載脂蛋白A5及Alarin在肥胖兒童中的表達水平及其與IR的相關性

毛順峰，馮俊杰

(浙江省嘉興市第一醫院兒科 314000)

隨著生活方式及飲食結構的改變，我國肥胖兒童日漸增多，流行病學調查顯示，7～18歲學生中超重及肥胖者高達19.4%[1]。肥胖與胰島素抵抗(IR)關系密切，可增加糖尿病、非酒精性脂肪肝(NAFLD)等多種代謝性疾病的發生風險[2]，已成為重要的兒童健康問題。因此，深入研究肥胖兒童的發生機制、潛在治療靶點及預防措施對維護兒童健康具有重要的價值。瘦素、脂聯素等傳統脂肪因子是一類來源于脂肪組織的多肽，在糖脂代謝及IR等過程中發揮廣泛生物作用[3]。Alarin是一種新型脂肪因子，既往研究表明，Alarin在成年肥胖人群中表達明顯改變，并與IR等代謝指標具有明顯相關性[4]。載脂蛋白A5(ApoA5)是載脂蛋白超家族的重要成員，對降低三酰甘油(TG)水平具有重要作用，是重要的調脂蛋白[5]。目前，Alarin及ApoA5在兒童肥胖中研究尚不充分。本研究旨在通過分析不同肥胖程度兒童Alarin及ApoA5水平，探討其水平與IR等代謝指標的相關性，為兒童肥胖的干預提供新的數據參考與思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017-2019年于本院門診就診的肥胖兒童75例(肥胖組)作為研究對象。納入標準：(1)符合2009年《中國0～18歲兒童、青少年體重指數生長曲線》中以身高標準體重法定義的肥胖，即超過相同性別、相同身高標準值20%[6]；(2)年齡4～14歲；(3)對研究中相關檢測具有較好的依從性；(4)兒童家長同意參加研究，并簽署知情同意書。排除標準：(1)長期服用過激素等各種原因引起的繼發性肥胖；(2)存在遺傳代謝性疾病；(3)存在肝、腎、心、腦等重要臟器先天性疾病或嚴重功能損害；(4)存在急性或慢性感染性疾病者。參照相關文獻[5]，根據世界衛生組織(WHO)推薦的美國國家衛生統計中心/疾病控制中心(NCHS/CDC)標準及我國兒童體重指數生長曲線[6]，按照體重指數(BMI)將75例肥胖兒童分為輕度肥胖(超過標準值20%～<30%，n=39)、中度肥胖(超過標準值30%～<40%，n=21)及重度肥胖(超過標準值40%～49%，n=15)組。同時選擇同期于本院門診行健康體檢的80例兒童作為對照組。肥胖組兒童中男34例，女41例；年齡7～14歲，平均(10.05±2.01)歲。對照組兒童中男36例，女44例；年齡7～14歲，平均(9.87±1.94)歲。兩組兒童性別、年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

收集研究對象年齡、性別、身高、體重、疾病史等臨床資料，并計算BMI。抽取所有研究對象晨起空腹肘部靜脈血5 mL，檢測TG、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、空腹血糖(FPG)、空腹胰島素(FINS)。采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測Alarin(試劑盒購自美國Phoenix Pharmaceuticals公司)、ApoA5(試劑盒購自美國Millipore公司)及脂聯素(試劑盒購自美國Linco Research公司)水平。計算穩態模型評估IR指數(HOMA-IR)，計算公式如下：

HOMA-IR=(FPG×FINS)/22.5

1.3 統計學處理

2 結 果

2.1 肥胖組與對照組兒童代謝指標比較

與對照組兒童比較，肥胖組兒童TG、TC、LDL-C、FINS、脂聯素、HOMA-IR及Alarin水平明顯升高，HDL-C、ApoA5水平明顯降低，差異有統計學意義(P<0.05)。兩組兒童FPG水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

2.2 不同肥胖程度兒童組間代謝指標比較

不同肥胖程度兒童組間TG、LDL-C、FINS、脂聯素、HOMA-IR、ApoA5及Alarin水平比較，差異有統計學意義(F=36.32、19.46、55.32、35.27、74.70、35.14、19.90，P<0.05)。其中，輕度肥胖組兒童TG、FINS、脂聯素、HOMA-IR及Alarin水平低于中度肥胖組，ApoA5明顯高于中度肥胖組，差異均有統計學意義(t=5.57、4.76、3.91、8.02、3.60、4.11，P<0.05)。中度肥胖組兒童TG、LDL-C、FINS、脂聯素、HOMA-IR及Alarin水平低于重度肥胖組，ApoA5明顯高于重度肥胖組，差異均有統計學意義(t=2.66、4.98、5.11、4.25、4.19、2.86、5.33，P<0.05)。不同肥胖程度組間TC、HDL-C及FPG水平比較，差異無統計學意義(F=0.54、0.62、0.11，P>0.05)，見表2。

