奶山羊乳鐵蛋白的原核表達及其多克隆抗體的制備

鐘玉玲，代邦國，杜偉偉，張華文，李 純，史懷平

(西北農林科技大學 動物科技學院，陜西 楊凌 712100)

乳鐵蛋白(lactoferrin, LF)的大小約為80 kDa，屬于轉鐵蛋白家族的一種，也被叫做轉鐵蛋白。其最初是在牛奶中以鐵結合糖蛋白的形式被發現，后來在人乳中被純化為含鐵的紅色蛋白，因此也被稱為紅蛋白。研究表明，LF廣泛存在于諸如淚液、唾液、精漿和鼻、胰、胃腸、支氣管的分泌物中，但主要還是存在于哺乳動物乳汁中，且初乳中含量較高，常乳中含量較低。研究表明，LF在生物體的免疫調節、生理代謝、穩態維持等方面具有重要的功能，是先天免疫的重要組成部分，可以刺激宿主免疫系統的發育，作為生長因子刺激細胞的增殖與分化。同時，LF還具有抗癌和抗氧化活性，能夠調節癌細胞凋亡相關基因的表達和細胞周期蛋白激酶的活性，抑制癌細胞的生長。此外，LF能夠調節體內鐵元素的動態平衡，促進組織和細胞的生長，還可以作為肉類產品保鮮劑和動物飼料添加劑。

目前在牛和人上對基因相關研究及其抗體制備的相關研究較多，而對于奶山羊LF蛋白抗體制備的研究報道較少，王建等通過用純化的牛LF蛋白直接免疫家兔，得到了牛LF蛋白的特異性多抗。鑒于此，本試驗用奶山羊LF蛋白序列片段構建了原核表達載體并誘導表達，并用純化后蛋白免疫4月齡雌性新西蘭大耳兔，制備出能夠特異性識別奶山羊LF蛋白的多克隆抗體，并檢測該抗體的效價和特異性，為奶山羊LF蛋白功能的研究提供試驗材料。……