血常規(guī)MCHC對標(biāo)本性狀異常的提示價值及抗干擾方案的探討*

王 瑩，單洪麗，曲林琳

吉林大學(xué)第一醫(yī)院檢驗科，吉林長春 130021

血常規(guī)檢測屬于三大常規(guī)檢測之一，在疾病篩查、診斷、治療監(jiān)測和預(yù)后判斷中發(fā)揮重要作用。平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)作為紅細(xì)胞參數(shù)中的重要一項，在臨床工作中常用于區(qū)分貧血是否為低色素貧血，指導(dǎo)血常規(guī)的報告審核，為紅細(xì)胞檢測是否存在錯誤的一個敏感指標(biāo)。MCHC為血紅蛋白(Hb)和血細(xì)胞比容(HCT)的比值，是一個穩(wěn)定的指標(biāo)，很少變化。如果出現(xiàn)明顯波動，提示檢測誤差的存在，可能存在標(biāo)本性狀的異常。國際復(fù)檢規(guī)則41條中規(guī)定，當(dāng)MCHC超過檢測參考限20個單位，則需檢查標(biāo)本有無脂血、溶血、紅細(xì)胞冷凝集、球形紅細(xì)胞，最常出現(xiàn)的情況是脂血和紅細(xì)胞冷凝集。目前采用的糾正方法通常是37 ℃水浴30 min，但這種方法不能完全糾正MCHC。本研究探討了脂血、紅細(xì)胞冷凝集、溶血、高白細(xì)胞對MCHC造成的影響及適合的處理方式，旨在幫助臨床檢驗工作者提供及時有效的報告結(jié)果，使患者得到準(zhǔn)確診斷和精準(zhǔn)治療。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年8月至2020年6月于吉林大學(xué)第一醫(yī)院就診的患者102例為研究對象。所有患者在檢驗科行血常規(guī)檢測提示MCHC>380 g/L，排除大量嘔吐、高原居民、新生兒、遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥等MCHC真性升高的患者。

1.2方法 按照檢驗科制訂的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，在Sysmex XN9000全自動血液分析儀上進(jìn)行檢測，試劑為配套試劑。脂血標(biāo)本：采用離心(3 500 r/min)進(jìn)行血漿置換的方法上機(jī)檢測。紅細(xì)胞冷凝集標(biāo)本：分別采用37 ℃水浴20 min、37 ℃水浴30 min、37 ℃水浴60 min、開啟血液分析儀的預(yù)稀釋功能將標(biāo)本溫育后稀釋7倍處理(稀釋液與標(biāo)本一同溫育)、41 ℃水浴10 min、離心(3 500 r/min)進(jìn)行血漿置換等方法處理，觀察血細(xì)胞分布圖和各參數(shù)的檢測結(jié)果的糾正程度。溶血標(biāo)本：采用離心(3 500 r/min)進(jìn)行血漿置換的方法糾正后進(jìn)行檢測，觀察糾正前后的檢測結(jié)果變化情況。高白細(xì)胞標(biāo)本：通過將吸管插入離心后標(biāo)本最底層，吸取一定量紅細(xì)胞放入生理鹽水，再上機(jī)檢測，將MCHC水平降至正常，然后根據(jù)原始數(shù)據(jù)中的HCT進(jìn)一步計算出相應(yīng)的Hb。以MCHC<380 g/L作為干擾被有效糾正的標(biāo)志[1]。

1.3信息采集 記錄患者血常規(guī)檢測指標(biāo)中白細(xì)胞計數(shù)(WBC)、紅細(xì)胞計數(shù)(RBC)、Hb、HCT、平均紅細(xì)胞體積(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量(MCH)、MCHC、血小板(PLT)的水平，標(biāo)本外觀信息(脂血、溶血、紅細(xì)胞冷凝集)、顯微鏡下紅細(xì)胞聚集情況，以及處理后WBC、RBC、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT的結(jié)果，統(tǒng)計102例患者出現(xiàn)血常規(guī)檢驗紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)與臨床嚴(yán)重不符或明顯錯誤的情況，分析其干擾因素，比較采取適當(dāng)糾正措施前后的各指標(biāo)水平。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 22.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析。采用Shapiro-Wilk軟件檢驗計量資料的正態(tài)性，不呈正態(tài)分布的計量資料以M(P25，P75)表示，兩組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗，多組間比較采用Kruskal-Wallis檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1MCHC水平異常升高的原因及基本情況 102例患者的血常規(guī)標(biāo)本中，有脂血標(biāo)本12份、紅細(xì)胞冷凝集標(biāo)本68份、溶血標(biāo)本20份、高白細(xì)胞(WBC>350×109/L)標(biāo)本2份。見表1。

