CPH-I、DJ-1蛋白在上皮性卵巢腫瘤性質鑒別中的價值

褚璐璐 袁 博 邢 偉

臨床上上皮性卵巢腫瘤的發病風險較高，在具有相關家族史或者合并有癌基因攜帶的群體中，上皮性卵巢腫瘤的發生風險可進一步上升[1-2]。臨床上通過對于上皮性卵巢腫瘤的診斷或者鑒別診斷，能夠在卵巢腫瘤的手術治療或者治療方案的制定等方面發揮作用。人蛋白DJ-1蛋白是近年來新發現的腫瘤基因，其對于卵巢上皮細胞的異常增殖具有一定的調控作用，還可以顯著促進癌細胞核DNA的異常分裂過程[3]；哥本哈根指數(Copenhagen index，CPH-1)能夠通過結合CA125及HE4，對癌細胞的異常分化增殖過程反應，進而具有評估卵巢惡性腫瘤的發生風險作用。目前為止，相關背景研究已經探討了CPH-1在卵巢惡性腫瘤鑒別診斷過程中的價值，認為其能夠顯著提高卵巢腫瘤的鑒別效能，但對于CPH-1或者DJ-1蛋白的表達與卵巢癌臨床病理特征的關系分析不足，本文對此進行研究，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 對象

本文選取我院2016年1月至2019年7月經病理學檢查確診的上皮性卵巢癌患者66例作為惡性組、80例卵巢良性腫瘤患者作為良性組，所有患者符合中華醫學會制定關于上皮性卵巢癌患者的診斷參考標準[4]。惡性組的年齡范圍(37～67)歲，平均年齡(55.2±8.6)歲；根據國際婦產聯盟(FIGO)分期包括：Ⅰ期13例、Ⅱ期25例、Ⅲ期12例、Ⅳ期6例；組織學分化：高分化16例、中分化31例、低分化19例；病理學類型：漿液性癌患者53例、非漿液性癌患者13例。良性組，年齡范圍(35～65)歲，平均(54.2±10.0)歲；病理學類型：卵巢囊腫患者22例、卵巢漿液性腺瘤患者34例、卵巢黏液性腺瘤患者24例。惡性組與良性組在上述一般資料上比較，無統計學上的差異(P>0.05)，可進行比較。

1.2 方法

1.2.1 血清DJ-1蛋白的檢測方法 樣本采集與提取：用采血管取患者的清晨肘部靜脈血，搖勻，并離心，其上清液為樣本。血清DJ-1蛋白的檢測：經過孵育、洗滌等反復處理后，加入TMB顯色底液并避光36 ℃孵育15 min，最后加入100 μl的終止液并在3 min內檢測OD450值。BioTek酶標儀(由美國伯騰儀器有限公司生產)。

1.2.2 CPH-I評測方法 取患者外周靜脈血3～5 ml，放置室溫下5～10 min，在自然分層后，抽取上層清亮液體進行檢測。使用化學發光免疫分析儀(由貝克曼庫爾特UniCel DxI 800生產)對HE4、CA125檢測，EasyBlot ECL化學發光顯色試劑盒(由賽默飛公司生產)。CPH-I=-14.0647+1.0649×LOG2(HE4)+0.6050×LOG2(CA125)+0.2672×年齡/10。

1.3 統計方法

2 結果

2.1 2組患者的DJ-1蛋白、CPH-1對比

經2組獨立樣本t檢驗分析，惡性組患者的DJ-1蛋白、CPH-1均高于良性組，具有統計學差異(P<0.05)，見表1。

表1 2組患者的DJ-1蛋白、CPH-1對比

2.2 卵巢上皮性惡性腫瘤的病理學特征與DJ-1蛋白、CPH-1的關系

在不同FIGO分期、不同病理學類型、不同分化程度的卵巢上皮性惡性腫瘤患者血清中DJ-1蛋白水平均無統計學差異(P>0.05)；見表2。

表2 卵巢上皮性惡性腫瘤的病理學特征與DJ-1蛋白的關系

不同FIGO分期、不同分化程度的上皮性卵巢惡性腫瘤患者的CPH-1指數具有統計學差異(P<0.05)，見表3。

表3 卵巢上皮性惡性腫瘤的病理學特征與CPH-1的關系

2.3 血清DJ-1蛋白、CPH-1鑒別診斷上皮性卵巢腫瘤良惡性的價值

血清中DJ-1蛋白鑒別診斷上皮性卵巢腫瘤良惡性的靈敏度為66.03%、特異度為78.14%、ROC曲線下面積AUC值為0.745；CPH-1鑒別診斷上皮性卵巢腫瘤良惡性的靈敏度為94.28%、特異度為84.57%、ROC曲線下面積AUC值為0.909；見表4、圖1。

