H1N1 亞型AIV 和H5N1 亞型AIV 在小鼠中的毒力和宿主炎癥反應［16］。許多證據表明PA-X 蛋白的功能具有毒株、亞型或宿主特異性，其潛在的作用機制仍未被闡明。……