表1 MCHC水平異常升高的常見干擾原因及基本情況

2.2脂血標(biāo)本處理前后檢驗指標(biāo)水平比較 與處理前比較，脂血標(biāo)本采用血漿置換法處理后，WBC、Hb水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，RBC和HCT水平明顯升高，MCV、MCH、MCHC和PLT水平降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 脂血標(biāo)本處理前后檢驗指標(biāo)水平比較[ M(P25,P75)]

2.3紅細(xì)胞冷凝集標(biāo)本處理前后檢驗指標(biāo)水平比較 與處理前比較，紅細(xì)胞冷凝集標(biāo)本采用37 ℃水浴20 min處理后，各指標(biāo)水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；采用37 ℃水浴30 min處理后，其中9份標(biāo)本MCHC無法糾正，進(jìn)一步行稀釋+溫育(稀釋液與標(biāo)本一同溫育)或血漿置換法重新檢測，MCHC可準(zhǔn)確糾正(P<0.05)；與處理前比較，采用41 ℃水浴10 min處理后，除WBC、Hb外，其余各指標(biāo)水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 紅細(xì)胞冷凝集標(biāo)本處理前后檢驗指標(biāo)水平比較[ M(P25,P75)]

2.4溶血標(biāo)本處理前后檢驗指標(biāo)水平比較 與處理前比較，溶血標(biāo)本采用血漿置換法處理后，RBC、HCT、MCV水平升高，MCH、MCHC、PLT水平降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 溶血標(biāo)本處理前后檢驗指標(biāo)水平比較[ M(P25,P75)]

續(xù)表4 溶血標(biāo)本處理前后檢驗指標(biāo)水平比較[ M(P25,P75)]

2.52份高白細(xì)胞標(biāo)本處理前后檢驗指標(biāo)水平比較 高白細(xì)胞標(biāo)本采用37 ℃水浴30 min或血漿置換方法處理后，各指標(biāo)水平變化不明顯(P>0.05)。見表5。

表5 2份高白細(xì)胞標(biāo)本處理前后檢驗指標(biāo)水平變化

3 討 論

血常規(guī)分析為臨床檢測的常用項目，標(biāo)本性狀異常為重要的分析前干擾因素，血常規(guī)MCHC水平升高可對標(biāo)本性狀異常進(jìn)行提示。在臨床工作中，脂血是干擾血常規(guī)分析檢測的常見影響因素之一，影響紅細(xì)胞參數(shù)的檢測[2]。高脂血標(biāo)本因富含總膽固醇、乳糜微粒等脂質(zhì)而呈乳白色，使血漿產(chǎn)生濁度干擾，高水平的乳糜微粒可促進(jìn)大分子的聚集，致使標(biāo)本通過血細(xì)胞分析儀RBC/PLT通道計數(shù)孔時電脈沖增大，從而導(dǎo)致MCV水平升高[3]。本研究發(fā)現(xiàn)血漿置換后再進(jìn)行上機(jī)檢測，可減少脂血對RBC水平的影響。

冷凝集素多為IgM抗體，與RBC結(jié)合的最適溫度為4 ℃，室溫下可發(fā)生自身凝集作用，復(fù)溫至37 ℃凝集可迅速自行消失，多見于特發(fā)性冷凝素病，或繼發(fā)于感染、淋巴增殖性疾病等，也可見于特發(fā)性寒冷性血紅蛋白病及病毒性疾病等[4-5]。部分冷凝集素效價不高但活性很強(qiáng)，如溫反應(yīng)性抗體多數(shù)為IgG抗體，一般溫育效果不佳。冷凝集標(biāo)本會導(dǎo)致RBC假性減少，HCT水平降低[6-8]。本研究發(fā)現(xiàn)，對于使用溫育30 min的方法無法糾正的紅細(xì)胞冷凝集標(biāo)本，可行溫育后稀釋(稀釋液與標(biāo)本一同溫育)或血漿置換法重新檢測。建議優(yōu)先使用溫育后稀釋方法進(jìn)行處理，可利用儀器預(yù)稀釋檢測模式，采用相同的稀釋倍數(shù)進(jìn)行標(biāo)本的稀釋，檢測結(jié)果不用換算，操作簡便。如溫育后稀釋亦不能得到理想的結(jié)果，可采用生理鹽水或儀器稀釋液進(jìn)行血漿等量置換，操作需規(guī)范，吸樣需準(zhǔn)確。血漿置換過程中可能造成PLT的丟失或WBC聚集[9]，所以血漿等量置換主要是對RBC等相關(guān)參數(shù)進(jìn)行糾正，PLT等參數(shù)可參考首次檢測結(jié)果或采用其他替代方法檢測。本研究采用在計數(shù)前41 ℃水浴10 min可以代替?zhèn)鹘y(tǒng)的延長溫育時間37° C水浴60 min，使MCHC計數(shù)準(zhǔn)確，并縮短周轉(zhuǎn)時間，與相關(guān)研究結(jié)果一致[10-11]。

