EphrinB2對TNF-α作用下的臍靜脈內皮細胞與牙髓干細胞血管生成的影響

黃雨亭 沈帥 蔣鵬飛 潘爽

中圖分類號:R329.2 文獻標志碼：A doi:10.3969/j.issn.1001-3733.2021.06.009

齲病、外傷、磨損等所引起的牙髓炎和根尖周炎是口腔常見疾病，目前臨床上主要的治療方法為根管治療。但是，這種治療無法恢復牙齒活力，牙齒因缺少牙髓組織的營養供應而變脆，從而增加劈裂的風險[1-2]。近年來，隨著組織工程技術的發展，利用組織工程原理再生牙髓組織是治療牙髓病及根尖周病理想的方法之一，其中血管再生是維持牙髓樣組織長期穩定的關鍵，對維護牙齒的生理機能具有重要意義[3-4]。有文獻報道血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)家族和eph家族都在血管形成過程中發揮較大作用。eph-ephrin信號通路包括ephs及其相應的配體ephrins，其中膜結合蛋白EphrinB2配體和ephb4受體被特異性地認為是血管發生中的關鍵調節劑[5]，EphrinB2可以穩定小管樣結構的形成[6]。有研究表明hDPSCs與HUVECs直接共培養時，hDPSCs中EphrinB2或者ephb4的敲除顯著抑制內皮發芽，導致毛細血管發芽減少[7]；另外有研究表明HUVECs與過表達EphrinB2的根尖乳頭干細胞共同培養可加速血管生成，產生灌注量更大的血管[8]。

腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-alpha，TNF-α)是炎癥發生的早期標志因子，可以激活并調控多種細胞內信號通路，低劑量的TNF-α可誘導體內和體外血管生成[9]。本課題組前期研究表明TNF-α可促進共培養體系體外血管生成能力，Western blot證明實驗組較對照組VEGF表達顯著較高[10]，但EphrinB2是否在這一過程中發揮作用尚不明確。因此，本實驗目的是探究EphrinB2對TNF-α作用下的HUVECs與hDPSCs體外共培養系統中血管生成的影響。

1 材料與方法

1.1 主要儀器與試劑

DMEM高糖培養基(Hyclone，USA)；……