水鹽代謝相關(guān)激素在梅尼埃病發(fā)病中的作用

陳姿 郭明麗 屈永濤

梅尼埃病(meniere’s disease, MD)臨床表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作的眩暈、波動性感音神經(jīng)性聽力下降和耳鳴等，發(fā)病率為10/10萬～157/10萬[1]。MD病因不明，主要病理變化為膜迷路積水，發(fā)病機(jī)制未明確，研究顯示，水鹽代謝相關(guān)激素與內(nèi)淋巴液生成、吸收平衡有關(guān)，激素失衡、離子轉(zhuǎn)運(yùn)通道蛋白功能障礙或缺陷，可能導(dǎo)致內(nèi)淋巴積水[2-5]。本研究檢測MD患者外周血抗利尿激素(antidiuretic hormone,ADH)、醛固酮(aldosterone,ALD)、糖皮質(zhì)激素(glucocorticoid,GC)水平，探討ADH、ALD、GC在內(nèi)淋巴穩(wěn)態(tài)中可能的作用機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年5～12月在河北省人民醫(yī)院耳鼻咽喉科門診及病房診斷為MD患者47例為試驗(yàn)組，同期不伴有耳、鼻疾病史的健康志愿者、耳鼻咽喉科門診和住院患者19例為對照組。試驗(yàn)組47例，其中男19例，女28例；年齡24～77歲，平均年齡(54.39±12.39)歲。對照組19例，其中男12例，女7例;平均年齡(49.1±13.18)歲。2組年齡、性別比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) (1)試驗(yàn)組均符合《梅尼埃病診斷和治療指南(2017)》診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]；(2)1個月內(nèi)未使用過糖皮質(zhì)激素、鎮(zhèn)靜藥物；(3) 2周內(nèi)無急性感染；(4)無重大疾病史，患有慢性病者(如糖尿病、高血壓等)病情控制穩(wěn)定；(5)無內(nèi)分泌系統(tǒng)代謝障礙性疾病(如抗利尿激素分泌失調(diào)綜合征、庫欣綜合征、多發(fā)性內(nèi)分泌腺瘤病等)。

1.3 方法 試驗(yàn)組發(fā)作期標(biāo)本于眩暈發(fā)作后48 h內(nèi)采血，間歇期標(biāo)本于末次發(fā)作癥狀緩解4周以后采血。受試者均采用促凝真空采血管抽取晨起空腹外周血5 ml。標(biāo)本于室溫放置2～4 h，待其自然凝固后放置于離心機(jī)中，轉(zhuǎn)速為 3 600 r/min，離心10 min后收集血清2 ml，置于EP管內(nèi)，對EP管編號，登記編號信息后將血清置于-80℃冰箱保存，采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清中ALD、ADH、GC的水平，對樣本的處理、實(shí)驗(yàn)步驟及最終濃度的計(jì)算，均嚴(yán)格按照使用說明書進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

2.1 2組血清中ADH、ALD、GC水平比較 試驗(yàn)組血清中ADH和ALD水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；試驗(yàn)組血清中GC水平略低于對照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 2組血清中ADH、ALD、GC水平比較

2.2 試驗(yàn)組發(fā)作期與對照組血清中ADH、ALD、GC水平比較 試驗(yàn)組發(fā)作期血清中ADH、ALD水平均高于對照組(P<0.05)；血清中GC水平略低于對照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 試驗(yàn)組發(fā)作期與對照組血清中ADH、ALD、GC水平比較

2.3 試驗(yàn)組發(fā)作期與間歇期血清中ADH、ALD、GC水平比較 試驗(yàn)組發(fā)作期血清中ADH和ALD水平略高于間歇期，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；間歇期血清中GC水平高于發(fā)作期(P<0.05)。見表4。

表3 試驗(yàn)組發(fā)作期與間歇期ADH、ALD、GC水平比較

3 討論

MD是耳科常見病[6]，1938年Hallpike等[7]第一次提出了MD以膜迷路積水為主要病理基礎(chǔ)，但膜迷路積水的機(jī)制至今尚不明確，學(xué)者關(guān)注到水鹽代謝相關(guān)激素與MD的發(fā)生可能有關(guān)，本研究觀察受試者血清中ADH、ALD和GC的水平并分別討論。