溶血為標(biāo)本不合格的常見原因[12-13]，通過細(xì)胞內(nèi)鉀、乳酸脫氫酶的釋放，生物活性物質(zhì)的稀釋和蛋白水解作用，干擾紅細(xì)胞參數(shù)[14]。因紅細(xì)胞碎片增多，引起PLT水平假性升高。研究發(fā)現(xiàn)溶血導(dǎo)致血常規(guī)各參數(shù)變化較明顯，最好的選擇是首先判斷溶血的程度及性質(zhì)以決定是否需按照不合格標(biāo)本處理[15]，可要求重新采集標(biāo)本，如果在難以獲得標(biāo)本或患者的病情很危急時，建議與醫(yī)師溝通，備注溶血影響提示[16]。本研究采用血漿置換方法糾正溶血，PLT采用熒光染色法糾正，并提示溶血信息。

高白細(xì)胞對Hb產(chǎn)生影響，造成RBC及MCV水平假性升高[11]。本研究選取的病例具有3個主要特點：高白細(xì)胞、高未成熟細(xì)胞、高M(jìn)CHC。前2個符合慢性粒細(xì)胞白血病的外周血表現(xiàn)，但第3個MCHC水平的異常升高無法解釋，查看報警信息初步判斷是紅細(xì)胞聚集導(dǎo)致。37 ℃水浴30 min重新檢測并無明顯變化,未發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞冷凝集現(xiàn)象及球形紅細(xì)胞。離心后血漿清亮，可以排除脂血、溶血及黃疸的干擾。但采用血漿置換法處理后MCHC水平未糾正，說明導(dǎo)致MCHC水平出現(xiàn)明顯升高的原因并不在血漿，而是血細(xì)胞本身。其原因可能為Hb水平假性升高或HCT水平假性降低兩種。同時標(biāo)本采用預(yù)稀釋功能稀釋，MCHC水平未糾正，考慮WBC對Hb的干擾程度不僅取決于WBC，也與Hb的水平相關(guān)。單純的稀釋并不能改變WBC與Hb的比例，低速離心后，可采用吸管吸取下面紅細(xì)胞層的辦法。通過將吸管插入離心后標(biāo)本最底層，吸取一定量紅細(xì)胞放入生理鹽水，再上機(jī)檢測，將MCHC降至正常，然后根據(jù)原始數(shù)據(jù)中的HCT水平進(jìn)一步計算出相應(yīng)的Hb。由于病例較少，MCHC水平升高的程度與WBC的具體關(guān)系仍需要進(jìn)一步研究。

通過前面的研究，脂血、溶血、紅細(xì)胞冷凝集、高白細(xì)胞標(biāo)本會導(dǎo)致MCHC水平假性升高，對于貧血的標(biāo)本，尤其是缺鐵性貧血，其本身MCV、MCH及MCHC水平較低，如果發(fā)生溶血或脂血，MCHC水平升高也不會明顯，容易導(dǎo)致漏診和誤診。新生兒黃疸在血常規(guī)中并不易被發(fā)現(xiàn)，往往因新生兒本身Hb水平就較成人高，同時輕微的黃疸對Hb的影響也并不明顯。臨床上，只有極少數(shù)患者會出現(xiàn)MCHC真性升高，如遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、長期缺氧或高原人民、高滲性脫水的血液濃縮等。報告審核時遇到MCHC水平升高應(yīng)結(jié)合XN9000全自動血液分析儀的數(shù)據(jù)資料、報警信息及直方圖、散點圖的變化，及時和臨床醫(yī)生有效溝通，排除假性升高的結(jié)果，提高檢驗質(zhì)量。