微柱凝膠法檢測ABO血型正反定型不符的影響因素分析

趙妮 蘭愛俠

(銅川市人民醫院輸血科,陜西 銅川 727031)

為提升臨床ABO血型鑒別水平，需對導致血型正反定型不符合的影響因素實施分析，本研究對本院80例ABO血型正反定型不符合患者開展分析，了解導致不符合情況發生的影響因素，現報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇本院接收的80例實施ABO血型檢查患者為研究樣本，其檢查時間均在2018年4月至2020年4月之間。80例患者中，男45例、女35例；年齡(56.37±6.89)歲；體質指數(23.36±0.47) kg/m2。全部患者在實施微柱凝膠法檢測后均出現ABO血型正反定型不符合情況，通過向患者全面介紹研究目的以及方法后，取得患者同意，為每位患者均采集血液樣本5 mL。

1.2方法 檢測儀器為HHS-21-6型數字顯示恒溫水浴鍋(采購至常州諾基儀器有限公司)、JIDI-18D型離心機(采購至廣州吉迪儀器有限公司)、SA-60型全自動血型分析儀(采購至蘇州長光華醫生物醫學工程有限公司)。檢測試劑為ABO血型以及RhD血型定型試劑采購至南京信帆生物技術有限公司；抗A、抗B、抗H、抗AB以及抗A1標準血清采購至上海橋星貿易有限公司；反定型A1型、B型、O型以及A2型標準紅細胞采購至上海艾研生物科技有限公司；不規則抗體篩選紅細胞采購至長春博訊生物技術有限責任公司。全部試劑經檢查后均符合研究需求且在保質期內。使用全自動血型分析儀對每位患者ABO血型實施檢測，全自動血型分析儀工作原理為微柱凝膠法。當發現正反定型不符合情況時，可根據ABO疑難血型三步分析法對正反定型不符合的標本實施鑒定。在排除因人為因素、操作錯誤和試劑不符合檢測要求等問題后，為患者重新采集血液樣本5 mL，在采集血液樣本時需嚴格遵循操作原則，避免出現采集錯誤和血液樣本不規范等情況。分析患者臨床資料，探尋可能會引起正反定型不符合的因素，隨后依據分析結果實施針對性驗證試驗。在篩查不規則抗體時，可選擇全自動血型分析儀、抗人球蛋白試管法以及鹽水法等操作措施。最終依據可能會導致正反定型不符合的因素和試驗結果實施全面判斷。

1.3觀察項目 分析正反定型不符合原因。觀察導致正反定型減弱或缺失的影響因素。分析ABO血型抗原抗體出現額外反應的影響因素。

2 結 果

2.1正反定型不符合原因 依據ABO疑難血型三步分析方式對患者實施核實分析后，對80例患者再次采集血液樣本實施ABO血型檢測，結果顯示同首次檢測結果相同，均出現正反定型不符情況。在80例ABO正反定型不符合的患者中，有42例(52.50%)為造血干細胞移植不符合、有18例(22.50%)為ABO血型正反定型不符合、有17例(21.25%)為抗原減弱或缺失不符合、僅有3例(3.75%)為抗體減弱或缺失不符合。在42例造血干細胞移植不符合患者中，21例(50.00%)移植供受者出現ABO血型不符合、15例(35.71%)出現次要不合、6例(14.29%)出現主次要不合。

2.2導致正反定型減弱或缺失的影響因素 在38例非造血干細胞移植ABO正反定型不符合患者中，有17例(44.74%)出現抗原減弱。其中低丙種球蛋白血癥、年齡>60歲以及惡性血液疾病是導致抗體減弱或缺失的主要影響因素。惡性血液疾病、試劑干擾、ABO亞型以及惡性實體腫瘤是導致抗原減弱或缺失的主要影響因素。見表1。

表1 導致血型抗原/抗體減弱或缺失的影響因素分析[n(%)]

2.3ABO血型抗原抗體出現額外反應的影響因素 80例患者中，有18例為ABO正反定型額外反應患者，并且其中反定型額外反應者有13例(72.22%)、正定型額外反應者有3例(16.67%)、正反定型同時額外反應者有2例(11.11%)。由于自身抗體所導致額外反應者有8例(44.44%)，由于同種抗體所導致額外反應者有5例(27.78%)。其中有1例ABO亞型患者，通過實施分子生物學監測后判斷是B(A)血型。見表2。

表2 ABO血型抗原抗體出現額外反應的影響因素分析[n(%)]

3 討 論

微柱凝膠法主要是指紅細胞抗原同相應抗體在凝膠微柱介質中出現凝集反應的免疫學檢測方式。ABO正反定型不符合主要是指通過觀察正定型和反定型結果后無法實施相關驗證，進而無法準確地進行ABO血型鑒定[1-4]。開展ABO血型鑒定具有以下幾點優勢：(1)對于機體循環血量不足或出現大量失血、貧血癥狀的患者，當其需要實施輸血治療時，在輸血前必須使用血型相同的供血者，隨后開展交叉配血試驗，確定兩種血型完全相同后才可進行輸血[5]。(2)當進行皮膚或腎移植等器官移植時，需要選擇ABO血型相符合的供體[6]。(3)分析影響不孕癥的原因以及導致新生兒出現溶血癥的影響因素[7]。(4)親子鑒定。因此，了解導致出現ABO正反定型不符合的原因，并采取相應干預措施，可提升臨床對ABO血型的鑒定能力。

臨床有研究[8]指出，ABO血型不符合造血干細胞移植、自身抗體和惡性血液疾病是導致ABO正反定型不符合的重要因素，并且其認為通過實施相應輔助試驗和掌握患者臨床資料可一定程度上提升血型鑒定水平。在本次研究中，發現以下幾點因素是導致ABO正反定型不符合的重要因素：(1)ABO血型不符合造血干細胞移植，在實施造血干細胞移植時，血型可出現復雜改變，通過掌握患者臨床資料，提供患者血型和正反定型反應強度，可協助臨床醫師對移植存活情況有正確判斷。(2)惡性血液疾病，對于再生障礙性貧血的患者而言，其血液中成熟紅細胞數量有明顯下降，有大量不規則形態紅細胞形成，從而導致抗原能力下降。對于急性粒細胞白血病患者而言，由于疾病對半乳糖轉移酶合成產生抑制，導致紅細胞A抗原或是B抗原出現缺失或弱化，最終出現抗原缺失或弱抗原情況[9]。(3)自身抗體，對于因自身抗體而發生溶血的患者，當血液樣本儲存溫度低于37℃時，血細胞則會出現凝集，進而對正反定型判斷產生不利影響。為避免因自身抗體所產生的影響，通過使用37℃生理鹽水洗滌三次血液樣本，或者是將反定型試管置于37℃溫水中進行10～30 min水浴處理，之后再實施血型鑒定[10]。

綜上所述，在將試驗操作技術以及人為因素排除后，發現導致ABO正反定型不符合的主要影響因素是ABO血型不符合造血干細胞移植、惡性血液疾病和自身抗體，通過實施針對性輔助試驗和全面掌握患者臨床資料，可對血型進行準確區分。