表4 血清DJ-1蛋白、CPH-1鑒別診斷上皮性卵巢腫瘤良惡性的價值

圖1 血清DJ-1蛋白、CPH-1鑒別診斷上皮性卵巢腫瘤良惡性的ROC曲線

3 討論

臨床上卵巢惡性腫瘤的發病率或者年發病人數均維持在較高的水平，在卵巢生發上皮細胞異常病變的過程中，不同來源惡性腫瘤細胞的發生風險越高，其遠期臨床結局的惡化越為顯著[5]。上皮性卵巢腫瘤的早期診斷水平較低，鑒于卵巢屬于中空性器官，其早期發生惡性腫瘤病變時多數患者可無明顯的臨床癥狀。對于上皮性卵巢腫瘤的早期診斷或者鑒別診斷，能夠在提高卵巢癌根治性手術切除率、降低卵巢癌的遠期復發率、改善卵巢腫瘤患者的生存預后方面發揮作用。影像學檢查雖然能夠在上皮性卵巢腫瘤的診斷過程中發揮作用，但婦科超聲檢查對于部分早期卵巢腫瘤的漏診率較高，其早期鑒別的陽性預測值較低。血清中糖鏈蛋白125(CA125)或者附睪蛋白(HE4)雖然能夠在上皮性卵巢腫瘤的鑒別過程中發揮作用，但其單獨檢測的鑒別價值較低，單獨檢測對于卵巢惡性腫瘤的鑒別靈敏度不足40%[6-7]。

DJ-1是新發現的腫瘤標志物，其作為癌基因相關家族成員，可以對卵巢上皮細胞上游轉錄的激活程度產生影響，加劇癌細胞的異常分化過程。DJ-1蛋白作為腫瘤信號通路調控蛋白，其對于癌細胞內效應因子或者第二信使的激活，能夠加劇癌細胞核基因錯配的風險[8]；CPH-1是結合CA125及HE4的風險預測模型，其能夠在不同年齡段的卵巢惡性腫瘤的鑒別過程中發揮作用[9]。多數研究者單獨探討了CPH-1在卵巢腫瘤診斷過程中的作用，認為其能夠提高卵巢惡性腫瘤的早期篩查價值[10-13]，但對于DJ-1蛋白的分析較少。

本文通過對于卵巢腫瘤患者中DJ-1蛋白、CPH-1的表達分析可見，在卵巢惡性組患者中，DJ-1蛋白的表達濃度明顯上升，而CPH-1評分也明顯的上升，高于卵巢良性腫瘤組，統計學差異顯著，這一結果說明DJ-1蛋白、CPH-1的高表達或者高評分都可以對卵巢惡性腫瘤的病情進展過程產生影響。這主要由于DJ-1蛋白的表達上升，能夠加劇卵巢卵泡上皮細胞癌基因的激活，提高下游MAPK信號通路的激活，最終促進癌細胞的異常發生；CPH-1評分的上升，能夠反應體內CA125或者HE4蛋白的波動情況，CPH-1評分越高，患者體內腫瘤指標的波動越為明顯，惡性腫瘤的發生風險越高。其他相關研究也表明，在卵巢惡性腫瘤患者中，DJ-1蛋白的水平平均可上升40%，而且在多發轉移或者合并有明顯腹水的患者中，其上升更為顯著[14-15]。在探討DJ-1蛋白、CPH-1與卵巢惡性腫瘤患者臨床病理特征的關系中，得知DJ-1蛋白的表達與卵巢惡性腫瘤臨床病理特征并無密切的關系，提示DJ-1蛋白的異常表達并不會影響到癌細胞的生物學行為，不會影響到癌細胞的特征。在臨床分期較晚或者卵巢癌細胞分化程度較差的患者中，CPH-1評分明顯上升，表明CPH-1評分的改變能夠影響到卵巢癌細胞的浸潤或者癌細胞分化成熟。這主要由于CPH-1能夠反應CA125或者HE4的表達，而CA125或者HE4的表達又直接與癌細胞的浸潤和分化過程有關。診斷學方面的分析可見，DJ-1蛋白、CPH-1在單獨診斷卵巢惡性腫瘤的過程中均具有一定的價值，但CPH-1診斷的靈敏度及特異度相對較高，臨床上可以通過CPH-1預測風險模型，進而評估卵巢惡性腫瘤的發生風險。

綜上所述，在卵巢惡性腫瘤患者中，DJ-1蛋白、CPH-1明顯上升，在鑒別診斷上皮性卵巢腫瘤良惡性中的應用價值上，CPH-1優于血清DJ-1蛋白，能夠反應出卵巢惡性腫瘤的惡性程度。