表1 肥胖組與對照組兒童代謝指標比較

表2 不同肥胖程度兒童組間代謝指標比較

2.3 肥胖兒童ApoA5、Alarin與代謝指標的相關性分析

相關性分析結果顯示，ApoA5與TG、TC、LDL-C、FINS、脂聯素、HOMA-IR呈明顯負相關(P<0.01)，Alarin與TG、TC、LDL-C、FINS、脂聯素、HOMA-IR呈明顯正相關(P<0.01)，見表3。

表3 ApoA5、Alarin與代謝指標的相關性分析

3 討 論

兒童肥胖以單純性肥胖為主，表現為過度脂肪堆積，脂肪組織作為一個內分泌器官，可特異性分泌大量具有活性的脂肪因子，如脂聯素、瘦素、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及其他炎性因子等，廣泛參與機體的能量與物質代謝及免疫炎癥等多種生理過程[7]。既往研究表明，肥胖與代謝綜合征(MS)的共同病理基礎IR密切相關，兒童肥胖是糖尿病、NAFLD等MS的重要影響因素[8-9]，我國肥胖兒童中NAFLD檢出率高達23%[10]。因此，深入研究促炎及抑炎性脂肪因子，以及代謝指標在肥胖兒童中的表達改變及作用機制或可為肥胖干預提供新的思路，對改善肥胖兒童預后具有重要的臨床意義。

本研究分析肥胖兒童與健康兒童代謝相關指標，結果顯示，肥胖兒童TG、TC、LDL-C、FINS、脂聯素、HOMA-IR明顯升高，HDL-C水平明顯降低，且不同肥胖程度兒童組間上述指標存在明顯差異，提示肥胖兒童存在糖脂代謝改變，該結果與既往研究結果一致[11]。ApoA5是新發現的主要分布于HDL、LDL及乳糜微粒的載脂蛋白超家族成員，有研究發現，ApoA5基因多態性與冠心病、血脂水平有關[12-13]，許虹等[14]研究發現，ApoA5與2型糖尿病等代謝性疾病的發生密切相關，糖尿病患者ApoA5水平與其腰圍、腰臀比具有明顯相關性，提示ApoA5具有重要的調節血脂的功能。本研究中，肥胖兒童ApoA5水平明顯低于對照組，肥胖程度越重，其水平越低，且在肥胖進展過程中改變先于HDL-C等部分傳統代謝指標，提示該指標對肥胖具有較高的靈敏度。相關性分析表明，肥胖兒童ApoA5水平與TG、TC、LDL-C、FINS、脂聯素、HOMA-IR呈明顯負相關(P<0.01)。既往研究表明，ApoA5可與LDL受體(LDLR)家族成員LDLR相關蛋白1(LRP1)有關，通過LRP1介導的胞吞作用被體內最大的TG蓄積池——脂肪細胞攝取并滯留在細胞內，并通過下調脂滴相關蛋白perilipin與Cidec的表達而增加脂質降解，參與脂肪細胞內TG的代謝，影響肥胖的發生與發展[15-16]。

Alarin是甘丙肽家族4種蛋白之一，特異表達于下丘腦不同核團及器官組織，是參與炎性反應、食物攝取、能量代謝、生殖及抗感染的重要活性因子[17-18]。本研究結果顯示，肥胖兒童Alarin水平明顯高于對照組，且不同肥胖程度兒童血清Alarin水平存在明顯差異，輕度肥胖兒童Alarin水平明顯低于重度肥胖兒童。提示肥胖兒童中Alarin水平改變早于HDL-C，說明Alarin對肥胖具有更高的靈敏度，是肥胖發生的早期防御反應之一。相關性分析結果顯示，Alarin與TG、TC、LDL-C、FINS、脂聯素、HOMA-IR呈明顯正相關(P<0.01)，提示Alarin或與多種肥胖及代謝相關因子之間存在關聯，共同參與肥胖及IR的發生與發展，該結果與既往研究結果一致[4,18]，進一步證實了肥胖兒童中Alarin與代謝間的密切關聯。有研究表明，Alarin可通過調節下丘腦促性腺激素釋放激素信號通路襲擊黃體生成素的分泌而促進食欲，是一種重要的攝食調節因子，通過增加脂肪細胞膜中葡萄糖載體4(GLUT4)水平加速GLUT4的跨膜轉運、增加骨骼肌細胞中囊泡相關膜蛋白2(VAMP2)水平而激活蛋白酶B(Akt)-VAMP2-GLUT4信號通路，增加脂肪及骨骼肌等細胞對葡萄糖的攝取，參與機體能量代謝，在肥胖及糖尿病的發生過程中扮演重要角色[19]。

綜上所述，肥胖兒童ApoA5及Alarin發生明顯改變，且與TG、TC、LDL-C、FINS、脂聯素、HOMA-IR等代謝指標具有明顯相關性，是反映兒童肥胖的良好血清標志物，可能與IR及肥胖的發生密切相關，可作為預防兒童肥胖形成及干預的重要靶點，值得進一步深入研究以降低兒童肥胖發生率、改善其遠期預后。