3.1 ADH與MD：ADH又稱血管加壓素(vasopressin，VP)，由下丘腦視上核和視旁核的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞合成，通過與血管加壓素1受體(vasopressin 1 receptor，V1R)、血管加壓素2受體(vasopressin 2 receptor，V2R)結(jié)合發(fā)揮作用，其中V2R與水鹽代謝有關(guān)[8，9]。

內(nèi)耳存在ADH受體以及水通道蛋白[10]，且MD患者內(nèi)淋巴囊中AQP2 mRNA表達(dá)明顯高于對照組，V2R和AQP2 mRNA 表達(dá)水平顯著正相關(guān)[11]。本研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組、試驗(yàn)組發(fā)作期血清中ADH水平均高于對照組(P<0.05)。Kitahara等[9]報(bào)道MD患者內(nèi)淋巴囊V2RmRNA表達(dá)上調(diào)，使細(xì)胞膜內(nèi)的AQP2無法向細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移，細(xì)胞膜表面存有大量AQP2，ADH升高即可導(dǎo)致膜迷路積水。其他學(xué)者也認(rèn)為，ADH引起血管紋中AQP2 mRNA表達(dá)上調(diào)，增加水從外淋巴進(jìn)入到血管紋，再增加水向內(nèi)淋巴的滲透，導(dǎo)致內(nèi)淋巴產(chǎn)生增加[12,13]。除上述通路外，ADH還可作用于內(nèi)淋巴囊中上皮鈉通道，上調(diào)其功能，導(dǎo)致膜迷路積水[14]。本研究結(jié)果中，試驗(yàn)組發(fā)作期ADH水平高于對照組，推測可能原因ADH水平升高是MD患者癥狀發(fā)作的原因之一。

3.2 ALD與MD的關(guān)系： ALD由腎上腺皮質(zhì)球狀帶分泌，為鹽皮質(zhì)激代表。鹽皮質(zhì)激素的主要生理作用是促進(jìn)腎小管重吸收鈉而保留水，并排泄鉀。

ALD可通增強(qiáng)ENaC表達(dá)，ENaC在豚鼠耳蝸中表達(dá)部位包括血管紋、螺旋韌帶、前庭膜、螺旋神經(jīng)節(jié)、螺旋器及螺旋緣等[15]，加速Na+泵出細(xì)胞、K+泵入細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)與小管液之間的K+濃度差變大，促進(jìn)K+的分泌[16，17]。ALD還可通過增加ENaC表達(dá)來增加 Na+運(yùn)輸，增加水吸收，導(dǎo)致內(nèi)淋巴液量增加[18]。Qin等[19]將ALD注射至豚鼠腹腔內(nèi)，可以引起內(nèi)耳膜迷路積水，說明體內(nèi)ALD含量升高可導(dǎo)致MD同樣的內(nèi)耳病理變化，也就有可能導(dǎo)致MD同樣臨床癥狀。

本研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組、試驗(yàn)組發(fā)作期血清中，ALD水平均高于對照組(P<0.05)。推測MD患者ALD基礎(chǔ)水平即高于對照組，當(dāng)某種因素導(dǎo)致體內(nèi)ALD濃度升高，ENaC表達(dá)增強(qiáng)，增加了Na+運(yùn)輸，同時造成了膜迷路積水。

研究表明，ADH、ALD的分泌又受AngⅡ的調(diào)節(jié),AngⅡ不僅可促進(jìn)神經(jīng)垂體釋放ADH，還可以合成和分泌ALD，血液中ADH、ALD水平增高后會導(dǎo)致MD的發(fā)作[20]。當(dāng)MD患者因生活習(xí)慣、情緒問題導(dǎo)致血液中AngⅡ含量升高，可刺激下丘腦ADH基因表達(dá)和垂體釋放ADH[21]。AngⅡ還可以經(jīng)過血管緊張素酶A生成AngⅢ[22]，AngⅡ和AngⅢ均可刺激腎上腺皮質(zhì)球狀帶合成和分泌ALD[23]，使Na+和水的重吸收增強(qiáng)，最終導(dǎo)致MD患者的病情發(fā)作[24]。AngⅡ可以調(diào)節(jié)ADH、ALD的分泌，后者可以通過多種機(jī)制作用于內(nèi)耳，調(diào)節(jié)內(nèi)耳膜迷路水鹽代謝，當(dāng)各種原因?qū)е露唧w內(nèi)水平升高，使得內(nèi)耳膜迷路水鹽代謝異常，導(dǎo)致MD患者出現(xiàn)膜迷路積水，并表現(xiàn)出相應(yīng)的臨床癥狀，本試驗(yàn)結(jié)果與上述推測相符。

3.3 GC與MD的關(guān)系 GC由腎上腺皮質(zhì)束狀帶分泌，其中90%為皮質(zhì)醇，10%為皮質(zhì)酮[8]。GC在人體中的主要作用是參加糖代謝、蛋白質(zhì)紙代謝、脂肪代謝、水和電解質(zhì)代謝[25]。試驗(yàn)組發(fā)作期血清中GC水平略低于對照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；試驗(yàn)組間歇期GC水平高于發(fā)作期(P<0.05)。

研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)耳組織中存在糖皮質(zhì)激素受體(glucocorticoid receptor，GR)[26]。Echisen等[27]對Na+，K+-ATPase在內(nèi)耳的分布以及GC對Na+，K+-ATPase的調(diào)節(jié)作用研究顯示，利用免疫組織化學(xué)(immunofluorescence，IHC)發(fā)現(xiàn)小鼠內(nèi)耳存在Na+，K+-ATPase，同時發(fā)現(xiàn)在小鼠生長發(fā)育過程中，GR表達(dá)的時間和量與Na+，K+-ATPase的表達(dá)有一致性，作者推測GC可能通過調(diào)節(jié)Na+，K+-ATPase表達(dá)的方式來調(diào)節(jié)內(nèi)耳電解質(zhì)平衡。

GC還通過調(diào)控AQP實(shí)現(xiàn)對內(nèi)耳水代謝的調(diào)節(jié)。Nevoux等[28]進(jìn)一步研究，發(fā)現(xiàn)AQP3在內(nèi)耳將水運(yùn)輸?shù)絻?nèi)淋巴液中，證實(shí)地塞米松對AQP3表達(dá)和水流量的調(diào)節(jié)有關(guān)。Nevoux等[28]也觀察到AQP3在人和小鼠內(nèi)耳中分布并高度表達(dá)，發(fā)現(xiàn)地塞米松對小鼠的前庭細(xì)胞的AQP3的表達(dá)具有刺激作用，證實(shí)地塞米松可以刺激內(nèi)耳中內(nèi)淋巴液的再吸收。這一結(jié)果對維持內(nèi)淋巴穩(wěn)態(tài)有重要意義。

目前臨床上MD治療中應(yīng)用的GC類藥物主要有地塞米松、甲潑尼龍琥珀酸鈉等，其可與內(nèi)耳中GR結(jié)合，可能通過調(diào)節(jié)內(nèi)耳Na+、K+-ATPase、AQP3活性，實(shí)現(xiàn)對內(nèi)耳電解質(zhì)和水代謝的調(diào)控，另外，GC還可有效阻止異常免疫反應(yīng)、抑制炎性介質(zhì)釋放、降低炎性反應(yīng)，從而減輕膜迷路積水，緩解MD患者臨床癥狀。

綜上所述，MD發(fā)作期血清中GC水平低于間歇期(P<0.05)。試驗(yàn)組與對照組、MD發(fā)作期與對照組，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。說明MD間歇期受試者體內(nèi)GC的水平升高，這可能是促進(jìn)MD患者臨床癥狀緩解的因素之一，這一結(jié)果為臨床應(yīng)用GC治療MD提供了理論依據(jù)。